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上海市所在地
细胞名称 小鼠成纤维细胞;NCTC clone 929
形态特性 成纤维细胞
生长特性 贴壁生长
特征特性 1948年三月建立了NCTC clone 929(小鼠结缔组织),细胞系L的克隆。细胞系L是早建立的连续培养细胞系之一,而clone 929是早的克隆株。 从一只100日龄的雄性C3H/An小鼠的正常皮下疏松结缔组织入脂肪组织中建立了亲本细胞系L。 第95代的细胞系L使用毛细管法分离单细胞建立了clone929。 检测发现鼠痘病毒阴性。
培养条件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 马血清,10%
传代方法 消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。
传代情况 P(560+5)
冻存条件 *培养基+8%DMSO
支原体检测 阴性
STR
同工酶
染色体
产品图片:
细胞培养的优点:
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
匹克氏肉汤基础 规格: 100g 作用: 用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28-2003 中4.62,GB/T4789.11-2003)。 英文名称: CD36
肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养(GB标准) 英文名称: KLK11
葡萄糖肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28-2003 中4.1 GB/T4789.11-2... 英文名称: CD97
哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用: 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验,还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称: NTRK3
血琼脂培养基基础 规格: 250g 作用: 加入脱纤维羊血或兔血,制成血琼脂培养基,用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10-... 英文名称: HA
胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格: 250g 作用: 可广泛应用于细菌的培养,特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称: HA
Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格: 2x5支 作用: 试剂A和试剂B各一支添加于225ml(026080)中配成FB1增菌液。 英文名称: SPARCL1
PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于100ml(026070)中配成PALCAM琼脂。 英文名称: IL1RL1
李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于200ml(026040)中配成LB2增菌液。 英文名称: IL13RA1
李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026040)中配成LB1增菌液。 英文名称: PECAM1
EB增菌液冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026010)中配成EB增菌液。 英文名称: TNF
100mg 枸橼酸铋雷尼替丁 供检查用 常温,避光 100957-200801
100mg 呱西替柳 含量测定 常温,避光 100959-200801
50mg 杨酸愈创木酚酯 TLC法有关物质 常温,避光 100960-200801
50mg 呱西替柳杂质A TLC法有关物质 常温,避光 100960-200801
100mg 盐酸黄酮哌酯 含量测定 常温,避光 100964-200701
100mg 3-甲基黄酮-8-羧酸 供检查用 常温,避光 100965-200701
100mg 甲磺酸加贝酯 含量测定 常温,避光 100966-200701
250mg 谷氨酰胺 HPLC法含量测定 常温,避光 100968-201001
100mg 帕米膦酸二钠 含量测定 常温,避光 100976-200701
100mg 扁桃酸 鉴别 常温,避光 100980-200701
100mg 阿嗪米特 含量测定 常温,避光 100982-200701
100mg 盐酸乙哌立松 含量测定 常温,避光 100986-200801
100mg 庚酸炔诺酮 含量测定 常温,避光 100988-200901
100mg 布地奈德 含量测定 常温,避光 10098-200801
100mg 硫普罗宁 含量测定 常温,避光 100991-200901
100mg 西尼地平 含量测定 常温,避光 100993-200701
100mg 盐酸美金刚 含量测定 常温,避光 100996-200701
100mg UV法含量测定 常温,避光 100997-200701
30mg 聚甲酚磺醛杂质A 检查用 常温,避光 100998-200701
30mg 聚甲酚磺醛杂质B 检查用 常温,避光 100999-200701
30mg 聚甲酚磺醛杂质C 检查用 常温,避光 101000-200701
30mg 聚甲酚磺醛杂质D 检查用 常温,避光 101001-200701
(多肽抗原)
IL1RAPL1 (Interleukin 1 receptor accessory protein-like 1) 白介素受体相关蛋白样1前体蛋白(抗原)
IL-6(Interleukin-6) 白介素6(白细胞介素-6)(多肽抗原)
IL-10(Interleukin-10) 白介素10(白细胞介素-10)(抗原)
IL-8 白介素8(白细胞介素-8)(抗原)
Insulin Receptor(ISR) 胰岛素受体(抗原)
Integrin Alpha 4/ITGA4(Integrin alpha 4) 整合素-α(抗原)
LDL-R(Low-density lipoprotein receptor precursor) 低密度脂蛋白受体(抗原)
Ki-67 Anti-gen Ki-67 Antigen(抗原)
Kiss-1(Metastasis-suppressor KiSS-1 precursor) 肿瘤转移抑制基因(抗原)
重组K3蛋白 重组K3蛋白
Snake poison Protein 蛇毒蛋白
Snake poison Protein 蛇毒蛋白
Batroxobin Protein 蛇毒巴曲酶全蛋白
Leptin 瘦素(抗原)
Lpin1 protein Lpin1 protein(抗原)
Lumbrokinase 蚯蚓纤溶酶(蚓激酶抗原)
Livin (Inhibitors of apoptosis proterins Livin) 一种新的凋亡抑制蛋白(抗原)
p38 MAPK/MKK3/MAPKK14 丝裂原活化蛋白激酶p38(抗原)
Metal ion transporter 拟南介金属离子转运蛋白(抗原)
小鼠成纤维细胞;NCTC clone 929MADCAM-1 黏膜选址素(抗原)
MAG-a/b (Myelin associated glycoprotein; L / S -MAG;) 髓鞘相关糖蛋白a/b(抗原)
MAG (Myelin associated glycoprotein; L-MAG;MAG-a ) 髓鞘相关糖蛋白(抗原)
MAG-a (Myelin associated glycoprotein; L-
操作方法:
1. 从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打),冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富,可提高转化效率)。
4. 37℃,225 rpm复苏60分钟或30℃,225 rpm复苏90分钟。
(当质粒中含有不稳定片段时,30℃培养可降低错误重组的概率,若转化control pUC19计算转化效率,则需37℃,225 rpm复苏60分钟)
5. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。