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上海市所在地
【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗。
产品名称 | 人burkitt淋巴瘤细胞;CA46使用说明书 |
货期 | 3-5天 |
发货地 | 上海 |
细胞名称 人burkitt淋巴瘤细胞;CA46使用说明书
形态特性 淋巴母细胞样
生长特性 悬浮生长
特征特性 该细胞源自Burkitt's淋巴瘤患者的B淋巴细胞,EBNA、Fc阴性。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 20%FBS
传代方法 细胞密度在 2~3×105 cells/ml,饱和密度为2×106,每周换液2~3次
传代情况 C2
冻存条件 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法(-)
STR Amelogenin:X;CSF1PO:10,12;D13S317:8,12;D16S539:11,12;D18S51:13,16;D19S433:15.2;D21S11:28,29;D2S1338:20,22;D3S1358:16,18;D5S818:13;D7S820:11,12;D8S1179:15;FGA:19,23;TH01:7,9;TPOX:8,9;vWA:15,16;
同工酶
染色体 46, XO, XY
使用权限 A类
复苏操作要点:
1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。
2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内*解冻,使细胞能尽快通过zui易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BIU-87(人膀胱癌细胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。
4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。
5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。
6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
操作步骤:
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中,将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片,待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室温孵育爬片20min,使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶,室温孵育15min(一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢),PBS冲洗3次,每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min,PBS冲洗3次,每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育:按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗,滴加在爬片上,于4°C湿盒中孵育一夜,PBS冲洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:选与一抗对应的二抗,按比例稀释后滴加在爬片上,37°C湿盒中孵育30min,PBS冲洗3次,每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干,爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液,显微镜下观察,当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染:用Harris苏木素复染30s~1min,水洗后用1%的盐酸酒精分化,再用蒸馏水(或PBS)水洗返蓝。
10. 封片:将中性树胶滴在爬片一侧,再用盖玻片盖上,先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧,以免产生气泡,封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
5-氟靛红 CAS号: 443-69-6 进口、国产
2-氯-6-氟甲苯 CAS号: 443-83-4 现货供应
2,6-二甲基氟苯 CAS号: 443-88-9 说明书
2-氟-6-甲基苯胺 CAS号: 443-89-0 报价
2,3-二氢-1,4-苯并二烷-6-羧酸 CAS号: 4442-54-0 进口、国产
5-溴-2-氯三氟甲苯 CAS号: 445-01-2 现货供应
2-氨基-5-氯三氟甲苯 CAS号: 445-03-4 说明书
邻氟苯甲酸 CAS号: 445-29-4 报价
(甲硫基)乙酸乙酯 CAS号: 4455-13-4 进口、国产
1,3-[2H,4H]-异喹啉二酮 CAS号: 4456-77-3 现货供应
4-氟-2-硝基苯甲醚 CAS号: 445-83-0 说明书
2,4,5-*氧基苯甲醛 CAS号: 4460-86-0 报价
4-氟-3-硝基甲苯 CAS号: 446-11-7 进口、国产人结缔组织生长因子(CTGF)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人结缔组织活化肽Ⅲ(CTAPⅢ)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人结蛋白(Des)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人结肠癌抗原(CCA)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人窖蛋白Caveolin1(Cav-1)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人角化细胞生长因子(KGF)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人角化细胞内分泌因子(KAF)/双调蛋白(AR)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人胶质纤维酸性蛋白(GFAP)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人胶质细胞系来源的神经营养因子(GDNF)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人胶原凝集素(Collectin)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人胶原酶II(Collagenase II)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人胶原酶I(Collagenase I)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人胶原蛋白Ⅱ(HCBⅡ)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人胶原吡啶交联(PYD)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装