ROX 参考染料 II100μL说明书
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2017-01-19 14:45:39
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产品简介

ROX 参考染料 II100μL说明书运输及保存 低温运输,-20℃保存,有效期一年。

详细介绍

ROX 参考染料 II100μL说明书产品及特点:
本试剂盒提供合成 cDNA *链所需要的全部试剂。其原理是用突变的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反转录酶(M-MuLV RT)高效合成 mRNA 的全长 cDNA 拷贝。
1. 使用突变的反转录酶,内源 RNase H 活性低。
2. zui长可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、随机引物和 RNA 专一性引物三种引物(前两种本试剂盒提 供)。
4. 总 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作为模板。
5. 可用于 cDNA 文库构建、RT-PCR、探针标记等。
ROX 参考染料 II100μL说明书产品介绍:

ROX 参考染料 II100μL说明书合成建文库用的 1st-strand cDNA:

1. 按下表配制 RT 反应体系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或专一的 RNA 0.5-1 ug
注意:RNA 样品不能含有基因组 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或随机引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板专一性引物 100 pmol 注意:随机引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均长度成反比。 RNase-free 水 补水到 13 uL 2. 70℃保温 5 分钟后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含 dNTP)。
4. 37℃保温 5 分钟。对富含二级结构的高 GC RNA 模板,可以改成 45℃保 温 5 分钟。如果使用随机引物,则改成 25℃ 5 分钟)。
5. 加入 2 uL MMLV 逆转录酶(含 RI),反应终体积为 20uL。
6. 42℃保温 60 分钟(但如果使用随机引物,需要先 25℃保温 10 分钟,然 后再转移到 42℃保温 60 分钟)。此步为 RT 反应。
7. 70℃保温 10 分钟以终止反应,放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二链 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
ROX 参考染料 II100μL说明书按下表配制 RT 反应体系:
对照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或随机引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或对照引物 2 uL
RNase-free 水 补水到 13 uL
2. 70℃保温 5 分钟后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含标记 dNTP,本试剂不提供)。
4. 37℃保温 5 分钟。如果使用随机引物,则保温温度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆转录酶(含 RI),反应终体积为 20uL。
6. 42℃保温 60 分钟(但如果使用随机引物,需要先 25℃保温 10 分钟,然后再转移到 42℃保温 60 分钟)。
7. 加 1uL 0.5M EDTA,放置在冰上待用。
8. 电泳检测。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 总量的 50%以上,电泳一般能出现 1.1Kb 的片段(如果使用随机引物,将出现多个小片段)。

对二甲氨基亚苄基罗丹宁
〖英文名称〗:4-Dimethylaminobenzal rhodanine;p-Dimethylaminobenzal rhodanine;5-[p-(Dimethylamino)benzylidene]rhodanine;5-[(4-(Dimethylamino)phenyl)methylene]-2-thioxo-4-thiazolidinone
〖其他名称〗:玫瑰红银试剂;对二甲氨基苯甲罗丹宁;5-[4-(二甲基氨基)苯基]亚甲基-2-硫代-4-噻唑烷酮;对二甲氨基亚苄罗丹宁;试银灵;对二甲氨基苄罗丹宁;5-(对二甲氨基亚苄基)罗丹宁;4-二甲氨基亚苄基罗丹宁;5-(4-二甲氨基亚苄基)罗丹宁
〖CAS号〗:536-17-4
C12H12N2OS2=264.37
〖级别〗:AR
丙同溶解试验:合格
对银灵敏度试验:合格
〖灼烧残渣〗(以〖硫酸盐〗计):≤0.2%
〖〖性状〗(以下信息仅供参考)〗:深红色针状结晶。溶于强酸呈黄色,溶于丙同,微溶于沸乙醇,极微溶于氯方、乙迷和苯,几乎不溶于水。约260℃熔结,约280℃熔融。zui大吸收波长451nm。
〖用途〗:本品仅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗仅供参考)有机灵敏试剂,光度测定银、金、汞、铂、钯
〖保存〗:RT
丹磺酰氯
〖英文名称〗:DNSCl ;1-Dimethylaminonaphthalene-5-sulfonylchloride;Dansyl chloride;5-Dimethylami-naphthalene sulfonyl chloride

ROX 参考染料 II100μL说明书*0 化学感受态细胞    天净沙细胞蛋白质 -RNA 双提取试剂盒 
动物细胞裂解液 A    丝状真菌线粒体 DNAout
动物细胞裂解液 B    天净沙通用型MLPA 试剂盒
蛋白酶抑制剂混合液    LAMP 可见光染料
蛋白磷酸酶抑制剂混合液 1    RNase 抑制剂 ( 猪源 )
一站式 SDS-PAGE 电泳套装    低熔点琼脂糖
口腔拭子 ( 科研简装 )     低熔点琼脂糖
考马斯亮蓝 G-250 染液    Red-Tth DNA 聚合酶
Western 印迹膜抗体清除剂    Red-Pfu DNA 聚合酶
Western 印迹膜抗体清除剂    Red-KOD DNA 聚合酶
Bradford 法蛋白定量试剂盒    MgSO4溶液,10mM,PCR 
Bradford 法蛋白定量试剂盒    石蜡油,PCR 
BCA 法蛋白定量试剂盒    葡萄球菌 RNAout
超敏型 BCA 法蛋白定量试剂盒    分枝杆菌 RNAout
不含甲酰胺)

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