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细胞名称 小鼠杂交瘤细胞;51.1
形态特性 淋巴母细胞样
生长特性 悬浮生长
特征特性 可产生单克隆抗体,抗原为小鼠CD25。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10% FBS
传代方法 1:2。3天内可长满。
传代情况 PN
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR
同工酶
染色体
产品图片:
细胞培养的优点:
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
匹克氏肉汤基础 规格: 100g 作用: 用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28-2003 中4.62,GB/T4789.11-2003)。 英文名称: CD36
肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养(GB标准) 英文名称: KLK11
葡萄糖肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28-2003 中4.1 GB/T4789.11-2... 英文名称: CD97
哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用: 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验,还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称: NTRK3
血琼脂培养基基础 规格: 250g 作用: 加入脱纤维羊血或兔血,制成血琼脂培养基,用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10-... 英文名称: HA
胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格: 250g 作用: 可广泛应用于细菌的培养,特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称: HA
Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格: 2x5支 作用: 试剂A和试剂B各一支添加于225ml(026080)中配成FB1增菌液。 英文名称: SPARCL1
PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于100ml(026070)中配成PALCAM琼脂。 英文名称: IL1RL1
李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于200ml(026040)中配成LB2增菌液。 英文名称: IL13RA1
李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026040)中配成LB1增菌液。 英文名称: PECAM1
EB增菌液冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026010)中配成EB增菌液。 英文名称: TNF
光 100795-200401
100mg 氟伐他汀钠 含量测定 常温,避光 100800-200701
100mg 丙硫氧嘧啶 检查用 常温,避光 100803-201002
300mg 丙泊酚 UV法鉴别 2-8℃,避光 100806-200801
100mg 盐酸赛利洛尔 UV法含量测定 常温,避光 100807-200501
100mg 阿卡波糖 含量测定 常温,避光 100808-200902
100mg 盐酸米安色林 含量测定 常温,避光 100812-200501
50mg 维库溴铵 含量测定 常温,避光 100813-200501
100mg 赖诺普利 含量测定 常温,避光 100814-200701
100mg 富马酸喹硫平 含量测定 常温,避光 100815-200501
50mg 氨磷汀 含量测定 -20℃,避光 100816-200701
100mg 曲昔匹特 含量测定 常温,避光 100817-200501
100mg 盐酸萘替芬 含量测定 常温,避光 100823-200501
100mg 碳酸钙 检查 常温,避光 100824-200601
100mg 甲磺酸氨氯地平 含量测定 常温,避光 100825-200501
100mg 伏格列波糖 含量测定 常温,避光 100826-200801
100mg 琥珀酸甲泼尼龙 含量测定 常温,避光 100827-200501
100mg 甲泼尼龙 含量测定 常温,避光 100828-200501
100mg 萘磺酸右丙氧芬 含量测定 常温,避光 100829-200501
100mg 六甲蜜胺 检查 常温,避光 100831-200601
100mg 甲氧氯普胺 含量测定 常温,避光 100832-200601
100mg 阿魏酸 含量测定 常温,避光 100834-200701
50mg 缬沙坦对映异构体 供检查用 常温,避光 100836-201001
100mg 奥美格雷钠 含量测定 常温,避光 100837-200701
AP1A/Mtap1a(microtubu
Ubiquitin 泛素蛋白抗原
VASH1(Vasohibin 1) 兔抗
B7-H4 B7-H4(抗原)
BADH2 (Betaine-aldehyde dehydrogenase ) BADH2抗原
BGP(Bone Gla-protein) 骨钙素(抗原)
BK channel (stretch-activated Kca channel) BK通道蛋白(抗原)
BKCa channels(calcium-activated potassium channel) 钙激活钾通道蛋白
BTG2/TIS21(B-cell translocation gene 2) BTG2(抗原)
C-fos(i mmediate early gene, ieg) 即刻早期基因(是一种原癌基因)抗原
C-jun/AP-1 (Oncoprotein C-jun:active protein 1) 原癌基因蛋白(活化蛋白1)(抗原)
cyclin D1 周期素D1(抗原)
Beta-casein( Beta-casein) β-酪蛋白(抗原)
CCK8 (Cholecystokinin-8) 胆囊收缩素/缩胆囊素(八肽)
CD3 epsilon peptide CD3 epsilon(抗原)
CD4 CD4(抗原)
CD4(Rabbit Anti-Human Mouse rat CD4 Palyclonal Anti-body) CD4抗原
CD8 CD8抗原
CD20(抗原) CD20(抗原)
CD25/IL-2RA(Imterleukm-2 Receptor alpha) CD25/白介素2-受体(抗原)
CD31(PECAM-1) 血小板内皮细胞黏附分子-1(抗原)
小鼠杂交瘤细胞;51.1CD34 CD34(多肽抗原)
CD56/NCAM1 (Neural Cell Adhesion Molecule 1) 神经细胞粘附分子1(抗原)
CEAcam8/CD67 (carcinoembryonic Anti-gen-related cell adhesion molecule 8) 癌胚抗原相关细胞粘附分子8(抗原)
CD68 CD68抗原
操作方法:
1. 从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打),冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富,可提高转化效率)。
4. 37℃,225 rpm复苏60分钟或30℃,225 rpm复苏90分钟。
(当质粒中含有不稳定片段时,30℃培养可降低错误重组的概率,若转化control pUC19计算转化效率,则需37℃,225 rpm复苏60分钟)
5. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。