miRNA 荧光定量检测试剂盒25 次实验步骤产品介绍：

miRNA 荧光定量检测试剂盒25 次实验步骤产品及特点:

本试剂盒提供合成 cDNA *链所需要的全部试剂。其原理是用突变的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反转录酶（M-MuLV RT）高效合成 mRNA 的全长 cDNA 拷贝。
1. 使用突变的反转录酶，内源 RNase H 活性低。
2. zui长可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、随机引物和 RNA 专一性引物三种引物（前两种本试剂盒提 供）。
4. 总 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作为模板。
5. 可用于 cDNA 文库构建、RT-PCR、探针标记等。

合成建文库用的 1st-strand cDNA:

1. 按下表配制 RT 反应体系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或专一的 RNA 0.5-1 ug
注意：RNA 样品不能含有基因组 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或随机引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板专一性引物 100 pmol 注意：随机引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均长度成反比。 RNase-free 水 补水到 13 uL 2. 70℃保温 5 分钟后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含 dNTP）。
4. 37℃保温 5 分钟。对富含二级结构的高 GC RNA 模板，可以改成 45℃保 温 5 分钟。如果使用随机引物，则改成 25℃ 5 分钟）。
5. 加入 2 uL MMLV 逆转录酶（含 RI），反应终体积为 20uL。
6. 42℃保温 60 分钟（但如果使用随机引物，需要先 25℃保温 10 分钟，然 后再转移到 42℃保温 60 分钟）。此步为 RT 反应。
7. 70℃保温 10 分钟以终止反应，放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二链 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
按下表配制 RT 反应体系:
对照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或随机引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或对照引物 2 uL
RNase-free 水 补水到 13 uL
2. 70℃保温 5 分钟后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含标记 dNTP，本试剂不提供）。
4. 37℃保温 5 分钟。如果使用随机引物，则保温温度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆转录酶（含 RI），反应终体积为 20uL。
6. 42℃保温 60 分钟（但如果使用随机引物，需要先 25℃保温 10 分钟，然后再转移到 42℃保温 60 分钟）。
7. 加 1uL 0.5M EDTA，放置在冰上待用。
8. 电泳检测。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 总量的 50%以上，电泳一般能出现 1.1Kb 的片段（如果使用随机引物，将出现多个小片段）。

硝酸盐：≤0.01%
〖〖性状〗(以下信息仅供参考)〗：白色或微带黄绿色结晶或结晶性粉末。略有风化性。溶于约0.5份水，溶于乙醇、乙迷
〖用途〗：本品仅供科研，不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗仅供参考)各种生物碱、含氮碱、酚、蛋白质、蛋白胨、氨基酸、脲酸、脲、血液和糖类的试剂。生物染色。
〖保存〗：RT
赖纳克氏盐
〖英文名称〗：Reinecke salt；Ammonium reineckate；Ammonium tetrathiocyanatodiamminechromate
〖其他名称〗：雷氏盐；利英纳克盐；四硫基二氨络铬酸铵；利英钠克盐；二氨基四硫代酸铬铵；二氨合四硫基铬酸铵(III)
〖CAS号〗：13573-16-5
NH4[Cr(NH3)2(SCN)4]=336.43
〖级别〗：AR
水溶解试验：合格
对氯化*灵敏度试验：合格
〖〖性状〗(以下信息仅供参考)〗：深红色结晶或红色结晶性粉末。溶于热水和乙醇,微溶于冷水。在水溶液中分解游离氢青酸而成蓝色。室温时分解约在二周内发生,温度高于65℃时速度加快。在沸乙醇中有相似分解发生。〖熔点〗 268～272℃(分解)。
〖用途〗：本品仅供科研，不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗仅供参考)比色测定*及其他有机碱。伯胺、仲胺、*、羟基*和某些氨基酸的沉淀剂。汞的显色剂和沉淀剂
〖保存〗：RT
赖纳克氏盐一水物

预染蛋白质电泳分子量标准 (43.0-200.0 KD)    烷基腺嘌呤 DNA 糖基化酶
DNA 洗脱液    甲酰胺嘧啶 [fapy]-DNA 糖基化酶
DNA 洗脱液    8- 氧代* DNA 糖基化酶
非酶 DNA 清除剂 -2    * -DNA 糖基化酶
即用型 PCR 试剂盒 2.0     *糖基化酶抑制剂
即用型 PCR 试剂盒 2.0     Afu * -DNA 糖基化酶
免质粒提取筛选试剂盒    人类单链选择性单功能* -DNA 糖基化酶
一步法单菌落质粒 DNAout    DNA 促旋酶 (E.coli)
柱式真菌 DNAout    GpC 甲基转移酶 (M.CviPI)
甜菜碱溶液，5M，PCR     热敏磷酸酶
一步法质粒 DNAout 2.0    无机焦磷酸酶，热稳定
一步法质粒 DNAout 2.0    无机焦磷酸酶 ( 酵母 )
酵母 tRNA 溶液 A( 粗提 )    三磷酸腺苷双磷酸酶
酵母 tRNA 溶液 B( 精提 )    ATP 硫酸化酶
t    Dicer(RNase III)