品牌
生产厂家厂商性质
上海市所在地
细胞名称 家猪皮肤细胞;SSC-S1
形态特性 成纤维细胞样
生长特性 贴壁生长
特征特性 该细胞系来源于一雌性家猪的皮肤组织。2000年由中国科学院昆明细胞库建立。
培养条件 M-199: with Earle's Balanced Salts Solution (EBSS) 15%NBS;1ng/ml FGF
传代方法 1:2传代;3-4天一次
传代情况 P4
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 荧光法(-)
STR -
同工酶
染色体
产品图片:
细胞培养的优点:
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
匹克氏肉汤基础 规格: 100g 作用: 用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28-2003 中4.62,GB/T4789.11-2003)。 英文名称: CD36
肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养(GB标准) 英文名称: KLK11
葡萄糖肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28-2003 中4.1 GB/T4789.11-2... 英文名称: CD97
哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用: 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验,还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称: NTRK3
血琼脂培养基基础 规格: 250g 作用: 加入脱纤维羊血或兔血,制成血琼脂培养基,用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10-... 英文名称: HA
胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格: 250g 作用: 可广泛应用于细菌的培养,特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称: HA
Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格: 2x5支 作用: 试剂A和试剂B各一支添加于225ml(026080)中配成FB1增菌液。 英文名称: SPARCL1
PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于100ml(026070)中配成PALCAM琼脂。 英文名称: IL1RL1
李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于200ml(026040)中配成LB2增菌液。 英文名称: IL13RA1
李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026040)中配成LB1增菌液。 英文名称: PECAM1
EB增菌液冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026010)中配成EB增菌液。 英文名称: TNF
-200301
100mg 七叶皂苷钠 含量测定 100346-200402
100mg 黄豆苷元 含量测定 100347-200702
20mg 7-甲氧基-4’-羟基异黄酮 有关物质 100348-200301
100mg 二甲磺酸阿米三嗪 含量测定 100349-200501
100mg 萝巴新 含量测定 100350-200501
100mg 枸橼酸锌 原子吸收 100351-200301
50mg 卡莫氟 含量测定 100352-200301
50mg 奥沙普秦 含量测定 100353-200301
100mg 烟酸占替诺 含量测定 100356-201002
100mg 盐酸帕罗西汀 HPLC法含量测定 100357-200301
30mg 卡巴胆碱 UV法含量测定 100361-200301
100mg 西洛他唑 含量测定 100363-200301
50mg 氯唑沙宗 含量测定 100364-200301
100mg 茴拉西坦 含量测定 100365-200401
100mg 卡洛磺钠 含量测定 100366-200702
100mg 奥美拉唑 含量测定 100367-201003
100mg 维生素B2 HPLC法含量测定 100369-200502
50mg 泛酸钙 HPLC法含量测定 100370-200301
100mg 乌苯美司 含量测定 100371-200802
100mg 阿苯达唑 含量测定 100373-200502
100mg 苯磺酸氨氯地平 含量测定 100374-200903
100mg 盐酸特拉唑嗪 含量测定 100375-200502
100mg 氯化钠 含量测定 100376-20
TM ELISA Kit 大鼠血栓调节蛋白
PDGF ELISA Kit 大鼠血小板衍生生长因子
OxLDL ELISA Kit 大鼠氧化低密度脂蛋白
PAF ELISA Kit 大鼠血小板活化因子
P III NT ELISA Kit 大鼠Ⅲ型前胶原氨基端肽
Col III ELISA Kit 大鼠Ⅲ型胶原
CRP ELISA Kit 大鼠C反应蛋白
TPA ELISA Kit 大鼠组织多肽抗原
t-PA ELISA Kit 大鼠组织型纤溶酶原激活剂
TF ELISA Kit 大鼠组织因子
VD ELISA Kit 大鼠维生素D
VK1 ELISA Kit 大鼠维生素K1
VB12 ELISA Kit 大鼠维生素B12
VD3 ELISA Kit 大鼠维生素D3
VD2 ELISA Kit 大鼠维生素D2
VE ELISA Kit 大鼠维生素E
VA ELISA Kit 大鼠维生素A
Beta-TG ELISA Kit 大鼠β血小板球蛋白/β血栓环蛋白
PF-4/CXCL4 ELISA Kit 大鼠血小板因子4
家猪皮肤细胞;SSC-S1DHT ELISA Kit 大鼠双氢睾酮
CTGF ELISA Kit 大鼠结缔组织生长因子
AsAb ELISA Kit 大鼠抗抗体
PTH ELISA Kit 大鼠甲状旁腺激素
操作方法:
1. 从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打),冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富,可提高转化效率)。
4. 37℃,225 rpm复苏60分钟或30℃,225 rpm复苏90分钟。
(当质粒中含有不稳定片段时,30℃培养可降低错误重组的概率,若转化control pUC19计算转化效率,则需37℃,225 rpm复苏60分钟)
5. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。