DNA 修复混合液 30 次说明书合成建文库用的 1st-strand cDNA:

1. 按下表配制 RT 反应体系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或专一的 RNA 0.5-1 ug
注意：RNA 样品不能含有基因组 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或随机引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板专一性引物 100 pmol 注意：随机引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均长度成反比。 RNase-free 水 补水到 13 uL 2. 70℃保温 5 分钟后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含 dNTP）。
4. 37℃保温 5 分钟。对富含二级结构的高 GC RNA 模板，可以改成 45℃保 温 5 分钟。如果使用随机引物，则改成 25℃ 5 分钟）。
5. 加入 2 uL MMLV 逆转录酶（含 RI），反应终体积为 20uL。
6. 42℃保温 60 分钟（但如果使用随机引物，需要先 25℃保温 10 分钟，然 后再转移到 42℃保温 60 分钟）。此步为 RT 反应。
7. 70℃保温 10 分钟以终止反应，放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二链 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
DNA 修复混合液 30 次说明书按下表配制 RT 反应体系:
对照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或随机引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或对照引物 2 uL
RNase-free 水 补水到 13 uL
2. 70℃保温 5 分钟后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含标记 dNTP，本试剂不提供）。
4. 37℃保温 5 分钟。如果使用随机引物，则保温温度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆转录酶（含 RI），反应终体积为 20uL。
6. 42℃保温 60 分钟（但如果使用随机引物，需要先 25℃保温 10 分钟，然后再转移到 42℃保温 60 分钟）。
7. 加 1uL 0.5M EDTA，放置在冰上待用。
8. 电泳检测。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 总量的 50%以上，电泳一般能出现 1.1Kb 的片段（如果使用随机引物，将出现多个小片段）。

产品介绍：
产品及特点:

本试剂盒提供合成 cDNA *链所需要的全部试剂。其原理是用突变的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反转录酶（M-MuLV RT）高效合成 mRNA 的全长 cDNA 拷贝。
1. 使用突变的反转录酶，内源 RNase H 活性低。
2. zui长可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、随机引物和 RNA 专一性引物三种引物（前两种本试剂盒提 供）。
4. 总 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作为模板。
5. 可用于 cDNA 文库构建、RT-PCR、探针标记等。

2C20H20N3O·SO4=732.85
〖级别〗：AR
〖含量〗：≥75%
〖熔点〗：≥300℃
〖〖性状〗(以下信息仅供参考)〗：暗褐色或绿色粉末。溶于水
〖用途〗：本品仅供科研，不得用于其它〖用途〗
〖保存〗：RT
尼罗红
〖英文名称〗：Nile Red；9-(Diethylamino)benzo[a]phenoxazin-5(5H)-one；Nile Blue A Oxazone
〖其他名称〗：尼罗丝
〖CAS号〗：7385-67-3
C20H18N2O2=318.37
〖级别〗：BR
纯度：≥95%
Maximum UV absorption(Fluorescence)：530～635nm
Maximum UV absorption(UV)：553nm
〖〖性状〗(以下信息仅供参考)〗：绿色或棕色粉末。溶于甲醇：1mg/ml。〖熔点〗203～205℃
〖用途〗：本品仅供科研，不得用于其它〖用途〗。

葡聚糖凝胶 G-15    pNPP 干粉
衣霉素    DNA 包被溶液
apo- 转铁蛋白    乙烯乙二醇
apo- 转铁蛋白    HRP 稳定剂 / 稀释剂
L- 转铁蛋白    盐酸胍溶液，8M
戊二醛，25% 水溶液    蛋白折叠试剂盒
L- *盐酸盐    考马斯亮蓝 R-250
变色硅胶    考马斯亮蓝 G-250
丙酮酸钠    多核苷酸磷酸化酶
3-( 环己胺 )-1- 丙磺酸    辣根过氧化物酶，偶联
* G 钾盐    一站式平末端克隆试剂盒
*    脉冲电泳 Marker( 酵母染色体 PFG)
5- 溴 -4- 氯 -3- 吲哚葡萄糖苷    脉冲电泳 Marker(Lambda LadderPFG)
溴酚蓝    脉冲电泳 Marker( 低范围 PFG)
溴甲酚紫    动物种属鉴定 PCR Mix 1
鸟苷    动物种属鉴定 PCR Mix 2
三 ( 羟甲基 ) 氨基甲烷盐酸盐    动物种属鉴定 PCR Mix 3
吲哚    动物种属鉴定 PCR Mix 4
6- 苄基氨基嘌呤    动物种属鉴定 PCR Mix 5
对氨基苯磺酸    动物种属鉴定 PCR Mix 6
溴化乙锭 (EB)    昆虫种属鉴定 PCR Mix
亚精胺 ( 精脒 )    无脊椎动物种属鉴定 PCR Mix
碱性磷酸酶标记