dNTP 和引物清除剂100 次说明书
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2017-01-19 14:16:13
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产品简介

dNTP 和引物清除剂100 次说明书运输及保存 低温运输,-20℃保存,有效期一年。

详细介绍

dNTP 和引物清除剂100 次说明书产品介绍:
dNTP 和引物清除剂100 次说明书产品及特点:

本试剂盒提供合成 cDNA *链所需要的全部试剂。其原理是用突变的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反转录酶(M-MuLV RT)高效合成 mRNA 的全长 cDNA 拷贝。
1. 使用突变的反转录酶,内源 RNase H 活性低。
2. zui长可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、随机引物和 RNA 专一性引物三种引物(前两种本试剂盒提 供)。
4. 总 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作为模板。
5. 可用于 cDNA 文库构建、RT-PCR、探针标记等。

合成建文库用的 1st-strand cDNA:

1. 按下表配制 RT 反应体系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或专一的 RNA 0.5-1 ug
注意:RNA 样品不能含有基因组 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或随机引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板专一性引物 100 pmol 注意:随机引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均长度成反比。 RNase-free 水 补水到 13 uL 2. 70℃保温 5 分钟后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含 dNTP)。
4. 37℃保温 5 分钟。对富含二级结构的高 GC RNA 模板,可以改成 45℃保 温 5 分钟。如果使用随机引物,则改成 25℃ 5 分钟)。
5. 加入 2 uL MMLV 逆转录酶(含 RI),反应终体积为 20uL。
6. 42℃保温 60 分钟(但如果使用随机引物,需要先 25℃保温 10 分钟,然 后再转移到 42℃保温 60 分钟)。此步为 RT 反应。
7. 70℃保温 10 分钟以终止反应,放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二链 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
按下表配制 RT 反应体系:
对照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或随机引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或对照引物 2 uL
RNase-free 水 补水到 13 uL
2. 70℃保温 5 分钟后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含标记 dNTP,本试剂不提供)。
4. 37℃保温 5 分钟。如果使用随机引物,则保温温度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆转录酶(含 RI),反应终体积为 20uL。
6. 42℃保温 60 分钟(但如果使用随机引物,需要先 25℃保温 10 分钟,然后再转移到 42℃保温 60 分钟)。
7. 加 1uL 0.5M EDTA,放置在冰上待用。
8. 电泳检测。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 总量的 50%以上,电泳一般能出现 1.1Kb 的片段(如果使用随机引物,将出现多个小片段)。

〖其他名称〗:羟基萘酚兰二钠盐;色酚兰二钠盐
〖CAS号〗:165660-27-5
C20H12N2O11S3Na2=598.49
〖级别〗:试剂级
水分:≤1.0%
〖重金属〗:≤10ppm
〖〖性状〗(以下信息仅供参考)〗:深蓝色至蓝紫色结晶或粉末。UV absorption:λmax 650 nm
〖用途〗:本品仅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗仅供参考)金属滴定指示剂,用于测定钙
〖保存〗:RT
碱性木素
〖英文名称〗:Lignin alkali;Lignin kraft
〖其他名称〗:利格宁;木质素;硫酸木素;牛皮木素;石成木素;对氮蒽蓝;引杜林;醋酯蓝;木质素磺酸盐减水剂
〖CAS号〗:8068-05-1
分子量:1000~5000
〖级别〗:BR
PH (1%水溶液):11~12
还原物〖含量〗:≤4%
〖〖性状〗(以下信息仅供参考)〗:棕色粉末,草浆提取,溶于水。

乙烯利    4× 核酸液相杂交液
苄眯盐酸盐    DNA 溶解液
快流速 DEAE- 琼脂糖凝胶    免 RNA 提取 FFPE RT-PCR 试剂盒
伊红 Y 二钠盐,水溶性    ECL 法*杂交检测试剂盒
γ- 环状糊精    DNA Shuffling 试剂盒
D- 棉子糖    核酸稀释液,测 OD
D- 氨基半乳糖盐酸盐    工具酶缓冲液
1,4- 双 (5- 苯基 -2- 噁唑基 ) 苯    EDTA 溶液,0.2M
1,4- 双 (5- 苯基 -2- 噁唑基 ) 苯    Sulfolobus DNA 聚合酶 IV
链脲佐菌素    链激酶
*    ONPG 溶液,10mg/mL
橙黄G钠    探针标记 PCR Mix 
邻联茴香胺    DNA  Acryl 助沉剂
3- 苯甲酰丙酸    彩色 Acryl 助沉剂
*盐酸盐    分子生物学糖原干粉
牛磺酸脱氧胆酸钠    分子生物学糖原溶液,10mg/mL
β- 氨基丙   96 孔板病毒 RNAout( 真空法 )
P- 硝基苯基磷酸*    超敏化学发光 (AP) 检测试剂盒(ECL)
硝苯吡啶    磁珠法 mRNA 提取试剂盒
尿苷 -5'- 二磷酸    96 孔板血液 DNAout( 离心法 )
盐酸*    Deep Vent DNA 聚合酶
    *溶液 ,

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