【温馨提示】细胞用途：只可用于科研，不可用于临床诊断和治疗。

细胞名称  家兔皮肤来源细胞培养
形态特性   成纤维细胞样
生长特性  贴壁生长
特征特性   该细胞系来源于一只出生三天的雌性家兔的耳皮肤组织。由中科院昆明细胞库于2014年建立。 
培养条件   DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS
传代方法   1:2传代；3-4天一次
传代情况  P2
冻存条件   基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测  荧光法（-）
STR   -
同工酶  无
染色体  
使用权限  A类

复苏操作要点： 
1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。 
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过zui易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BIU-87(人膀胱癌细胞)避免引起污染。 
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。 
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。 
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。 
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合
操作步骤：
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中，将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片，待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室温孵育爬片20min，使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶，室温孵育15min（一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢），PBS冲洗3次，每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min，PBS冲洗3次，每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育：按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗，滴加在爬片上，于4°C湿盒中孵育一夜，PBS冲洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：选与一抗对应的二抗，按比例稀释后滴加在爬片上，37°C湿盒中孵育30min，PBS冲洗3次，每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干，爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液，显微镜下观察，当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染：用Harris苏木素复染30s~1min，水洗后用1%的盐酸酒精分化，再用蒸馏水（或PBS）水洗返蓝。
10. 封片：将中性树胶滴在爬片一侧，再用盖玻片盖上，先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧，以免产生气泡，封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
顺式六氢邻苯二甲酰亚胺    1,2-Cyclohexanedicarboximide    1444-94-6
顺式乌头酸(-20℃) ≥98％    CIS-ACONITIC ACID    585-84-2
 C    MITOMYCIN C    1950/7/7
司班80    Span 80    1338-43-8
司班20    Span 20    1338-39-2
司班40    Sorbitan monopalmitate    26266-57-9
司班60    Span 60    1338-41-6
司班85    SORBITAN TRIOLEATE    26266-58-0
四(三苯膦)钯 （+4℃）99％    Tetrakis(triphenylphosphine)palladium    14221-01-3
四苯基溴化磷    Tetraphenylphosphonium bromide    2751-90-8
四草酸钾;四乙二酸钾;草酸三氢钾;二草酸三氢钾    PotassiuM tetraoxalate;PotassiuM trihydrogen dioxalate;Oxalic acid heMipotassiuM salt;Sal acetosella;Salt of sorrel    6100-20-5
四碘化铂    PLATINUM(IV) IODIDE    7790-46-7人 Liprin alpha 1 免疫试剂盒    Human Liprin alpha 1 ELISA Kit
人 KIAA1199 免疫试剂盒    Human KIAA1199 ELISA Kit
犬ELISA试剂盒    
犬组织因(TF)免疫试剂盒    Canine Tissue Factor,TF ELISA Kit
犬组胺(HIS)免疫试剂盒    Canine Histamine,HIS ELISA Kit
犬转移生长因β1(TGF-β1)免疫试剂盒    Dog Transforming growth factor β1,TGF-β1 ELISA Kit
犬肿瘤坏死因α(TNF-α )免疫试剂盒    Dog Tumor necrosis factor α,TNF-α ELISA Kit
犬脂多糖/内毒素(LPS)免疫试剂盒    Canine Lipopolysaccharides,LPS ELISA Kit
犬脂蛋白脂酶(LPL)免疫试剂盒    Canine Lipoprotein Lipase,LPL ELISA Kit
犬孕激素/孕酮(PROG)免疫试剂盒    Canine Progesterone,PROG ELISA kit
犬诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)免疫试剂盒    Dog inducible nitric oxide synthase,iNOS ELISA Kit