两管式 RT-PCR 试剂盒 (MMLV-Taq)50 次说明书产品介绍：

两管式 RT-PCR 试剂盒 (MMLV-Taq)50 次说明书产品及特点:

本试剂盒提供合成 cDNA *链所需要的全部试剂。其原理是用突变的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反转录酶（M-MuLV RT）高效合成 mRNA 的全长 cDNA 拷贝。
1. 使用突变的反转录酶，内源 RNase H 活性低。
2. zui长可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、随机引物和 RNA 专一性引物三种引物（前两种本试剂盒提 供）。
4. 总 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作为模板。
5. 可用于 cDNA 文库构建、RT-PCR、探针标记等。

两管式 RT-PCR 试剂盒 (MMLV-Taq)50 次说明书合成建文库用的 1st-strand cDNA:

1. 按下表配制 RT 反应体系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或专一的 RNA 0.5-1 ug
注意：RNA 样品不能含有基因组 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或随机引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板专一性引物 100 pmol 注意：随机引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均长度成反比。 RNase-free 水 补水到 13 uL 2. 70℃保温 5 分钟后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含 dNTP）。
4. 37℃保温 5 分钟。对富含二级结构的高 GC RNA 模板，可以改成 45℃保 温 5 分钟。如果使用随机引物，则改成 25℃ 5 分钟）。
5. 加入 2 uL MMLV 逆转录酶（含 RI），反应终体积为 20uL。
6. 42℃保温 60 分钟（但如果使用随机引物，需要先 25℃保温 10 分钟，然 后再转移到 42℃保温 60 分钟）。此步为 RT 反应。
7. 70℃保温 10 分钟以终止反应，放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二链 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
两管式 RT-PCR 试剂盒 (MMLV-Taq)50 次说明书按下表配制 RT 反应体系:
对照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或随机引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或对照引物 2 uL
RNase-free 水 补水到 13 uL
2. 70℃保温 5 分钟后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含标记 dNTP，本试剂不提供）。
4. 37℃保温 5 分钟。如果使用随机引物，则保温温度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆转录酶（含 RI），反应终体积为 20uL。
6. 42℃保温 60 分钟（但如果使用随机引物，需要先 25℃保温 10 分钟，然后再转移到 42℃保温 60 分钟）。
7. 加 1uL 0.5M EDTA，放置在冰上待用。
8. 电泳检测。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 总量的 50%以上，电泳一般能出现 1.1Kb 的片段（如果使用随机引物，将出现多个小片段）。

〖英文名称〗：Sulforhodamine B
〖其他名称〗：磺酰罗丹明B细胞培养试剂染料；硫丹明B
〖CAS号〗：2609-88-3
C27H30N2O7S2=558.67
〖级别〗：Laser grade
〖含量〗：≥95.0%
〖熔点〗：≥300℃
UV absorption：λmax 558nm
〖〖性状〗(以下信息仅供参考)〗：绿色或褐色晶体或结晶粉末。
〖用途〗：本品仅供科研，不得用于其它〖用途〗
〖保存〗：RT
依来铬蓝R
〖英文名称〗：Eriochrome cyanine R；5-[α-(3-carboxy-5-methyl-4-oxo-2, 5-cyclohexadien-1-ylidene)-2-sulfobenzyl]-3-methylsalicylic acid,Eriochrome cyanine；Chromoxane cyanine R；Cyanine R；Chrome cyanine R；Solochrome cyanine R；C.I. 43820
〖其他名称〗：蓝光酸性铬花青；羊毛铬菁；媒介蓝3；羊毛铬花青R；3,3'-(3H-2,1-苯并恶噻-3-亚基)双(6-羟基-5-甲基苯甲酸) S,S-二氧化物三钠盐；铬花青R
〖CAS号〗：3564-18-9
C23H15Na3O9S=536.39
〖级别〗：Reagent grade

两管式 RT-PCR 试剂盒 (MMLV-Taq)50 次说明书红细胞裂解液 A 型 ( 核酸纯化 )     α2巨球蛋白
超培养基    AEBSF 溶液，10mg/mL
RNase-free DTT 溶液 ,1M    膦酰二肽溶液，10mg/mL
RNA  b-Mercaptoethanol(2- 基乙醇 )    天净沙单细胞 RNA 扩增试剂盒
通用洗柱液    碱性磷酸酶，偶联
通用洗柱液    Origami(DE3) 感受态细胞
通用洗柱液    Origami B(DE3)plysS 感受态细胞 
一管式拭子 DNAout    Rosetta(DE3)pLysS 感受态细胞
一管式拭子 DNAout    Rosetta-gami(DE3) 感受态细胞
DNA UV 防护剂    Rosetta-gami(DE3)pLysS 感受态细胞
柱式植物 DNAout    Tuner(DE3) 感受态细胞
即用型蓝白 T 载体 A 型 (T7-SP6，有 MCS)    Tuner(DE3)plysS 感受态细胞
DEPC 水    β-Actin 小鼠单抗
RNase-free PVP K30 溶液 ,20%    β-Actin 小鼠单抗
硅胶膜离心吸附柱再生液    α-Actin 小鼠单抗
液相内毒素清除剂    α-Actin 小鼠单抗
    小鼠抗 mCherry