品牌
生产厂家厂商性质
上海市所在地
细胞名称 兔晶体上皮细胞永生系;N/N1003A(RLE)
形态特性 上皮样
生长特性 贴壁生长
特征特性
培养条件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
传代方法 1:3传代;3~4天1次。
传代情况
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法(-)
STR -
同工酶
染色体
产品图片:
细胞培养的优点:
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
匹克氏肉汤基础 规格: 100g 作用: 用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28-2003 中4.62,GB/T4789.11-2003)。 英文名称: CD36
肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养(GB标准) 英文名称: KLK11
葡萄糖肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28-2003 中4.1 GB/T4789.11-2... 英文名称: CD97
哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用: 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验,还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称: NTRK3
血琼脂培养基基础 规格: 250g 作用: 加入脱纤维羊血或兔血,制成血琼脂培养基,用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10-... 英文名称: HA
胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格: 250g 作用: 可广泛应用于细菌的培养,特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称: HA
Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格: 2x5支 作用: 试剂A和试剂B各一支添加于225ml(026080)中配成FB1增菌液。 英文名称: SPARCL1
PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于100ml(026070)中配成PALCAM琼脂。 英文名称: IL1RL1
李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于200ml(026040)中配成LB2增菌液。 英文名称: IL13RA1
李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026040)中配成LB1增菌液。 英文名称: PECAM1
EB增菌液冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026010)中配成EB增菌液。 英文名称: TNF
15-67-3 对甲双酮标准品 Paramethadione 500mg
1597-82-6 醋酸帕拉米松标准品 Paramethasone Acetate 200mg
14255-87-9 帕苯达唑标准品 Parbendazole 200mg
306-07-0 巴吉林盐酸盐标准品 Pargyline Hydrochloride 200mg
131918-61-1 帕立骨化醇标准品 10mg
帕立骨化醇溶液标准品 3ml
110429-35-1 盐酸帕罗西汀标准品 Paroxetine Hydrochloride 350mg
帕罗西汀相关物质B标准品 10mg
130855-30-0 帕罗西汀相关物质C标准品 15mg
帕罗西汀相关物质D标准品 10mg
帕罗西汀相关物质E标准品 25mg
110429-36-2 帕罗西汀相关物质F标准品 10mg
帕罗西汀相关物质G标准品 10mg
帕罗西汀系统适用混合物A标准品 50mg
20554-84-1 小白菊内酯标准品 Parthenolide 25mg
颗粒计数器用套件标准品 Particle Count Set 2blanks and 2suspe
8002-3-7 花生油标准品 Peanut Oil (AS) 1g
38363-32-5 酸环戊丁心安标准品 Penbutolol Sulfate 200mg
52-67-5 青霉胺标准品 Penicillamine 200mg
20902-45-8 二硫青霉胺标准品 Penicillamine Disulfide 100mg
41372-02-5 苄星青霉素标准品 Penicillin G Benzathine 200mg
113-98-4 青霉素钾标准品
HLA-G(Human leukocyte antigen G) ELISA Kit 人类白细胞抗原G
C3b(Human Complement fragment 3b) ELISA Kit 人补体片断3b
C4b(Human Complement fragment 4b) ELISA Kit 人补体片断4b
C4d(Human Complement fragment 4d) ELISA Kit 人补体片断4d
C5b(Human Complement fragment 5b) ELISA Kit 人补体片断5b
IgH(Human immunoglobulin heavy chain) ELISA Kit 人免疫球蛋白重链
IgHV(Human immunoglobulin heavy chain variable region) ELISA Kit 人免疫球蛋白重链可变区
poly-IgR(polyimmunoglobulinreceptor) ELISA Kit 人多免疫球蛋白受体
Hb-AGE(Human hemoglobin-advanced glycosylation end products) ELISA Kit 人血红蛋白晚期糖基化终末产物
mIgA(Human membrane IgA) ELISA Kit 人表面膜免疫球蛋白A
Ig-j(Human immunoglubin joining chain) ELISA Kit 人免疫球蛋白j链
HB- Beta(Human Beta-subunits of hemoglobin) ELISA Kit 人血红蛋白β亚基
SIgA(Human secretory immunoglobulin A) ELISA Kit 人分泌型免疫球蛋白A
SIgA(Human secretory immunoglobulin A) ELISA Kit 人分泌型免疫球蛋白A(人唾液)
F XII a(Human activated coagulation factor XII ) ELISA Kit 人活化凝血因子Ⅻ
Human Free Protein S,FP-S ELISA Kit 人游离蛋白S
兔晶体上皮细胞永生系;N/N1003A(RLE)APT(Human Abnormal prothrombin) ELISA Kit 人异常凝血酶原
CIC(Human circulating immune complex) ELISA Kit 人循环免疫复合物
PA-IgM(Human Platelet associated antibody) ELISA Kit 人血小板相关抗体IgM
FPA(Human fibrinopeptide A) E
操作方法:
1. 从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打),冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富,可提高转化效率)。
4. 37℃,225 rpm复苏60分钟或30℃,225 rpm复苏90分钟。
(当质粒中含有不稳定片段时,30℃培养可降低错误重组的概率,若转化control pUC19计算转化效率,则需37℃,225 rpm复苏60分钟)
5. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。