即用型高保真 PCR 试剂盒1.5mL实验步骤产品介绍：

即用型高保真 PCR 试剂盒1.5mL实验步骤产品及特点:

本试剂盒提供合成 cDNA *链所需要的全部试剂。其原理是用突变的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反转录酶（M-MuLV RT）高效合成 mRNA 的全长 cDNA 拷贝。
1. 使用突变的反转录酶，内源 RNase H 活性低。
2. zui长可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、随机引物和 RNA 专一性引物三种引物（前两种本试剂盒提 供）。
4. 总 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作为模板。
5. 可用于 cDNA 文库构建、RT-PCR、探针标记等。

合成建文库用的 1st-strand cDNA:

1. 按下表配制 RT 反应体系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或专一的 RNA 0.5-1 ug
注意：RNA 样品不能含有基因组 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或随机引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板专一性引物 100 pmol 注意：随机引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均长度成反比。 RNase-free 水 补水到 13 uL 2. 70℃保温 5 分钟后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含 dNTP）。
4. 37℃保温 5 分钟。对富含二级结构的高 GC RNA 模板，可以改成 45℃保 温 5 分钟。如果使用随机引物，则改成 25℃ 5 分钟）。
5. 加入 2 uL MMLV 逆转录酶（含 RI），反应终体积为 20uL。
6. 42℃保温 60 分钟（但如果使用随机引物，需要先 25℃保温 10 分钟，然 后再转移到 42℃保温 60 分钟）。此步为 RT 反应。
7. 70℃保温 10 分钟以终止反应，放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二链 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
按下表配制 RT 反应体系:
对照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或随机引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或对照引物 2 uL
RNase-free 水 补水到 13 uL
2. 70℃保温 5 分钟后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含标记 dNTP，本试剂不提供）。
4. 37℃保温 5 分钟。如果使用随机引物，则保温温度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆转录酶（含 RI），反应终体积为 20uL。
6. 42℃保温 60 分钟（但如果使用随机引物，需要先 25℃保温 10 分钟，然后再转移到 42℃保温 60 分钟）。
7. 加 1uL 0.5M EDTA，放置在冰上待用。
8. 电泳检测。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 总量的 50%以上，电泳一般能出现 1.1Kb 的片段（如果使用随机引物，将出现多个小片段）。

pH变色域：7.2（黄）～8.8（红）；1.8（橙）～2.0（黄）
〖〖性状〗(以下信息仅供参考)〗：褐色或红棕色结晶粉末,溶于水,微溶于乙酸、乙醇。
〖用途〗：本品仅供科研，不得用于其它〖用途〗。
〖保存〗：RT，保质期5年
石蕊
〖英文名称〗：Litmus；Tournesol；Turnsole；Laccamusica
〖其他名称〗：石蕊指示剂
〖CAS号〗：1393-92-6
相对分子质量：～3300
〖级别〗：IND
分光光度试验：合格
PH ：4.5(红)～8.3(蓝)
〖〖性状〗(以下信息仅供参考)〗：蓝色粉末或块状。主要成分为石蕊素(AzoliTmus)和红石蕊精(EryThro-liTmin)的碱金属化合物。部分溶于水和乙醇而呈蓝色。加酸则溶液变红，加过量碱则溶液又变蓝。
〖用途〗：本品仅供科研，不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗仅供参考)酸碱指示剂。制备石蕊试纸。培养基染色

一站式 Western 印迹套装 (HRP 显色法 )    柱式石蜡包埋组织 DNAout
一站式 Western 印迹套装 (AP 显色法 )    痰液采集器
核酸清除剂    百万碱基植物 DNAout 
微量蛋白沉淀试剂盒    Southern 植物 DNAout 
植物总蛋白质微量提取试剂盒 (SDS-PAGE)    木材 DNAout
植物总蛋白质微量提取试剂 (2DE)     百万碱基真菌 DNAout
植物总蛋白质微量提取试剂 (2DE)     Southern 真菌 DNAout
柱式昆虫 RNAout    柱式植物 mtDNAout，测序
HB101 化学感受态细胞    柱式血液 mtDNAout，测序
DNA 上样液 (