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上海市所在地
细胞名称 犬肾细胞;MDCK/IgR
形态特性 上皮样
生长特性 贴壁生长
特征特性
培养条件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
传代方法
传代情况
冻存条件 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法(-)
STR -
同工酶
染色体
产品图片:
细胞培养的优点:
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
匹克氏肉汤基础 规格: 100g 作用: 用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28-2003 中4.62,GB/T4789.11-2003)。 英文名称: CD36
肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养(GB标准) 英文名称: KLK11
葡萄糖肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28-2003 中4.1 GB/T4789.11-2... 英文名称: CD97
哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用: 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验,还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称: NTRK3
血琼脂培养基基础 规格: 250g 作用: 加入脱纤维羊血或兔血,制成血琼脂培养基,用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10-... 英文名称: HA
胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格: 250g 作用: 可广泛应用于细菌的培养,特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称: HA
Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格: 2x5支 作用: 试剂A和试剂B各一支添加于225ml(026080)中配成FB1增菌液。 英文名称: SPARCL1
PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于100ml(026070)中配成PALCAM琼脂。 英文名称: IL1RL1
李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于200ml(026040)中配成LB2增菌液。 英文名称: IL13RA1
李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026040)中配成LB1增菌液。 英文名称: PECAM1
EB增菌液冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026010)中配成EB增菌液。 英文名称: TNF
Nylidrin Hydrochloride 200mg
1400-61-9 制霉菌素标准品 200mg
6197-30-4 奥克立林标准品 Octocrylene 500mg
9002-93-1 辛苯聚糖标准品 Octoxynol 9 200ml
5333-42-6 辛基十二烷醇标准品 Octyldodecanol 200mg
5466-77-3 奥西诺酯标准品 500mg
118-60-5 水杨酸乙基己酯标准品 Octisalate (Octyl Salicylate) 400mg
82419-36-1 氧氟沙星标准品 Ofloxacin 200mg
82419-52-1 氧氟沙星相关物质A标准品 25mg
112-80-1 油酸标准品 Oleic Acid 1g
油酰聚氧甘油酯标准品 Oleoyl Polyoxylglycerides 100mg
3687-45-4 油酸油醇酯标准品 Oleyl Oleate 0.5ml
8001-25-0 橄榄油标准品 Olive Oil (AS) 1g
132539-06-1 奥氮平标准品 Olanzapine 200mg
138564-59-7 奥氮平相关物质A标准品 25mg
221176-49-4 奥氮平相关物质B标准品 25mg
174794-02-6 奥氮平杂质C标准品 5mg
849206-43-5 奥美沙坦酯杂质A标准品 20mg
140462-76-6 盐酸奥洛他定标准品 Olopatadine Hydrochloride 150mg
173174-07-7 奥洛他定相关物质B标准品 35mg
55453-87-7 奥洛他定相关物质C标准品 35mg
奥美拉唑相关FG混合物标准品 25mg
73590-58-6 奥美拉唑标准品 Omeprazole 200mg
88546-55-8 奥美拉唑相关物质A标准品 15mg
95382-33-5 奥美拉唑镁标准品 Omeprazole Magnesium 10mg
99614-02-5 昂丹司琼标准品 On
terotoxins) ELISA Kit 人金葡菌肠毒素
CNX(Human calnexin) ELISA Kit 人钙联蛋白
MIS/AMH(Human Mullerian Inhibiting Substance/Anti-Mullerian hormone) ELISA Kit 人缪勒管抑制物质/抗缪勒管激素
BTC(Human beta cellulin) ELISA Kit 人β细胞素
FETU-A(Human Fetuin A) ELISA Kit 人胎球蛋白A
HPRI(Human placental ribonuclease inhibitor) ELISA Kit 人胎盘核糖核酸抑止剂
PP(Human placental protein) ELISA Kit 人胎盘蛋白
HPL(Human placenta lactogen) ELISA Kit 人胎盘催乳素
HBF(Human anti-cytomegalovirus IgM antibody) ELISA Kit 人胎儿血红蛋白
anti-CMV IgM(Human anti-cytomegalovirus IgM antibody) ELISA Kit 人抗巨细胞病毒抗体IgM
anti-tox IgM(Human anti-toxoplasma IgG antibody) ELISA Kit 人抗弓形体IgM抗体
anti-RV IgG(Human anti-rubella virus IgG antibody) ELISA Kit 人抗风疹病毒IgG抗体
EBV(Human anti-Epstein-Barr virus antibody) ELISA Kit 人抗EB病毒抗体
PGR(Human progesterone receptor) ELISA Kit 人孕酮受体
N-TSH(Human Neonatal Thyroid Stimulating Hormone) ELISA Kit 人新生儿促甲状腺素
SP1/PS Beta1-G(Human Pregnancy Specific Beta1Glycoprotein) ELISA Kit 人特异性β1糖蛋白
PL(Human placetal lactogen) ELISA Kit 人胎盘泌乳素
犬肾细胞;MDCK/IgRABP(Human Androgen Binding Protein) ELISA Kit 人雄激素结合蛋白
ATA(Human anti-trophoblast antibody,ATA ) ELISA Kit 人抗滋养膜细胞抗体
aZP(Human anti-zona pellucida antibody,aZP) ELISA Kit 人抗透明带抗体
AOAb(Human Anti-Ovary Antibody,AOAb
操作方法:
1. 从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打),冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富,可提高转化效率)。
4. 37℃,225 rpm复苏60分钟或30℃,225 rpm复苏90分钟。
(当质粒中含有不稳定片段时,30℃培养可降低错误重组的概率,若转化control pUC19计算转化效率,则需37℃,225 rpm复苏60分钟)
5. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。