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产品名称 | 生长特性 | 发货地 | 货期 |
家兔骨髓间充质干细胞;2012083MSC复苏 | 贴壁生长 | 上海 | 3-5天 |
细胞名称 家兔骨髓间充质干细胞;2012083MSC复苏
形态特性 成纤维细胞样
生长特性 贴壁生长
特征特性 该细胞系来源于一雄性家兔的骨髓。2012年由中科院昆明细胞库建立。
培养条件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
传代方法 1:2传代;3-4天一次
传代情况 P2
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 荧光法(-)
STR -
同工酶
染色体
使用权限 B类
来源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等),活力>95%,贴壁性好。我们从试剂、包被器皿、冻存原代细胞、新鲜原代细胞、原代细胞的分子学实验等提供全程服务。我司拥有专业的实验室,可无菌操作并提供相关科研项目解决方案以及实验服务。
细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量*,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量*,使*的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去*,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止*作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
人25羟基*2(25 HVD2)免疫试剂盒 Human 25-hydroxy vitamin D2,25 HVD2 ELISA kit
人20S蛋白酶体(20SP)免疫试剂盒 Human 20S proteasome,20SP ELISA kit
人2,3-二磷酸甘油酸(2,3-DPG)免疫试剂盒 Human 2,3-Disphosphoglycerate,2,3-DPG ELISA Kit
人2,3Dinor血栓烷B2(2,3-dinor-TXB2)免疫试剂盒 Human 2,3-dinor thromboxane B2,2,3-dinor-TXB2 ELISA Kit
人2 型*酸脱氢酶(IMPDH)(IMPDH2)免疫试剂盒 Human IMPDH2 ELISA Kit
人Ⅰ型前胶原羧基端肽(PⅠCP)免疫试剂盒 Human Carboxyterminal propeptide of type Ⅰ procollagen,PⅠCP ELISA Kit
人Ⅰ型前胶原N端前肽(PⅠNP)免疫试剂盒 Human procollagen Ⅰ N-terminal peptide,PⅠNP ELISA Kit
人Ⅰ型前胶原C末端肽(CⅠCP)免疫试剂盒 Human cross-linked C-opeptides of Type Ⅰ collagen,CⅠCP ELISA Kit
人Ⅰ型胶原交联羧基末端肽(CTX-I)免疫试剂盒 Human Cross-linked Carboxy-terminal opeptide of type Ⅰ collagen,CTX-I ELISA Kit
人Ⅰ型胶原N末端肽(NTX)免疫试剂盒 Human cross linked N-opeptide of type Ⅰ collagen,NTX ELISA Kit
人Ⅰ型胶原C端肽(ICTP)免疫试剂盒 Human C-opeptide of type Ⅰ collagen,ICTP ELISA Kit石油醚 90-100℃ NA
曙红Y水溶 Acid Red 87 17372-87-1
曙红钠指示液 NA
曙红亚甲基蓝琼脂培养基(EMB) Eosin-Methlene Blue Agar II
双(3,4-二羟基)-2,3-二甲基丁烷 Nordihydroguaiaretic acid 500-38-9
双(4-硝基苯基)磷酸水合物(+4℃) NA
双(*基硅基)乙炔 Bis(trimethylsilyl)acetylene 14630-40-1
双酚芴 9,9-Bis(4-hydroxyphenyl)fluorene 3236-71-3
双甲酮溶液 NA
2,3-丁二酮;双乙酰;联乙酰基;二甲基乙二酮;二乙二酰 2,3-Butanedione;DiMethyl diketone;2,3-Diketobutane;Biacetyl;DiMethyl glyoxal 431-03-8