猫肾细胞;F81使用说明书
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具体成交价以合同协议为准
2017-02-13 11:22:41
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产品简介

猫肾细胞;F81使用说明书细胞一般2-3天更换一次培养基,这取决于细胞生长的速度。许多细胞培养实验室通常在周一,周三,周五更换培养基。

详细介绍

产品名称猫肾细胞;F81使用说明书
货期3-5天
发货地上海

细胞名称  猫肾细胞;F81使用说明书
形态特性  
生长特性  贴壁生长
特征特性    
培养条件   RPMI 1640 (w/o Hepes)  胎牛血清,10%
传代方法   消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。
传代情况  PN5
冻存条件   *培养基+8%DMSO
支原体检测  阴性
STR  
同工酶  
染色体  
使用权限  A类

复苏操作要点: 
1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。 
2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内*解冻,使细胞能尽快通过zui易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BIU-87(人膀胱癌细胞)避免引起污染。 
3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。 
4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。 
5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。 
6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
操作步骤:
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中,将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片,待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室温孵育爬片20min,使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶,室温孵育15min(一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢),PBS冲洗3次,每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min,PBS冲洗3次,每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育:按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗,滴加在爬片上,于4°C湿盒中孵育一夜,PBS冲洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:选与一抗对应的二抗,按比例稀释后滴加在爬片上,37°C湿盒中孵育30min,PBS冲洗3次,每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干,爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液,显微镜下观察,当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染:用Harris苏木素复染30s~1min,水洗后用1%的盐酸酒精分化,再用蒸馏水(或PBS)水洗返蓝。
10. 封片:将中性树胶滴在爬片一侧,再用盖玻片盖上,先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧,以免产生气泡,封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗
帕拉派克 S    PORAPAK S (100-120 MESH ASTM) FOR GC    70213-65-9
-N,N’-二(2-羟基丙磺酸) (POPSO)    Piperazine-1,4-bis(2-hydroxypropanesulfonic acid) dihydrate    68189-43-5
-N,N’-二(2-乙磺酸)倍半钠盐 (PIPES-1.5Na)    PIPES sesquisodium salt    100037-69-2
滂胺天蓝    CHICAGO SKY BLUE 6B    2610/5/1
庖肉培养基    Cooked Meat Medium B    
培养基Bacillus cereus    NA    
培养基-Campylobacter selective    NA    
培养基Egg yolk emulsion steril    NA    
培养基mendo medium    NA    
培养基Modigied letheen medium    NA    人α2抗纤溶酶(α2-AP)免疫试剂盒    Human α2-Antiplasmin,α2-AP ELISA Kit
人α2巨球蛋白(α2-MG)免疫试剂盒    Human α2 MG ELISA Kit
人α2-HS糖蛋白(AHSG)抗体免疫试剂盒    Human AHSG antibody ELISA Kit
人α1微球蛋白/bikunin前体(AMBP)免疫试剂盒    Human AMBP ELISA Kit
人α1酸性糖蛋白(α1-AGP)免疫试剂盒    Human α1-Acid glycoprotein,α1-AGP ELISA Kit
人α1抗胰*(AACT)免疫试剂盒    Human AACT ELISA Kit
人α1抗*(α1-AT)免疫试剂盒    Human α1-Antitrypsin,α1-AT ELISA Kit
人α1防御素(DEFA1)免疫试剂盒    Human DEFA1 ELISA kit
人α1β糖蛋白(α1β-GP)免疫试剂盒    Human α1β-GP ELISA Kit
人α/β干扰素受体(IFN-α/βR)免疫试剂盒    Human Interferon α/βReceptor,IFN-α/βR ELISA Kit

 

 

 

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