dCTP 溶液，100mM0.5mL实验步骤产品介绍：
dCTP 溶液，100mM0.5mL实验步骤产品及特点:

本试剂盒提供合成 cDNA *链所需要的全部试剂。其原理是用突变的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反转录酶（M-MuLV RT）高效合成 mRNA 的全长 cDNA 拷贝。
1. 使用突变的反转录酶，内源 RNase H 活性低。
2. zui长可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、随机引物和 RNA 专一性引物三种引物（前两种本试剂盒提 供）。
4. 总 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作为模板。
5. 可用于 cDNA 文库构建、RT-PCR、探针标记等。

合成建文库用的 1st-strand cDNA:

1. 按下表配制 RT 反应体系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或专一的 RNA 0.5-1 ug
注意：RNA 样品不能含有基因组 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或随机引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板专一性引物 100 pmol 注意：随机引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均长度成反比。 RNase-free 水 补水到 13 uL 2. 70℃保温 5 分钟后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含 dNTP）。
4. 37℃保温 5 分钟。对富含二级结构的高 GC RNA 模板，可以改成 45℃保 温 5 分钟。如果使用随机引物，则改成 25℃ 5 分钟）。
5. 加入 2 uL MMLV 逆转录酶（含 RI），反应终体积为 20uL。
6. 42℃保温 60 分钟（但如果使用随机引物，需要先 25℃保温 10 分钟，然 后再转移到 42℃保温 60 分钟）。此步为 RT 反应。
7. 70℃保温 10 分钟以终止反应，放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二链 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
按下表配制 RT 反应体系:
对照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或随机引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或对照引物 2 uL
RNase-free 水 补水到 13 uL
2. 70℃保温 5 分钟后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含标记 dNTP，本试剂不提供）。
4. 37℃保温 5 分钟。如果使用随机引物，则保温温度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆转录酶（含 RI），反应终体积为 20uL。
6. 42℃保温 60 分钟（但如果使用随机引物，需要先 25℃保温 10 分钟，然后再转移到 42℃保温 60 分钟）。
7. 加 1uL 0.5M EDTA，放置在冰上待用。
8. 电泳检测。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 总量的 50%以上，电泳一般能出现 1.1Kb 的片段（如果使用随机引物，将出现多个小片段）。

〖英文名称〗：Thioflavin T；Basic Yellow 1；Thioflavine T
〖其他名称〗：碱性黄1；硫代磺素T；氯化2-[4-(二甲氨基)苯基]-3,6-二甲基苯并噻唑翁；硫代黄色素T；盐基嫩黄；2-[4-(二甲基氨基)苯基]-3,6-二甲基苯并噻唑鎓〖氯化物〗；硫磺素T
〖CAS号〗：2390-54-7
C17H19ClN2S=318.86
〖级别〗：FMP
〖含量〗：≥75%
薄层层析试验：合格
〖〖性状〗(以下信息仅供参考)〗：黄色或黄橙色结晶性粉末。极易溶于热水，水溶液呈黄色，易溶于乙醇，呈黄色带绿色荧光。zui大吸收波长412nm
〖用途〗：本品仅供科研，不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗仅供参考)昆虫组织学染色
〖保存〗：RT
硫磺素S
〖英文名称〗：Thioflavine S；Direct Yellow 7
〖其他名称〗：四羟酮醇S；硫代磺素S；硫代黄色素S；直接黄7
〖CAS号〗：1326-12-1

3- 异丁基 -1- 甲基黄嘌呤    克必隆零背景 T 载体
咪唑    *溶液 ,50mg/mL
n- 辛基 -β-D- 吡喃葡萄糖苷    Klenow 片段 (3´ → 5´ exo-)
苦杏仁苷    牛血清白蛋白封堵液
氯化硝基四氮唑兰    4% 多聚甲醛 (RNA )
噻唑兰    4% 多聚甲醛
2,3,5 氯化三苯基四氮唑    Baker 甲醛钙中性固定液
吩嗪硫酸甲酯    Lillie 甲醛中性固定液
3- 三 ( 羟甲基 ) 甲基 -3- 氨基丙烷磺酸    戊二醛磷酸缓冲固定液
脱氧胆酸钠    戊二醛二甲钠缓冲固定液
多聚甲醛    Zetterqvist 固定液
α- 酮戊二酸钠    乙醇 - 甲醛固定液
四盐酸精胺    多聚甲醛 - 磷酸缓冲固定液
5-  -5’- 脱氧尿苷    多聚甲醛 - 氢氧固定液
潮霉素 B    Maximov 固定液
    供体马血清