【温馨提示】细胞用途：只可用于科研，不可用于临床诊断和治疗。

细胞名称  杂交瘤细胞株；H3N2-CIV-HA-2C5使用说明书
形态特性   淋巴母细胞样
生长特性  悬浮生长
特征特性   该细胞属保藏，其特征特性尚未公开。 
培养条件   MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS
传代方法   1:3传代，3-4天传1次
传代情况  C5
冻存条件   基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测  阴性
STR  
同工酶  
染色体  
使用权限  未定

复苏操作要点： 
1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。 
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过zui易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BIU-87(人膀胱癌细胞)避免引起污染。 
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。 
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。 
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。 
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合
操作步骤：
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中，将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片，待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室温孵育爬片20min，使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶，室温孵育15min（一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢），PBS冲洗3次，每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min，PBS冲洗3次，每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育：按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗，滴加在爬片上，于4°C湿盒中孵育一夜，PBS冲洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：选与一抗对应的二抗，按比例稀释后滴加在爬片上，37°C湿盒中孵育30min，PBS冲洗3次，每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干，爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液，显微镜下观察，当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染：用Harris苏木素复染30s~1min，水洗后用1%的盐酸酒精分化，再用蒸馏水（或PBS）水洗返蓝。
10. 封片：将中性树胶滴在爬片一侧，再用盖玻片盖上，先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧，以免产生气泡，封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
1-Bromohexadecane    十六烷基溴    500克    AR，47.8%
1-Bromoheptane    1-溴庚烷    25克    超纯，99.995%
1-Bromodecane    癸基溴    1克    BR
1-Amino-2-naphthol-4-sulfonic acid    4-氨基-3-羟基-1-萘磺酸    5克    2.5N，0.15mm×100mm
18-Crown-6    1,4,7,10,13,16-六氧环十八烷    5克    CP，98%
14.4-116kDa Protein Molecular weight Mark    14.4-116kDa分子量MARK    100克    生物技术级,150u/mg
12-Aminolauric acid    12-氨基十二烷酸    25克    AR，99%
11-Aminoundecanoic acid    ω-氨基十一烷酸    50毫克    AR，99%
10% Iron chelate    氨基酸螯合铁    5克    高纯牛*(VD)ELISA Kit    ，英文名：    Bovine Vitamin D,VD ELISA Kit    ，规格：    48T/96T
绵羊铜蓝蛋白(CP)ELISA Kit    ，英文名：    Sheep Ceruloplasmin,CP ELISA Kit    ，规格：    48T/96T
绵羊甜菜碱-同型半*S-甲基转移酶1(BHMT)ELISA Kit    ，英文名：    Sheep Betaine--homocysteine S-methyltransferase 1,BHMT ELISA kit    ，规格：    48T/96T
绵羊髓过氧化物酶(MPO)ELISA Kit    ，英文名：    Sheep myeloperoxidase,MPO ELISA kit    ，规格：    48T/96T
绵羊双氢睾酮(DHT)ELISA Kit    ，英文名：    Sheep Dihydrotestosterone,DHT ELISA Kit    ，规格：    48T/96T
绵羊生长激素(GH)ELISA Kit    ，英文名：    Sheep Somatotropin,GH ELISA kit    ，规格：    48T/96T
绵羊三碘甲状腺原氨酸(T3)ELISA Kit    ，英文名：    Sheep tri-iodothyronine(T3)ELISA kit    ，规格：    48T/96T
绵羊粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)ELISA Kit    ，英文名：    Sheep Granulocyte-Macrophage Colony Stimulating Factor,GM-CSF ELISA Kit    ，规格：    48T/96T
绵羊口蹄疫(FMDV)抗体(IgM)ELISA Kit    ，英文名：    Sheep antibody against Foot and Mouth Disease(FMDV)IgM ELISA Kit    ，规格：    48T/96T
绵羊抗弓形虫抗体(IgM)ELISA Kit    ，英文名：    Sheep anti-toxoplasmosis antibody IgM ELISA kit    ，规格：    48T/96T
绵羊抗弓形虫抗体(IgG)ELISA Kit    ，英文名：    Sheep anti-toxoplasmosis antibody IgG ELISA kit    ，规格：    48T/96T