dCTP 溶液,2.5mM2mL说明书
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具体成交价以合同协议为准
2017-01-19 14:12:00
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产品简介

dCTP 溶液,2.5mM2mL说明书运输及保存 低温运输,-20℃保存,有效期一年。

详细介绍

dCTP 溶液,2.5mM2mL说明书产品及特点:
本试剂盒提供合成 cDNA *链所需要的全部试剂。其原理是用突变的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反转录酶(M-MuLV RT)高效合成 mRNA 的全长 cDNA 拷贝。
1. 使用突变的反转录酶,内源 RNase H 活性低。
2. zui长可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、随机引物和 RNA 专一性引物三种引物(前两种本试剂盒提 供)。
4. 总 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作为模板。
5. 可用于 cDNA 文库构建、RT-PCR、探针标记等。
dCTP 溶液,2.5mM2mL说明书合成建文库用的 1st-strand cDNA:

1. 按下表配制 RT 反应体系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或专一的 RNA 0.5-1 ug
注意:RNA 样品不能含有基因组 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或随机引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板专一性引物 100 pmol 注意:随机引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均长度成反比。 RNase-free 水 补水到 13 uL 2. 70℃保温 5 分钟后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含 dNTP)。
4. 37℃保温 5 分钟。对富含二级结构的高 GC RNA 模板,可以改成 45℃保 温 5 分钟。如果使用随机引物,则改成 25℃ 5 分钟)。
5. 加入 2 uL MMLV 逆转录酶(含 RI),反应终体积为 20uL。
6. 42℃保温 60 分钟(但如果使用随机引物,需要先 25℃保温 10 分钟,然 后再转移到 42℃保温 60 分钟)。此步为 RT 反应。
7. 70℃保温 10 分钟以终止反应,放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二链 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
按下表配制 RT 反应体系:
对照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或随机引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或对照引物 2 uL
RNase-free 水 补水到 13 uL
2. 70℃保温 5 分钟后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含标记 dNTP,本试剂不提供)。
4. 37℃保温 5 分钟。如果使用随机引物,则保温温度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆转录酶(含 RI),反应终体积为 20uL。
6. 42℃保温 60 分钟(但如果使用随机引物,需要先 25℃保温 10 分钟,然后再转移到 42℃保温 60 分钟)。
7. 加 1uL 0.5M EDTA,放置在冰上待用。
8. 电泳检测。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 总量的 50%以上,电泳一般能出现 1.1Kb 的片段(如果使用随机引物,将出现多个小片段)。

〖级别〗:Practical grade
λmax:360~380nm
〖〖性状〗(以下信息仅供参考)〗:黄色粉末。溶解度:1 mg/ml in water:ethanol (1:1)
〖用途〗:本品仅供科研,不得用于其它〖用途〗
〖保存〗:RT
β-萘酚紫
〖英文名称〗:β-Naphthol Violet
〖其他名称〗:4-[[4-(苯甲酰氨基)-2-甲氧基-5-甲基苯基]偶氮]-3-羟基-N-苯基-2-萘甲酰胺
〖CAS号〗:7143-21-7
C16H9N3Na2O9S2=497.37
〖级别〗:BR
Lambda max:508~511nm(H2O)
Absorbance(E1%1cm):min. 520(5mg/L, H2O, 508~511nm)
Drying loss:≤10.0%
Sensitiveness:Pass

埃文斯蓝    PLP 固定液
对硝基苯 -β-D- 吡喃半乳糖苷    PLPD 固定液
L- *盐酸盐    Methacarn 固定液
腺嘌呤硫酸盐    PFG 固定液
酸性品红    对苯醌固定液
α- 酮戊二酸    ECD-G 固定液
苯甲基磺酰    细胞周期与凋亡检测试剂盒(PI 法)
异硫氰酸荧光素    Zamboni 固定液
亚精胺三盐酸盐    考马斯亮蓝 R-250 染液
6- 羧基二乙酸荧光素    DB3.1 感受态细胞
章鱼碱    SYBR Green II 核酸染料
D- 甘露糖    酸水解酪素
二硫苏糖醇 (DTT)    DMEM( 高糖 )
N- 苯甲酰 -L- *乙酯    DMEM( 低糖 )
5′ - 三磷酸鸟苷三钠

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