DNA 修复混合液 150 次实验步骤
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具体成交价以合同协议为准
2017-01-19 14:21:40
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产品简介

DNA 修复混合液 150 次实验步骤运输及保存 低温运输,-20℃保存,有效期一年。

详细介绍

DNA 修复混合液 150 次实验步骤产品及特点:
本试剂盒提供合成 cDNA *链所需要的全部试剂。其原理是用突变的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反转录酶(M-MuLV RT)高效合成 mRNA 的全长 cDNA 拷贝。
1. 使用突变的反转录酶,内源 RNase H 活性低。
2. zui长可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、随机引物和 RNA 专一性引物三种引物(前两种本试剂盒提 供)。
4. 总 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作为模板。
5. 可用于 cDNA 文库构建、RT-PCR、探针标记等。
DNA 修复混合液 150 次实验步骤产品介绍:
合成建文库用的 1st-strand cDNA:

1. 按下表配制 RT 反应体系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或专一的 RNA 0.5-1 ug
注意:RNA 样品不能含有基因组 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或随机引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板专一性引物 100 pmol 注意:随机引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均长度成反比。 RNase-free 水 补水到 13 uL 2. 70℃保温 5 分钟后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含 dNTP)。
4. 37℃保温 5 分钟。对富含二级结构的高 GC RNA 模板,可以改成 45℃保 温 5 分钟。如果使用随机引物,则改成 25℃ 5 分钟)。
5. 加入 2 uL MMLV 逆转录酶(含 RI),反应终体积为 20uL。
6. 42℃保温 60 分钟(但如果使用随机引物,需要先 25℃保温 10 分钟,然 后再转移到 42℃保温 60 分钟)。此步为 RT 反应。
7. 70℃保温 10 分钟以终止反应,放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二链 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
按下表配制 RT 反应体系:
对照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或随机引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或对照引物 2 uL
RNase-free 水 补水到 13 uL
2. 70℃保温 5 分钟后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含标记 dNTP,本试剂不提供)。
4. 37℃保温 5 分钟。如果使用随机引物,则保温温度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆转录酶(含 RI),反应终体积为 20uL。
6. 42℃保温 60 分钟(但如果使用随机引物,需要先 25℃保温 10 分钟,然后再转移到 42℃保温 60 分钟)。
7. 加 1uL 0.5M EDTA,放置在冰上待用。
8. 电泳检测。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 总量的 50%以上,电泳一般能出现 1.1Kb 的片段(如果使用随机引物,将出现多个小片段)。

〖级别〗:AR
灵敏度实验:合格
zui大吸收波长:555~565nm
〖灼烧残渣〗(以〖硫酸盐〗计):≤0.2%
氢氧溶液溶解试验:合格
〖〖性状〗(以下信息仅供参考)〗:红棕色粉末。溶于稀碱溶液呈红紫色,微溶于沸乙醇、丙同、乙酸和甲苯,均呈黄色,几乎不溶于水。〖熔点〗199~200℃。有刺激性
〖用途〗:本品仅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗仅供参考)镁和钼的测定。吸附指示剂
〖保存〗:RT,避光
4-[(2,4-二羟基苯基)偶氮]苯磺酸钠
〖英文名称〗:Tropaeolin O sodium salt;4-([2,4-Dihydroxyphenyl]azo)benzenesulfonic acid sodium salt;Acid Orange 6;Chrysoin;Resorcinol yellow
〖其他名称〗:*磺;金莲橙O;酸性橙6;金莲橙;*品黄;偶氮*磺酸钠;树脂酚黃O
〖CAS号〗:547-57-9
C12H9N2O5SNa=316.27
〖级别〗:IND
〖含量〗:≥65.0%
红外光谱〖鉴别〗:合格
PH变色域:11.1(黄)~12.7(橙)
水溶解试验:合格
〖〖性状〗(以下信息仅供参考)〗:红褐色至棕色粉末。溶于水呈金黄色,溶于乙醇、丙同和溶纤剂,不溶于其他有机溶剂。水溶液加浓盐酸无变化,加入浓氢氧呈橙棕色。
〖用途〗:本品仅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗仅供参考)生物染色
〖保存〗:RT
耐尔蓝A
〖英文名称〗:Nile Blue A;Basic Blue 12;Nile blue sulfate
〖其他名称〗:5-氨基-9-(二乙基氨基)苯并[α]吩恶嗪-7-翁〖硫酸盐〗;硫酸耐尔蓝;硫酸尼罗蓝;耐尔蓝;耐尔兰A;尼罗蓝A;耐尔兰;尼罗兰A
〖CAS号〗:3625-57-8

牛磺酸    *化的 β- 半乳糖苷酶
甜菜碱    *化蛋白 G
遗传霉素    *化蛋白 A
重蒸酚    *化蛋白 L
琥珀酸 ( 丁二酸 )    *化兔 IgG
马来酸    *化山羊抗亲和素
四甲基乙二胺    Western 封堵液
四甲基乙二胺    酪蛋白溶液 (TBS)
甲叉双丙烯酰胺    酪蛋白溶液 (PBS)
刀豆球蛋白 A Ⅲ    ONPG 干粉
刀豆蛋白 A IV    Tris 缓冲盐溶液 (TBS)
*    氯萘酚溶液,3mg/mL
腐胺    CN/DAB 底物套装 
牛胰岛素    ABTS 溶液,7mM 
羧肽酶 A( 牛胰 )

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