即用型荧光定量 RT-PCR 试剂盒50 次实验方法产品介绍：

即用型荧光定量 RT-PCR 试剂盒50 次实验方法产品及特点:

本试剂盒提供合成 cDNA *链所需要的全部试剂。其原理是用突变的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反转录酶（M-MuLV RT）高效合成 mRNA 的全长 cDNA 拷贝。
1. 使用突变的反转录酶，内源 RNase H 活性低。
2. zui长可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、随机引物和 RNA 专一性引物三种引物（前两种本试剂盒提 供）。
4. 总 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作为模板。
5. 可用于 cDNA 文库构建、RT-PCR、探针标记等。

合成建文库用的 1st-strand cDNA:

1. 按下表配制 RT 反应体系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或专一的 RNA 0.5-1 ug
注意：RNA 样品不能含有基因组 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或随机引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板专一性引物 100 pmol 注意：随机引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均长度成反比。 RNase-free 水 补水到 13 uL 2. 70℃保温 5 分钟后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含 dNTP）。
4. 37℃保温 5 分钟。对富含二级结构的高 GC RNA 模板，可以改成 45℃保 温 5 分钟。如果使用随机引物，则改成 25℃ 5 分钟）。
5. 加入 2 uL MMLV 逆转录酶（含 RI），反应终体积为 20uL。
6. 42℃保温 60 分钟（但如果使用随机引物，需要先 25℃保温 10 分钟，然 后再转移到 42℃保温 60 分钟）。此步为 RT 反应。
7. 70℃保温 10 分钟以终止反应，放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二链 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
按下表配制 RT 反应体系:
对照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或随机引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或对照引物 2 uL
RNase-free 水 补水到 13 uL
2. 70℃保温 5 分钟后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含标记 dNTP，本试剂不提供）。
4. 37℃保温 5 分钟。如果使用随机引物，则保温温度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆转录酶（含 RI），反应终体积为 20uL。
6. 42℃保温 60 分钟（但如果使用随机引物，需要先 25℃保温 10 分钟，然后再转移到 42℃保温 60 分钟）。
7. 加 1uL 0.5M EDTA，放置在冰上待用。
8. 电泳检测。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 总量的 50%以上，电泳一般能出现 1.1Kb 的片段（如果使用随机引物，将出现多个小片段）。

偶氮胭脂红B
〖英文名称〗：Azocarmine B；Rosinduline 2B；C.I.50090
〖其他名称〗：偶氮洋红B；偶氮红B
〖CAS号〗：25360-72-9
C28H17N3Na2O9S3=681.62
〖级别〗：BS
〖熔点〗：≥300℃
λmax：～516 nm (H2O)
〖〖性状〗(以下信息仅供参考)〗：红棕色粉末。易溶于吡啶，溶于水和乙二醇，极微溶于乙醇、乙酸乙酯、二甲苯、丙同、氯方、苯甲醇和橄榄油。水溶液呈蓝红色，加盐酸有棕色沉淀。在浓硫酸中呈绿色，稀释后有蓝棕色沉淀。
〖用途〗：本品仅供科研，不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗仅供参考)生物染色。色谱和电泳中蛋白染色。
〖保存〗：RT
偶氮胭脂红G
〖英文名称〗：Azocarmine G；Rosinduline GXF；Rosazine；Rosinduline；N-Phenylrosinduline sulfonic acid disodium salt；C.I.50085
〖其他名称〗：酸性红101；偶氮洋红G；玫红对氮蒽；偶氮红G；罗星杜林；玫红杜林
〖CAS号〗：25641-18-3
C28H18N3NaO6S2=579.58
〖级别〗：BS
〖鉴别〗：合格
λmax：523～526nm (H2O)
〖〖性状〗(以下信息仅供参考)〗：带金黄色光泽的红色或棕色或紫色粉末。微溶于水,溶液呈蓝红色。
〖用途〗：本品仅供科研，不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗仅供参考)组织染色。氧化还原指示剂。
〖保存〗：RT
酒石黄
〖英文名称〗：Tartrazine；Tartar yellow；3-Carboxy-5-hydroxy-1-p-sulfophenyl-4-p-sulfophenylazopyrazole trisodium salt；4-(p-Sulfobenzeneazo)-1-p-sulfophenyl-5-hydroxypyrazole-3-carboxylic acid trisodium salt；C.I.19140

三合一 RNA 上样液 ( 含 EB)     MDS 42recA trfA 菌种
三合一 RNA 上样液 ( 无 EB)     *0 菌种
RNA 电泳液 ,10×    LBA4404 农杆菌菌种
RNA 电泳液 ,10×    Oligo 快速复性液，10×
RNase A 溶液，10mg/mL    天净沙 DNA 甲基化修饰试剂盒
溴化乙锭溶液 ,10 mg/mL    MnCl2溶液，25mM，PCR 
水饱和酚    一管式双链 cDNA 合成试剂盒
Tris 饱和酚    柱式海洋动物 DNAout
Cre/Lox 系统载体系列    克必隆 eTS mRNA 扩增试剂盒
电泳 SYBR Green I    克必隆 eTS PCR 法 cDNA 合成试剂盒
RNase 抑制剂