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上海市所在地
细胞名称 豚鼠肺细胞;GP-F1
形态特性 成纤维细胞样
生长特性 贴壁生长
特征特性 该细胞系来源于一雄性豚鼠的肺组织。1989年由中国科学院昆明细胞库建立。
培养条件 M-199: with Earle's Balanced Salts Solution (EBSS) 15%NBS
传代方法 1:2传代;3-4天一次
传代情况 P2
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 荧光法(-)
STR -
同工酶
染色体
产品图片:
细胞培养的优点:
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
匹克氏肉汤基础 规格: 100g 作用: 用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28-2003 中4.62,GB/T4789.11-2003)。 英文名称: CD36
肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养(GB标准) 英文名称: KLK11
葡萄糖肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28-2003 中4.1 GB/T4789.11-2... 英文名称: CD97
哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用: 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验,还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称: NTRK3
血琼脂培养基基础 规格: 250g 作用: 加入脱纤维羊血或兔血,制成血琼脂培养基,用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10-... 英文名称: HA
胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格: 250g 作用: 可广泛应用于细菌的培养,特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称: HA
Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格: 2x5支 作用: 试剂A和试剂B各一支添加于225ml(026080)中配成FB1增菌液。 英文名称: SPARCL1
PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于100ml(026070)中配成PALCAM琼脂。 英文名称: IL1RL1
李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于200ml(026040)中配成LB2增菌液。 英文名称: IL13RA1
李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026040)中配成LB1增菌液。 英文名称: PECAM1
EB增菌液冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026010)中配成EB增菌液。 英文名称: TNF
10x1 ml
9041-8-1 肝素钠标准品(分析实验用) 9.5mg
9041-8-1 肝素钠标准品(定性用) 50mg
肝素钠标准品(系统适应用) 50mg
142-82-5 庚烷标准品 Heptane 1.2ml×3ampules
70-30-4 六氯酚标准品 Hexachlorophene 500mg
506-52-5 二十六碳醇标准品 Hexacosanol 100mg
82240-09-3 2E, 4E-己二烯酸异丁酰胺标准品 25mg
56-29-1 海索比妥标准品 Hexobarbital CIII 500mg
532-76-3 盐酸海克卡因标准品 Hexylcaine Hydrochloride 1g
107-41-5 己烯乙二醇标准品 Hexylene Glycol 125mg
136-77-6 己基间苯二酚标准品 Hexylresorcinol 200mg
71-00-1 L-组氨酸标准品 L-Histidine 200mg
56-92-8 组胺二盐标准品 Histamine Dihydrochloride 250mg
51-56-9 氢后马托品标准品 Homatropine Hydrobromide 200mg
80-49-9 甲溴后马托品标准品 Homatropine Methylbromide 250mg
9003-07-0 均聚物聚丙烯标准品 Homopolymer Polypropylene 3 strips
118-56-9 原膜散酯标准品 Homosalate 500mg
304-20-1 盐酸肼屈嗪标准品 Hydralazine Hydrochloride 200mg
118-08-1 白毛莨碱标准品 Hydrastine 10mg
58-93-5 双氢氯噻嗪标准品 Hydrochlorothiazide 200mg
135-09-1 氢氟甲噻标准品 Hydroflumethiazide 200mg
71-68-1 盐酸氢吗啡酮标准品 50mg
123-31-9 氢醌标准品 Hydroquinone 500mg
306-21-8 氢羟苯标准品 200mg
标记兔抗人、大、小鼠转录调节因子C/EBP β抗体IgG
Anti-PBK/TOPK/FITC 荧光素标记PDZ连接激酶/T-LAK细胞源蛋白激酶抗体IgG
Anti-Phospho-PBK/TOPK (Thr9) /FITC 荧光素标记磷酸化PDZ连接激酶/T-LAK细胞源蛋白激酶抗体IgG
Anti-Cecropin/FITC 荧光素标记抗菌肽/天蚕素抗体IgG
Anti-CENPA /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠着丝粒蛋白A抗体IgG
Anti-Phospho-CENP-A (Ser7)/FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠磷酸化着丝粒蛋白A抗体IgG
Anti-Phospho-HER3(Tyr1197) /FITC 荧光素标记磷酸化HER3受体抗体IgG
Anti-Phospho-HER3 (Tyr1222) /FITC 荧光素标记磷酸化HER3受体抗体IgG
Anti-Phospho-HER4 (Tyr1284) /FITC 荧光素标记磷酸化HER4抗体IgG
Anti-C-erbB-4/HER4/erbB-4 /FITC 荧光素标记c-erbB-4癌基因抗体IgG
Anti-Phospho-HER4 (Tyr984) /FITC 荧光素标记磷酸化HER4抗体IgG
Anti-c-fos/FITC 荧光素标记即刻早期基因(原癌基因)抗体IgG
Anti-Phospho-c-Fos (Ser32) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠磷酸化c-fos抗体IgG
Anti-Phospho-c-Fos (Thr232) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠磷酸化c-fos抗体IgG
Anti-Phospho-c-Fos (Thr325) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠磷酸化c-fos抗体IgG
Anti-CFTR/FITC 荧光素标记囊性纤维化跨膜转运调节因子抗体IgG
Anti-CGA/FITC 荧光素标记嗜铬粒素A抗体IgG
Anti-CG6856/CG6856-PA/FITC 荧光素标记兔抗果蝇CG6856-PA抗体IgG
豚鼠肺细胞;GP-F1Anti-CGB/FITC 荧光素标记嗜铬粒素B抗体IgG
Anti-CGP-39/YKL-40/FITC 荧光素标记软骨糖蛋白39抗体IgG
Anti-CGRP/FITC 荧光素标记降钙素基因相关肽抗体IgG
Anti-ChAT/FITC 荧光素标记ChAT抗体IgG
操作方法:
1. 从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打),冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富,可提高转化效率)。
4. 37℃,225 rpm复苏60分钟或30℃,225 rpm复苏90分钟。
(当质粒中含有不稳定片段时,30℃培养可降低错误重组的概率,若转化control pUC19计算转化效率,则需37℃,225 rpm复苏60分钟)
5. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。