【温馨提示】细胞用途：只可用于科研，不可用于临床诊断和治疗。

细胞名称  幼兔肺成纤维样细胞使用说明书
形态特性   成纤维样细胞
生长特性  贴壁生长
特征特性   该细胞系来源于一出生三天的幼兔的正常肺组织。2014年由中科院昆明细胞库建立。 
培养条件   DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS
传代方法   1:2传代；3-4天一次
传代情况  P2
冻存条件   基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测  荧光法（-）
STR   -
同工酶  无
染色体  
使用权限  A类

复苏操作要点： 
1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。 
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过zui易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BIU-87(人膀胱癌细胞)避免引起污染。 
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。 
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。 
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。 
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合
操作步骤：
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中，将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片，待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室温孵育爬片20min，使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶，室温孵育15min（一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢），PBS冲洗3次，每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min，PBS冲洗3次，每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育：按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗，滴加在爬片上，于4°C湿盒中孵育一夜，PBS冲洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：选与一抗对应的二抗，按比例稀释后滴加在爬片上，37°C湿盒中孵育30min，PBS冲洗3次，每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干，爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液，显微镜下观察，当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染：用Harris苏木素复染30s~1min，水洗后用1%的盐酸酒精分化，再用蒸馏水（或PBS）水洗返蓝。
10. 封片：将中性树胶滴在爬片一侧，再用盖玻片盖上，先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧，以免产生气泡，封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
水合三氯化钌    Ruthenium(III) chloride    14898-67-0
水合茚三酮    Ninhydrin hydrate    485-47-2
酪蛋白胨    IRON PEPTONATE    91079-40-2
水解乳蛋白 大豆中提取    CENTA(TM) BETA-LACTAMASE SUBSTRATE    9073-60-3
水杨异羟肟酸    Salicylhydroxamic acid    89-73-6
顺，反-2-辛烯    NA    
顺-2-丁烯-1,4-二醇    2-Butene-1,4-diol    6117-80-2
顺-4-羟基-L-*    cis-4-Hydroxy-L-proline    618-27-9
顺丁烯二酸    Maleic acid    110-16-7人17羟孕酮(17-OHP)免疫试剂盒    Human 17-Hydroxyprogesterone,17-OHP ELISA Kit
人17羟皮质类固醇(17-OHCS)免疫试剂盒    Human 17-Hydroxycorticosteroids,17-OHCS ELISA Kit
人17-α-羟化酶(17-α-OH)免疫试剂盒    Human 17-α-hydroxylase,17-α-OH ELISA Kit
人16α羟基雌酮1(16-α OHE-1)免疫试剂盒    Human 16-αHydroxyestrogen 1,16-α OHE-1 ELISA Kit
人15-羟基前列腺素脱氢酶(15-PGDH)免疫试剂盒    Human 15-PGDH ELISA Kit
人15-epi-氧脂素 A4(15-epi-LXA4)免疫试剂盒    Human 15-epi-Lipoxin A4,15-epi-LXA4 ELISA Kit
人14-3-3 蛋白 beta/alpha(YWHAB)免疫试剂盒    Human YWHAB ELISA kit
人12-脂氧化酶/脂加氧酶(LOX-12)免疫试剂盒    Human 12-lipoxygenase,LOX-12 ELISA Kit
人12羟二十烷四烯酸(12-HETE)免疫试剂盒    Human 12-hydroxyeicosatetraenoic acid,12-HETE ELISA Kit
人11-脱氧*免疫试剂盒    Human 11-Deoxycortisol ELISA Kit
人11去氢血栓烷B2(11-DH-TXB2)免疫试剂盒    Human 11-dehydro-thromboxane B2,11-DH-TXB2 ELISA Kit