品牌
生产厂家厂商性质
上海市所在地
细胞名称 小鼠杂交瘤细胞;5HA10E5G8E1D10
形态特性 淋巴母细胞样
生长特性 悬浮生长
特征特性 可产生单克隆抗体,抗人肝癌。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10% FBS
传代方法 1:2。3天内可长满。
传代情况 PN
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR
同工酶
染色体
产品图片:
细胞培养的优点:
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
匹克氏肉汤基础 规格: 100g 作用: 用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28-2003 中4.62,GB/T4789.11-2003)。 英文名称: CD36
肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养(GB标准) 英文名称: KLK11
葡萄糖肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28-2003 中4.1 GB/T4789.11-2... 英文名称: CD97
哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用: 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验,还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称: NTRK3
血琼脂培养基基础 规格: 250g 作用: 加入脱纤维羊血或兔血,制成血琼脂培养基,用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10-... 英文名称: HA
胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格: 250g 作用: 可广泛应用于细菌的培养,特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称: HA
Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格: 2x5支 作用: 试剂A和试剂B各一支添加于225ml(026080)中配成FB1增菌液。 英文名称: SPARCL1
PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于100ml(026070)中配成PALCAM琼脂。 英文名称: IL1RL1
李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于200ml(026040)中配成LB2增菌液。 英文名称: IL13RA1
李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026040)中配成LB1增菌液。 英文名称: PECAM1
EB增菌液冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026010)中配成EB增菌液。 英文名称: TNF
864-200601
100mg 盐酸齐拉西酮 含量测定 常温,避光 100865-200601
100mg 盐酸罗哌卡因 HPLC法含量测定 常温,避光 100866-200701
20mg 右旋盐酸罗哌卡因 检查用 常温,避光 100867-200701
100mg 佐匹克隆 含量测定 常温,避光 100870-200801
100mg 右佐匹克隆 HPLC鉴别,UV含量测定 常温,避光 100871-200801
50mg 左佐匹克隆 检查用 常温,避光 100872-200801
100mg 恩曲他滨 HPLC法含量测定 常温,避光 100873-200901
100mg 左旋奥硝唑 含量测定 常温,避光 100874-200501
100mg 磷酸肌酸钠 HPLC法含量测定 常温,避光 100875-200901
100mg 肌酐 检查用 常温,避光 100877-200901
100mg 异甘草酸镁 含量测定 常温,避光 100879-200801
100mg 双氯芬酸钾 含量测定 常温,避光 100880-200601
50mg 5-{4-[2-(5-乙基-2-吡啶基)乙氧基]苯基亚甲基}-2,4-噻唑二酮 检查用 常温,避光 100881-200601
50mg 盐酸吡格列酮杂质A 检查用 常温,避光 100881-200601
100mg 酒石酸罗格列酮 HPLC法含量测定 常温,避光 100883-200601
100mg 草酸艾司西酞普兰 含量测定 常温,避光 100885-200601
100mg 依西美坦 含量测定 常温,避光 100886-200601
20mg 依西美坦中间体 检查 常温,避光 100887-200601
100mg 盐酸曲美他嗪 含量测定 常温,避光 100889-200901
100mg 孟鲁司特钠 含量测定 常温,避光 100893-200601
30mg S-孟鲁司特钠 检查用 常温,避光 100894-200701
100mg 盐酸氨酮戊酸 含量测定 常温,避光 100895-200601
100mg 盐酸哌罗匹隆 含量测定 常温,避光 100896-200601
100mg 培美曲塞二钠 含量测定 常温,避光 100897-
CYP450(Cytochrome P450 monooxygenase) 细胞色素P450单氧化酶(多肽抗原)
CXorf36(uncharacterized protein Cxorf36 precursor) 脱羧酶蛋白体36 cxorf36抗原
Deltex-1 (DTX1) (Deltex protein 1)抗原
DISC1(disrupted in schizophrenia1)(NT) DISC1 N端抗原
DISC1(disrupted in schizophrenia1)(CT) DISC1 C端抗原
DR3/TRAMP (death receptor-3) DR3 死亡受体(抗原)
E7 protein/HPV 16 (Human papillomavirus type 16) 人瘤病毒16型E7蛋白抗原
EGF-R (Epidemal growth factor receptor) 表皮生长因子受体(抗原)
Eukaryotic aspartyl protease(Rice) 天冬氨酸蛋白酶家族蛋白(水稻蛋白的一种)(抗原)
FAM3B/PANDER(PANcreatic DERived factor) 一种新型的胰岛细胞因子(抗原)
Fabp2 (fatty acid binding protein 2, intestinal) 脂肪酸结合蛋白2(抗原)
ECG2 (sophagus cancer-related gene-2) 食道癌相关基因(抗原)
Fibronectin (FN) 纤维连结蛋白(多肽抗原)
FGF-7/KGF (Keratinocyte growth factor precursor) 成纤维细胞生长因子-7/纤维母细胞生长因子 (抗原)
FGFR1 peptide 碱性成纤维细胞生长因子受体-1(多肽抗原)
FGFR2(Fibroblast Growth Factor Receptor 2) 成纤维细胞生长因子受体2抗原
FGF-8/HBGF-8 (Fibroblast growth factor 8) 成纤维细胞生长因子-8/纤维母细胞生长因子-8 (抗原)
GAD-65 (glutamate decarboxylase) 谷氨酸脱羧酶-65(C端多肽)
GAPDH(Ribbt Anti-glyceraldehyde-3-phosphate Dehydrogease ) 3-磷酸甘油醛脱氢酶(抗原)
Galectin-3 半乳糖凝集素-3(抗原)
小鼠杂交瘤细胞;5HA10E5G8E1D10GCS (glucosylceramide synthase, GCS) 葡萄糖神经酰胺合成酶(抗原)
GFP (Green Fluorecent protein) 绿色荧光蛋白(多肽抗原)
EGFP protein/rEGFP/Recombinant EGFP(Enhanced Green Fluorecent protein) 重组增强型绿色荧光蛋白
00 00
操作方法:
1. 从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打),冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富,可提高转化效率)。
4. 37℃,225 rpm复苏60分钟或30℃,225 rpm复苏90分钟。
(当质粒中含有不稳定片段时,30℃培养可降低错误重组的概率,若转化control pUC19计算转化效率,则需37℃,225 rpm复苏60分钟)
5. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。