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产品属性:
产品名称：嗜肺军团菌快速检测试剂盒48T 货号：FS-02R6336 规格：48T 分类：恒温荧光法 储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。 运输：低温、避光，快递免费送货上门。 |
试剂配制:
1、酶标板：一块（96孔） 2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。 3、 样品稀释液：1×20ml。 4、 检测稀释液A：1×10ml。 5、 检测稀释液B：1×10ml。 |
实验过程：
一、试剂准备 1. DNA模板 2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物） 3．10×PCR Buffer 4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5．Taq酶 | 二、操作步骤 1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1（10pM） 2μl 引物2（10PM） 2μl Taq酶（2U/μl） 1μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。 2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。 3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。 4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。 |
特点优势：
1. 特异性：所有产品使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
2. 重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
3. 灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
4. 实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种呼吸道及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
5. 优势1：序列资源丰富，除公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。
6. 优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。
FMOC-甘氨 99%p, p’-DDD标准溶液100μg/ml,u=2%,溶剂:石油大鼠Bcl-2样蛋白1(Bcl2-L-1/Bcl-X)免疫试剂盒
(s)-N-FMOC基氨 98.5%p, p’-DDD标准溶液10μg/ml,u=7%,溶剂:石油大鼠ATP1B4蛋白(ATP1B4)免疫试剂盒
2-(N-Fmoc)-氨基-1,3-丁二 98.5%o，p’-DDT标准溶液 100μg/ml,u=2%大鼠Apelin(APLN)免疫试剂盒
Fmoc-缬氨 98.5%o，p’-DDT标准溶液 10μg/ml,u=4%大鼠apelin 13(AP13)免疫试剂盒
Fmoc-D-丝氨 BR2.4-D丁酯 分析标准品，99%大鼠apelin 12(AP12)免疫试剂盒
芴甲氧羰酰基-6-氨基己 98%2.4-D丁酯标准溶液 100μg/ml,u=3%大鼠Agouti相关蛋白(AGRP)免疫试剂盒
FMOC-哌啶-4-甲 97%2.5-D丁酯标准溶液10μg/ml,u=6%,溶剂:正己烷大鼠ADM2(ADM2)免疫试剂盒
N'-芴甲氧羰基-N-苄氧羰基-L-赖氨 98.0%2,4-滴异辛酯 分析标准品大鼠8异前列腺F2α(8-iso-PGF2a)免疫试剂盒
N-alpha-芴甲氧羰基-N-in-叔丁氧羰基-D-色氨 97%顺式戊菊酯 分析标准品，99%大鼠8异前列腺(8-iso-PG)免疫试剂盒
FLAG® Peptide菊酯 分析标准品，99.5%大鼠8-异构前列腺F2α(8-epi-PGF2α)免疫试剂盒
纤维蛋白肽 B 人类 ≥97% (HPLC)基阿维菌甲盐 分析标准品，90.5%大鼠8羟基脱氧鸟(8-OHdG)免疫试剂盒
甘氨-L-亮氨 98%乙蒜 分析标准品，99%大鼠Ⅵ型胶原(Col Ⅵ)免疫试剂盒
D-谷氨 98%磺隆 分析标准品，95%大鼠6酮前列腺F1a(6-keto-PGF1a)免疫试剂盒
L-谷氨-5-叔丁酯-1-甲酯盐盐 95%线磷 分析标准品，96%大鼠6酮前列腺(6-K-PG)免疫试剂盒
甘氨苄酯盐盐 98%标准溶液100μg/ml,u=3%,溶剂:酮大鼠Ⅴ型胶原(Col Ⅴ)免疫试剂盒
嗜肺军团菌快速检测试剂盒48T抗生检定培养基4号 用于两性霉B等的效价测定2--6-三甲基苄胰羧肽A6抗体
P LET 琼脂基础用于炭疽杆菌的分离鉴别2--6-三甲基苄9号染色体开放阅读框150抗体
多聚右旋赖氨2--6-(三甲基)溴苄钙粘附蛋白9抗体
CBZ-D-脯氨2--6-(三甲基)溴苄钙粘蛋白15抗体
DL-高半胱氨硫内酯盐盐乙二四乙二酐分子伴侣复合体TCP-1β抗体
辽东楤木皂X 3-O-{[β-D-glucopyranosyl（1→2）]-[ β-D-gluc乙二四乙二酐分裂周期蛋白25C抗体
钠二亚乙基三五乙二酐(DTPA)过敏C4/补体C4抗体
羧甲基纤维CM-521,2-双（二甲基瞵）乙烷脂肪结合蛋白3抗体
使用方法:
一、稀释标准曲线样品（以 10E2-10E7 拷贝/μL 这 6 个 10 倍稀释度为例）。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。
1. 标记 6 个离心管，分别为 7，6，5，4，3，2。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 模板稀释液，*用带芯枪头，下同）。
3. 在 7 号管中加入 5 μL 阳性对照（浓度为 1×10E8 拷贝/μL，试剂盒提供)，充分震荡 1 分钟，得 1×10E7 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
4. 换枪头，在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 1×10E6 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
5. 换枪头，在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 1×10E5 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
6. 重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。
二、样品 DNA 的制备
7. 用自选方法纯化样品的 DNA，本产品跟市场上绝大多数核酸纯化产品兼容。
8. 如果有 N 个样品，则需要进行 N+2 个样品提取，多出的一个用作样品制备阳性对照管、另一个用作样品制备阴性对照管。
三、设置 qPCR 反应（20μL 体系，在样品制备室进行）
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重复，则标记 N+9 个 PCR 管，其中 N+2 个用于上步得到的 N+2 个样品，1 个用于 PCR 阴性对照（用水做模板），6 个用于标准曲线。如果做定性分析，并且只做 1 次重复，则标记 N+4 个 PCR 管，其中 N+2 个用于上步得到的 N+2 个样品，1 个用于 PCR 阴性对照（用水做模板），1 个用于PCR 阳性对照。
