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生产厂家厂商性质
上海市所在地
细胞名称 猫肾细胞;F81
形态特性
生长特性 贴壁生长
特征特性
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 胎牛血清,10%
传代方法 消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。
传代情况 PN5
冻存条件 *培养基+8%DMSO
支原体检测 阴性
STR
同工酶
染色体
产品图片:
细胞培养的优点:
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
匹克氏肉汤基础 规格: 100g 作用: 用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28-2003 中4.62,GB/T4789.11-2003)。 英文名称: CD36
肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养(GB标准) 英文名称: KLK11
葡萄糖肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28-2003 中4.1 GB/T4789.11-2... 英文名称: CD97
哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用: 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验,还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称: NTRK3
血琼脂培养基基础 规格: 250g 作用: 加入脱纤维羊血或兔血,制成血琼脂培养基,用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10-... 英文名称: HA
胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格: 250g 作用: 可广泛应用于细菌的培养,特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称: HA
Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格: 2x5支 作用: 试剂A和试剂B各一支添加于225ml(026080)中配成FB1增菌液。 英文名称: SPARCL1
PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于100ml(026070)中配成PALCAM琼脂。 英文名称: IL1RL1
李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于200ml(026040)中配成LB2增菌液。 英文名称: IL13RA1
李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026040)中配成LB1增菌液。 英文名称: PECAM1
EB增菌液冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026010)中配成EB增菌液。 英文名称: TNF
00mg
76-38-0 甲氧氟烷标准品 Methoxyflurane 1ml
甲氧基甲基鸟嘌呤标准品 Methoxymethylguanine 20mg
7636-26-2 3-甲氧基酪氨酸标准品 50mg
155-41-9 溴甲东莨菪碱标准品 Methscopolamine Bromide 200mg
77-41-8 甲琥胺标准品 Methsuximide 500mg
135-07-9 甲氯噻嗪标准品 Methyclothiazide 200mg
甲氯噻嗪相关物质A标准品 100mg
79-20-9 乙酸甲酯标准品 Methyl Acetate 1.2ml×3ampules
67-56-1 甲醇标准品 Methyl Alcohol 3x1.5ml
123-51-3 3-甲基-丁醇标准品 3-Methyl-1-butanol 1.2ml×3ampules
25155-18-4 氯氧铵标准品 Methylbenzethonium Chloride 500mg
36861-47-9 甲基亚苄亚基樟脑标准品 Methyl Benzylidene Camphor 200mg
110-42-9 癸酸甲酯标准品 Methyl Caprate 300mg
106-70-7 己酸甲酯标准品 Methyl Caproate 300mg
111-11-5 辛酸甲酯标准品 Methyl Caprylate 300mg
9004-67-5 甲基纤维素标准品 Methylcellulose (AS) 1g
41372-08-1 甲基多巴标准品 Methyldopa 500mg
2508-79-4 盐酸甲基多巴酯标准品 Methyldopate Hydrochloride 200mg
7220-79-3 亚甲蓝标准品 Methylene Blue 250mg
57432-61-8 马来酸甲麦角新碱标准品 50mg
78-93-3 2-丁酮¤标准品 Methyl Ethyl K
白签FLAG Tag标签抗体(N端)IgG
Anti-K3/FITC 荧光素标记抗K3蛋白抗体IgG
Anti-FLAG Tag (CT)/FITC 荧光素标记FLAG Tag标签抗体(C端)IgG
Anti-FLAG Tag (CT)/HRP 辣根过氧化物酶标记 FLAG Tag标签抗体(C端)IgG
Anti-FLAG Tag(CT)/FITC 荧光素标记FLAG Tag标签抗体(C端)IgG
Anti-FLAG Tag(CT)/HRP 辣根过氧化物酶标记FLAG Tag标签抗体(C端)IgG
Anti-Dynamin 2/FITC 荧光素标记兔抗人鸟苷三磷酸酶-发动蛋白2抗体IgG
Anti-Nadrin/FITC 荧光素标记Nadrin抗体IgG
Anti-E.coli O6 (Escherichia coli O6)/Biotin 生物素化兔抗大肠埃希杆菌O6抗体IgG
Anti-EPEC/E.coli /Gold 胶体金离子标记抗肠致病性大肠杆菌抗体IgG
Anti-EPEC-O6/Gold 胶体金离子标记大肠埃希杆菌O6抗体IgG
Anti-E.coli O139/Biotin 生物素标记抗志贺毒素大肠杆菌O139抗体IgG
Anti-E.coli O139/Gold 胶体金离子标记抗志贺毒素大肠杆菌O139抗体IgG
Anti-E.coli O157/Gold 胶体金离子标记抗大肠埃希氏菌O157抗体IgG
Anti-E.coli O157/Biotin 生物素标记抗大肠埃希氏菌O157抗体IgG
Anti-Dysferlin/FITC 荧光素标记Dysferlin蛋白抗体IgG
Anti-EPEC/E.coli /Biotin 生物素化兔抗肠致病性大肠杆菌抗体IgG
Anti-E.coli/Biotin 生物素化兔抗普通大肠埃希菌菌体蛋白抗体IgG
猫肾细胞;F81Anti-E2F1/FITC 荧光素标记转录因子E2F-1抗体IgG
Anti-E2F2/FITC 荧光素标记转录因子E2F-2抗体IgG
Anti-E2F3/FITC 荧光素标记转录因子E2F-3抗体IgG
Anti-E2F4/FITC 荧光
操作方法:
1. 从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打),冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富,可提高转化效率)。
4. 37℃,225 rpm复苏60分钟或30℃,225 rpm复苏90分钟。
(当质粒中含有不稳定片段时,30℃培养可降低错误重组的概率,若转化control pUC19计算转化效率,则需37℃,225 rpm复苏60分钟)
5. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。