即用型荧光定量 PCR 试剂盒100 次说明书合成建文库用的 1st-strand cDNA:

1. 按下表配制 RT 反应体系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或专一的 RNA 0.5-1 ug
注意：RNA 样品不能含有基因组 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或随机引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板专一性引物 100 pmol 注意：随机引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均长度成反比。 RNase-free 水 补水到 13 uL 2. 70℃保温 5 分钟后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含 dNTP）。
4. 37℃保温 5 分钟。对富含二级结构的高 GC RNA 模板，可以改成 45℃保 温 5 分钟。如果使用随机引物，则改成 25℃ 5 分钟）。
5. 加入 2 uL MMLV 逆转录酶（含 RI），反应终体积为 20uL。
6. 42℃保温 60 分钟（但如果使用随机引物，需要先 25℃保温 10 分钟，然 后再转移到 42℃保温 60 分钟）。此步为 RT 反应。
7. 70℃保温 10 分钟以终止反应，放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二链 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
即用型荧光定量 PCR 试剂盒100 次说明书按下表配制 RT 反应体系:
对照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或随机引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或对照引物 2 uL
RNase-free 水 补水到 13 uL
2. 70℃保温 5 分钟后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含标记 dNTP，本试剂不提供）。
4. 37℃保温 5 分钟。如果使用随机引物，则保温温度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆转录酶（含 RI），反应终体积为 20uL。
6. 42℃保温 60 分钟（但如果使用随机引物，需要先 25℃保温 10 分钟，然后再转移到 42℃保温 60 分钟）。
7. 加 1uL 0.5M EDTA，放置在冰上待用。
8. 电泳检测。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 总量的 50%以上，电泳一般能出现 1.1Kb 的片段（如果使用随机引物，将出现多个小片段）。

产品介绍：

产品及特点:

本试剂盒提供合成 cDNA *链所需要的全部试剂。其原理是用突变的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反转录酶（M-MuLV RT）高效合成 mRNA 的全长 cDNA 拷贝。
1. 使用突变的反转录酶，内源 RNase H 活性低。
2. zui长可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、随机引物和 RNA 专一性引物三种引物（前两种本试剂盒提 供）。
4. 总 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作为模板。
5. 可用于 cDNA 文库构建、RT-PCR、探针标记等。

〖用途〗：本品仅供科研，不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗仅供参考)络合指示剂，测定钙
〖保存〗：RT
铬天青S
〖英文名称〗：Chromeazurol S；Mordant Blue 29；C.I. 43825；Trisodium 5-[(3-carboxylato-5-methyl-4-oxo-2,5-cyclohexadien-1-ylidene)(2,6-dichloro-3-sulphonatophenyl)methyl]-2-hydroxy-3-methylbenzoate
〖其他名称〗：媒染蓝29；5-[(3-羧基-5-甲基-4-氧代-2,5-环己二烯-1-亚基)(2,6-二氯-3-磺基苯基)甲基]-2-羟基-3-甲基苯甲酸三钠盐；媒染兰29；酸性媒介蓝；3〞-磺基-2〞,6〞-二氯-3,3ˊ-二甲基-4-羟基品红酮-5,5ˊ-二羧酸三钠盐
〖CAS号〗：1667-99-8
C23H13Cl2Na3O9S=605.28
〖级别〗：AR
红外光谱鉴定：合格
紫外光谱：合格
λmax：425～435nm(in water)
金属滴定灵敏性试验：合格
〖〖性状〗(以下信息仅供参考)〗：棕色粉末；易溶于水，为棕黄色溶液、溶于醇，溶液呈红棕色
〖用途〗：本品仅供科研，不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗仅供参考)指示剂，用以螯合滴定铝、钙、〖铁〗、〖镍〗和钍。分光光度测定铝、铍、铈、钴、铬、铜、〖铁〗、镓、铪、铟、镧、锰、钼、〖镍〗、钯、铑、钪、钍、钛、钒、钇、〖锌〗、锆等金属离子和氟化物
〖保存〗：RT，保质期5年
汽巴兰3GA
〖英文名称〗：Cibacron Blue 3G-A；1-Amino-4-[[4-[[4-Chloro-6-[(2-Sulfophenyl)Amino]-1,3,5-Triazin-2-Yl]Amino]-3-Sulfo-Phenyl]Amino]-9,10-Dioxo-Anthracene-2-Sulfonic Acid
〖其他名称〗：汽巴蓝3GA；1-氨基-4-[[4-[[4-氯-6-[(2-磺基苯基)氨基]-s-三嗪-2-基]氨基]-3-磺基-苯基]氨基]-9,10-二氧代-蒽-2-磺酸
〖CAS号〗：84166-13-2

TE 缓冲液，PH7.0    脂蛋白纯化试剂盒
TE 缓冲液，PH7.5    植物线粒体总蛋白提取试剂盒
TE 缓冲液，PH8.0    植物叶绿体蛋白提取试剂盒
TE 缓冲液，PH8.5    石蜡包埋组织蛋白提取试剂盒
剥离硅烷    昆虫细胞裂解液
DH5α 化学感受态细胞    细胞核蛋白提取试剂盒
双染细胞凋亡检测试剂盒（Annexin V-FITC·PI）    动物线粒体总蛋白提取剂盒
双染细胞凋亡检测试剂盒（Annexin V-FITC·PI）    高效农杆菌感受态细胞制备试剂盒
一站式*检测 TUNEL 试剂盒 (DAB 法 )    YPD 液体培养基
TRIzol 伴侣    YPG 液体培养基
一站式植物 mRNAout    YPDG 液体培养基
非变性法蛋白沉淀试剂盒    MAL 指示剂培养基
柱式昆虫 DNAout    GAL 指示剂培养基
石蜡包埋组织 RNAout    酵母及产孢培养基
一站式真菌 mRNAout    酵母产孢培养基
超快核酸银染试剂盒    超杂交液 (Oligo 探针 )
e-SDS-PAGE