PCR Mix 染料10mL说明书合成建文库用的 1st-strand cDNA:

1. 按下表配制 RT 反应体系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或专一的 RNA 0.5-1 ug
注意：RNA 样品不能含有基因组 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或随机引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板专一性引物 100 pmol 注意：随机引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均长度成反比。 RNase-free 水 补水到 13 uL 2. 70℃保温 5 分钟后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含 dNTP）。
4. 37℃保温 5 分钟。对富含二级结构的高 GC RNA 模板，可以改成 45℃保 温 5 分钟。如果使用随机引物，则改成 25℃ 5 分钟）。
5. 加入 2 uL MMLV 逆转录酶（含 RI），反应终体积为 20uL。
6. 42℃保温 60 分钟（但如果使用随机引物，需要先 25℃保温 10 分钟，然 后再转移到 42℃保温 60 分钟）。此步为 RT 反应。
7. 70℃保温 10 分钟以终止反应，放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二链 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
PCR Mix 染料10mL说明书按下表配制 RT 反应体系:
对照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或随机引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或对照引物 2 uL
RNase-free 水 补水到 13 uL
2. 70℃保温 5 分钟后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含标记 dNTP，本试剂不提供）。
4. 37℃保温 5 分钟。如果使用随机引物，则保温温度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆转录酶（含 RI），反应终体积为 20uL。
6. 42℃保温 60 分钟（但如果使用随机引物，需要先 25℃保温 10 分钟，然后再转移到 42℃保温 60 分钟）。
7. 加 1uL 0.5M EDTA，放置在冰上待用。
8. 电泳检测。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 总量的 50%以上，电泳一般能出现 1.1Kb 的片段（如果使用随机引物，将出现多个小片段）。

产品介绍：
产品及特点:

本试剂盒提供合成 cDNA *链所需要的全部试剂。其原理是用突变的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反转录酶（M-MuLV RT）高效合成 mRNA 的全长 cDNA 拷贝。
1. 使用突变的反转录酶，内源 RNase H 活性低。
2. zui长可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、随机引物和 RNA 专一性引物三种引物（前两种本试剂盒提 供）。
4. 总 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作为模板。
5. 可用于 cDNA 文库构建、RT-PCR、探针标记等。

〖保存〗：-20℃
固红B二磺酸萘盐
〖英文名称〗：Fast red B salt 1,5-Naphthalenedisulfonate；Bis(2-methoxy-4-nitrophenyldiazonium) 1,5-Naphthalenedisulfonate
〖其他名称〗：2-甲氧基-4-硝基-苯重氮1,5-萘二磺酸盐；耐晒红B,1,5-萘二磺酸盐
〖CAS号〗：61925-55-1
C24H18N6O12S2=646.56
〖级别〗：BR
纯度：≥97%(HPLC)
〖〖性状〗(以下信息仅供参考)〗：粉末。
〖用途〗：本品仅供科研，不得用于其它〖用途〗
〖保存〗：RT，避光
羟基萘酚蓝
〖英文名称〗：Hydroxynaphthol blue；1-(2-Hydroxy-4-sulfo-1-naphthylazo)-2-naphthol-3,6-disulfonic acid trisodium salt；3-Hydroxy-4-(2-hydroxy-4-sulfo-1-naphthylazo)naphthalene-2,7-disulfonic acid trisodium salt
〖其他名称〗：色酚兰
〖CAS号〗：63451-35-4
C20H11N2Na3O11S3=620.47
〖级别〗：金属滴定指示剂
〖含量〗：≥70%
〖〖性状〗(以下信息仅供参考)〗：深紫色或深蓝色粉末。HNB是钙的金属指示剂，碱土金属离子、稀土金属离子、铀离子的比色试剂。HNB易溶于水和乙醇，HNB的水溶液在pH 7-12时呈蓝色，pH >13时呈红色，在pH 10且有钙离子存在时呈粉红色。碱土金属离子和稀土金属离子的检测范围分别为1-600 ppm和1-300 ppm。复合物的zui大波长是650 nm。HNB也被用于UO2(II)的检测。
〖用途〗：本品仅供科研，不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗仅供参考)金属滴定指示剂，用于碱土金属离子, 稀土金属离子的检测
〖保存〗：RT
羟基萘酚蓝二钠
〖英文名称〗：Hydroxy naphthol blue disodium salt

β-D- 阿糖胞苷    驴抗山羊 IgG，碱性磷酸酶标记
8- 羟基喹啉    山羊抗兔 IgG(H+L)，辣根过氧化物酶标记
细胞松弛素 B    山羊抗兔 IgG(H+L)，辣根过氧化物酶标记
氯化铵 T    山羊抗小鼠 IgG(H+L)，辣根过氧化物酶标记
N ,N- 双 (2- 羟乙基 ) *    山羊抗小鼠 IgG(H+L)，辣根过氧化物酶标记
D- 葡萄糖 -1- 磷酸二钠    山羊抗人 IgG(H+L)，辣根过氧化物酶标记
伊红 Y, 醇溶性    兔抗鸡 IgY，辣根过氧化物酶标记
十二烷基硫酸钠    驴抗山羊 IgG，辣根过氧化物酶标记
乙酸－ 2 －萘脂    山羊抗小鼠 IgG，荧光素 488 标记
硫酸铁    山羊抗小鼠 IgG，荧光素 555 标记
丁酸钠    山羊抗兔 IgG，异硫氰酸荧光素标记
氯化血红素    山羊抗兔 IgG，藻红蛋白标记
N-2- 羟乙基 -N’-3- 丙磺酸    山羊抗兔 IgG，荧光素 488 标记
焦碳酸二乙酯    山羊抗兔 IgG，荧光素 555 标记
二磷酸腺苷二钠    山羊抗小鼠 IgG，异硫氰酸荧光素标记
反玉米素    山羊抗小鼠 IgG，藻红蛋白标记
赤藓红 B 二钠盐    WarmStart Bst DNA 聚合酶
50mg/mL