免 RNA 提取 RT-PCR 试剂盒 100 次实验步骤产品及特点:
本试剂盒提供合成 cDNA *链所需要的全部试剂。其原理是用突变的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反转录酶（M-MuLV RT）高效合成 mRNA 的全长 cDNA 拷贝。
1. 使用突变的反转录酶，内源 RNase H 活性低。
2. zui长可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、随机引物和 RNA 专一性引物三种引物（前两种本试剂盒提 供）。
4. 总 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作为模板。
5. 可用于 cDNA 文库构建、RT-PCR、探针标记等。
免 RNA 提取 RT-PCR 试剂盒 100 次实验步骤产品介绍：

合成建文库用的 1st-strand cDNA:

1. 按下表配制 RT 反应体系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或专一的 RNA 0.5-1 ug
注意：RNA 样品不能含有基因组 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或随机引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板专一性引物 100 pmol 注意：随机引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均长度成反比。 RNase-free 水 补水到 13 uL 2. 70℃保温 5 分钟后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含 dNTP）。
4. 37℃保温 5 分钟。对富含二级结构的高 GC RNA 模板，可以改成 45℃保 温 5 分钟。如果使用随机引物，则改成 25℃ 5 分钟）。
5. 加入 2 uL MMLV 逆转录酶（含 RI），反应终体积为 20uL。
6. 42℃保温 60 分钟（但如果使用随机引物，需要先 25℃保温 10 分钟，然 后再转移到 42℃保温 60 分钟）。此步为 RT 反应。
7. 70℃保温 10 分钟以终止反应，放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二链 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
按下表配制 RT 反应体系:
对照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或随机引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或对照引物 2 uL
RNase-free 水 补水到 13 uL
2. 70℃保温 5 分钟后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含标记 dNTP，本试剂不提供）。
4. 37℃保温 5 分钟。如果使用随机引物，则保温温度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆转录酶（含 RI），反应终体积为 20uL。
6. 42℃保温 60 分钟（但如果使用随机引物，需要先 25℃保温 10 分钟，然后再转移到 42℃保温 60 分钟）。
7. 加 1uL 0.5M EDTA，放置在冰上待用。
8. 电泳检测。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 总量的 50%以上，电泳一般能出现 1.1Kb 的片段（如果使用随机引物，将出现多个小片段）。

〖其他名称〗：肼黄；食用柠檬黄；酸性黄23；1-(4-磺酸苯基)-4-(4-磺酸苯基偶氮)-5-吡唑啉酮-3-羧酸三钠盐；食用色素黄色5号；他特秦
〖CAS号〗：1934-21-0
C16H9N4Na3O9S2=534.36
〖级别〗：BS
〖含量〗：≥85.0%
〖重金属〗：≤40ppm
〖砷〗：≤3ppm
〖铅〗：≤10ppm
〖〖性状〗(以下信息仅供参考)〗：橙黄色粉末。21℃时的溶解度为：水11.8%，10%的乙醇9%，50%的乙醇3%，溶于甘油，丙二醇，不溶于油脂，属偶氮型酸性染料，耐热性，耐酸性，耐光性，耐盐性均好，在柠檬酸及酒石酸等溶液中很安定。耐氧化性较差，遇碱稍变红，还原时褪色。〖熔点〗：300℃。
〖用途〗：本品仅供科研，不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗仅供参考)生物染色用。沉淀滴定的吸附指示剂，如用于银盐滴定氯和碘离子，也用作氧化还原指示剂。
〖保存〗：RT
诱惑红
〖英文名称〗：Allura Red AC；Disodium 6-hydroxy-5-[(2-methoxy-4-sulphonato-m-tolyl)azo]naphthalene-2-sulphonate
〖其他名称〗：6-羟基-5-［(2-甲氧基-5-甲基-4-磺本基)偶氮］2-萘磺酸二钠盐；诱惑红AC；食品红17；大红贝司RC；显色基艳红RB；咖喱红；红 40 [CI 16035]；C.I.冰染重氮组分13
〖CAS号〗：25956-17-6

RNase 抑制剂 ( 人源 )    克必隆 RACE 试剂盒
ELISA 试剂盒系列    克必隆 eTS cDNA 文库构建试剂盒
微量 DNA 助沉剂    克必隆 eTS 抑制性差减杂交 PCR 试剂盒
非冻型组织 DNA 保存液    克必隆 eTS PCR 产物差减杂交试剂盒
非冻型组织 DNA 保存液    克必隆 eTS 细菌基因组差减杂交试剂盒
动物 DNAout    克必隆 eTS RNA 荧光探针制备试剂盒
动物 DNAout    克必隆 eTS 核心试剂盒
血液 DNAout    肝素琼脂糖
血液 DNAout    肝素琼脂糖
植物 DNAout    克必隆 eTS miRNA RT-PCR 试剂盒
一管式病毒 DNAout    克必隆 eTS miRNA cDNA 文库构建试剂盒
一管式病毒 DNAout    蓝胶琼脂糖
DNA 上样液 ( 红 ),6×    蓝胶琼脂糖
DNA 上样液 ( 蓝 ),6×    Protein A 琼脂糖
克必隆 G 载体    内毒素清除亲和介质
制剂