【温馨提示】细胞用途：只可用于科研，不可用于临床诊断和治疗。

细胞名称  豹猫肺成纤维样细胞；LCL1使用说明书
形态特性   成纤维细胞样
生长特性  贴壁生长
特征特性   该细胞系来源于一雌性豹猫的肺组织。1985年由*昆明细胞库建立。 
培养条件   DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)   20%NBS
传代方法   1：2传代；3-4天一次
传代情况  P3
冻存条件   基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测  荧光法（-）
STR   -
同工酶  
染色体  
使用权限  B类

复苏操作要点： 
1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。 
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过zui易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BIU-87(人膀胱癌细胞)避免引起污染。 
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。 
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。 
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。 
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合
操作步骤：
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中，将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片，待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室温孵育爬片20min，使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶，室温孵育15min（一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢），PBS冲洗3次，每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min，PBS冲洗3次，每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育：按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗，滴加在爬片上，于4°C湿盒中孵育一夜，PBS冲洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：选与一抗对应的二抗，按比例稀释后滴加在爬片上，37°C湿盒中孵育30min，PBS冲洗3次，每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干，爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液，显微镜下观察，当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染：用Harris苏木素复染30s~1min，水洗后用1%的盐酸酒精分化，再用蒸馏水（或PBS）水洗返蓝。
10. 封片：将中性树胶滴在爬片一侧，再用盖玻片盖上，先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧，以免产生气泡，封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
吗啉    Morpholine    110-91-8
麦康凯肉汤    NA    
麦芽浸出物肉汤    NA    
麦芽膏    MALT EXTRACT    8002-48-0
麦芽汁抽提物    NA    
没食子兰    GALLOCYANINE    1562-85-2
没食子酸正丙酯    Propyl gallate    121-79-9
碱性品红;盐基品红;碱性新品红;玫瑰苯胺盐酸盐    Fuchsin basic;Magenta;Basic Magenta;Basic rubin;Basic violet 14;C.I. 42510    632-99-5
玫瑰红钠（虎红）琼脂培养基    NA    
玫瑰红三羧酸铵    Aluminon    569-58-4
玫瑰桃红 R    BORDEAUX RED    5858-33-3人γ*-半*合成酶(γ-GCS)免疫试剂盒    Human γ glutamylcysteine synthetase,γ-GCS ELISA Kit
人γ干扰素诱导蛋白16/p16(IFI16/p16)免疫试剂盒    Human IFI16 ELISA Kit
人γ干扰素诱导单核细胞因(MIG/CXCL9)免疫试剂盒    Human monocyte interferon gamma inducing factor,MIG ELISA Kit
人γ干扰素受体(IFN-γR)免疫试剂盒    Human Interferon γ Receptor,IFN-γR ELISA Kit
人γ干扰素(IFN-γ)抗体免疫试剂盒    Human IFN-γ antibody ELISA kit
人γ干扰素(IFN-γ)免疫试剂盒    Human IFN-γ ELISA Kit
人γ分泌素激活蛋白(PION)免疫试剂盒    Human PION ELISA Kit
人γ分泌酶免疫试剂盒    Human γ-Secretase ELISA kit
人γ氨基丁酸(GABA)免疫试剂盒    Human Gamma-aminobutyric acid,GABA ELISA Kit
人β-转导素重复序列包含蛋白(BTRC)免疫试剂盒    Human BTRC ELISA Kit
人β抑制蛋白2(ARRB2)免疫试剂盒    human ARRB2 ELISA Kit