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上海市所在地
细胞名称 兔肾细胞;RK13
形态特性 上皮细胞样
生长特性 贴壁生长
特征特性 RK13细胞初期建系于1959年,衍生于5周龄兔的胰酶消化肾细胞。该细胞系对风疹病毒(Rubella virus)敏感,病毒感染产生致细胞病变(CPE)。研究发现RK13细胞可作为多种病毒的敏感宿主,支持B病毒、单纯疱疹病毒(Herpes simplex virus)、伪狂犬病毒(Pseudorabies virus)、痘苗病毒(Vaccinia virus)、兔痘病毒(Rabbitpox virus)、粘液瘤病毒(Myxoma virus)和猴腺病毒(Simian adenoviruses)的增殖。另外
培养条件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
传代方法 1:3传代,2-3天传一代
传代情况 C186
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR STR鉴定
同工酶
染色体
产品图片:
细胞培养的优点:
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
匹克氏肉汤基础 规格: 100g 作用: 用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28-2003 中4.62,GB/T4789.11-2003)。 英文名称: CD36
肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养(GB标准) 英文名称: KLK11
葡萄糖肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28-2003 中4.1 GB/T4789.11-2... 英文名称: CD97
哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用: 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验,还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称: NTRK3
血琼脂培养基基础 规格: 250g 作用: 加入脱纤维羊血或兔血,制成血琼脂培养基,用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10-... 英文名称: HA
胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格: 250g 作用: 可广泛应用于细菌的培养,特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称: HA
Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格: 2x5支 作用: 试剂A和试剂B各一支添加于225ml(026080)中配成FB1增菌液。 英文名称: SPARCL1
PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于100ml(026070)中配成PALCAM琼脂。 英文名称: IL1RL1
李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于200ml(026040)中配成LB2增菌液。 英文名称: IL13RA1
李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026040)中配成LB1增菌液。 英文名称: PECAM1
EB增菌液冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026010)中配成EB增菌液。 英文名称: TNF
100mg
154-41-6 盐酸苯丙醇胺标准品 250mg
118-55-8 柳酸苯酯熔点标准物标准品 500mg
1176-08-5 柠檬酸苯托沙敏标准品 Phenyltoloxamine Citrate 100mg
苯托沙敏相关物质A标准品 50mg
57-41-0 苯妥英标准品 200mg
3060-50-2 苯妥英相关物质A标准品 Phenytoin Related Compound A 50mg
6802-95-5 苯妥英相关物质B标准品 50mg
630-93-3 苯妥英钠标准品 Phenytoin Sodium 200mg
6184-17-4 核黄素磷酸钠标准品 Phosphated Riboflavin 100mg
8002-43-5 卵磷脂标准品 350mg
39382-08-6 磷酯酰乙醇胺标准品 100mg
7664-38-2 磷酸标准品 Phosphoric Acid (AS) 1.5ml×3ampules
牛无细胞真皮基质参考显微照片标准品 ea
驯养老鼠嗜铬细胞瘤参考照片标准品 ea
可移植皮参考显微照片标准品 ea
"
人类成纤维细胞源性皮肤替代参考显微照片标准品
" ea
人皮肤参考显微照片标准品 ea
57-64-7 水杨酸毒扁豆碱标准品 Physostigmine Salicylate 200mg
84-80-0 维生素K1标准品 Phytonadione (Vitamin K1) 500mg
92-13-7 毛果芸香碱标准品 Pilocarpine 300mg
54-71-7 盐酸毛果芸香碱标准品 Pilocarpine Hydrochloride 200mg
2062-78-4 哌咪清标准品
complex II ,MHC II /HLA- II ELISA Kit 人主要组织相容性复合体Ⅱ类
Human apoprotein A1,apo-A1 ELISA Kit 人载脂蛋白A1
Human apoprotein B100,apo-B100 ELISA Kit 人载脂蛋白B100
Human leukemia inhibitory factor receptor,LIFR ELISA Kit 人白血病抑制因子受体
Human Immunoglobulin A,IgA ELISA Kit 人免疫球蛋白A
Human Immunoglobulin G,IgG ELISA Kit 人免疫球蛋白G
Human Immunoglobulin M,IgM ELISA Kit 人免疫球蛋白M
Human plasminogen activator inhibitor 1,PAI-1 ELISA Kit 人纤溶酶原激活物抑制因子1
Human plasminogen activator inhibitor,PAI ELISA Kit 人纤溶酶原激活物抑制因子
Human Fibrinogen Degradation Product,FDP ELISA Kit 人血纤蛋白原降解产物
Human thrombomodulin,TM ELISA Kit 人血栓调节蛋白
Human platelet-derived growth factor,PDGF ELISA Kit 人血小板衍生生长因子
Human platelet activating factor,PAF ELISA Kit 人血小板活化因子
Human Tissue-type Plasiminogen Actilyse,t-PA ELISA Kit 人组织型纤溶酶原激活剂
Human Tissue factor,IF ELISA Kit 人组织因子
Human Beta-Thromboglobulin, Beta-TG ELISA Kit 人β血小板球蛋白/β血栓环蛋白
Human Platelet Factor 4,PF-4 ELISA Kit 人血小板因子4
Human lymphocyte function associated antigen 2,LFA-2 ELISA Kit 人淋巴细胞功能相关抗原2
兔肾细胞;RK13Human leukotriene E4,LT-E4 ELISA Kit 人白三烯E4
Human D-Dimer,D2D ELISA Kit 人D二聚体
human Immunoglobulin E,IgE ELISA Kit 人免疫球蛋白E
Human Triggering Receptor Expresses o
操作方法:
1. 从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打),冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富,可提高转化效率)。
4. 37℃,225 rpm复苏60分钟或30℃,225 rpm复苏90分钟。
(当质粒中含有不稳定片段时,30℃培养可降低错误重组的概率,若转化control pUC19计算转化效率,则需37℃,225 rpm复苏60分钟)
5. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。