cDNA *链合成试剂盒10 次实验步骤产品介绍：

cDNA *链合成试剂盒10 次实验步骤产品及特点:

本试剂盒提供合成 cDNA *链所需要的全部试剂。其原理是用突变的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反转录酶（M-MuLV RT）高效合成 mRNA 的全长 cDNA 拷贝。
1. 使用突变的反转录酶，内源 RNase H 活性低。
2. zui长可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、随机引物和 RNA 专一性引物三种引物（前两种本试剂盒提 供）。
4. 总 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作为模板。
5. 可用于 cDNA 文库构建、RT-PCR、探针标记等。

合成建文库用的 1st-strand cDNA:

1. 按下表配制 RT 反应体系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或专一的 RNA 0.5-1 ug
注意：RNA 样品不能含有基因组 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或随机引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板专一性引物 100 pmol 注意：随机引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均长度成反比。 RNase-free 水 补水到 13 uL 2. 70℃保温 5 分钟后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含 dNTP）。
4. 37℃保温 5 分钟。对富含二级结构的高 GC RNA 模板，可以改成 45℃保 温 5 分钟。如果使用随机引物，则改成 25℃ 5 分钟）。
5. 加入 2 uL MMLV 逆转录酶（含 RI），反应终体积为 20uL。
6. 42℃保温 60 分钟（但如果使用随机引物，需要先 25℃保温 10 分钟，然 后再转移到 42℃保温 60 分钟）。此步为 RT 反应。
7. 70℃保温 10 分钟以终止反应，放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二链 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
按下表配制 RT 反应体系:
对照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或随机引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或对照引物 2 uL
RNase-free 水 补水到 13 uL
2. 70℃保温 5 分钟后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含标记 dNTP，本试剂不提供）。
4. 37℃保温 5 分钟。如果使用随机引物，则保温温度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆转录酶（含 RI），反应终体积为 20uL。
6. 42℃保温 60 分钟（但如果使用随机引物，需要先 25℃保温 10 分钟，然后再转移到 42℃保温 60 分钟）。
7. 加 1uL 0.5M EDTA，放置在冰上待用。
8. 电泳检测。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 总量的 50%以上，电泳一般能出现 1.1Kb 的片段（如果使用随机引物，将出现多个小片段）。

〖灼烧残渣〗(以〖硫酸盐〗计)：≤0.4%
〖〖性状〗(以下信息仅供参考)〗：橙黄色结晶性粉末。溶于冰乙酸和乙醇，遇碱呈红棕色，遇酸呈浅黄色，不溶于水和乙迷。〖熔点〗183℃。有刺激性
〖用途〗：本品仅供科研，不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗仅供参考)姜黄试纸，pH 8～9。测定硼
〖保存〗：RT
固紫B
〖英文名称〗：Fast Violet B Salt；Azoic Diazo No. 41；4-Benzoylamino-2-methoxy-5-methylbenzenediazonium chloride hemi(zinc chloride) salt；4-Amino-5-methoxy-2-methylbenzanilide diazotated zinc double salt
〖其他名称〗：固紫B盐；耐晒紫B盐；固紫罗兰B盐；坚牢紫B盐；重氮坚牢紫B
〖CAS号〗：14726-28-4
C15H14N3O2·0.5ZnCl4=371.89
〖级别〗：BR
〖含量〗Dye content：≥60.0%
〖〖性状〗(以下信息仅供参考)〗：黄色至褐色结晶性粉末。溶于水：10mg/ml
〖用途〗：本品仅供科研，不得用于其它〖用途〗
〖保存〗：-20℃

柱式凋亡 DNAout    链霉亲和素，HRP 标记
微型离心管研磨杵 ( 无离心管 )     Bouin 固定液
微型离心管研磨杵 ( 有离心管 )     阿尔玛蓝细胞增殖与细胞毒检测试剂
TG1 化学感受态细胞    阿尔玛蓝细胞增殖与细胞毒检测试剂
柱式拭子 DNAout    *
非冻型拭子 DNA 保存液 A( 无拭子 )     多点突变试剂盒
非冻型拭子 DNA 保存液 B( 有拭子 )     冷启动核酸酶
柱式动物线粒体 DNAout，PCR     cDNA 文库构建试剂盒
柱式真菌 RNAout    小 RNA 克隆试剂盒
柱式毛发 DNAout    DNA 去磷酸化试剂盒
    M13mp18DNA