水土中总磷酸盐试剂盒-微量法注意：正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。

测定意义

总磷酸盐包含正磷酸盐、偏磷酸盐、焦磷酸盐、多聚磷酸盐等各种磷酸盐的形式，反应了水土中的磷酸盐水平，是一个水质和土壤质量评价的重要指标。

测定原理

在酸性溶液中，在分解剂和高温条件下，将无机磷酸盐和有机磷酸盐水解成正磷酸盐，正磷酸盐可与钼酸铵反应成磷钼酸，在还原剂存在时被还原为磷钼蓝，在 710nm 处有特征吸收峰。

需自备的仪器和用品

天平，震荡仪、常温离心机、酶标仪、96 孔板、蒸馏水。

水土中总磷酸盐试剂盒-微量法试剂组成和配制

试剂一：液体 20mL×1 瓶，4℃保存。 试剂二：液体 40mL×1 瓶，4℃保存。 试剂三：液体 4mL×1 瓶，4℃避光保存。

试剂四：粉剂×1 瓶，4℃保存。临用前加 4mL 蒸馏水充分溶解，然后将试剂五全部加入试剂四中充分混匀。

试剂五：液体×1 支，4℃保存。

样品处理

1.水样：按照水样体积（mL）：试剂一体积（mL）：试剂二体积（mL）为 10:1:2 的比例

（建议取 1mL 水样，加入 100μL 试剂一和 200μL 试剂二）95℃沸水浴 30min，冷却后待测。

2.土样：按照土壤质量（g）：蒸馏水体积(mL)：试剂一体积（V）：试剂二体积（V）=1： 10:1:2（建议称取约 0.1g 土样，加入 1mL 蒸馏水，再加入 100μL 试剂一和 200μL 试剂二）， 95℃沸水浴振荡 30min，10000g ，25℃离心 10min，取上清液待测。

水土中总磷酸盐试剂盒-微量法测定操作表

计算公式

标准曲线：y = 0.0237x + 0.0016，R2 = 0.9989；x 为 PO -浓度 μg/mL，y 为吸光值△A。

1.水样：

总磷酸盐含量（μg/mL）= (△A-0.0016)÷ 0.0237×V 样÷（V 样÷V 样总）

= 54.8×(△A-0.0016)

2.土样：

总磷酸盐含量（μg/g）= (△A+0.0063)÷ 0.0489×V 样÷（W×V 样÷V 样总）

=54.8×(△A+0.0063)÷W

V 样：加入样本体积；0.04mL；V 样总：样本总体积，1.3mL；W，土样质量，g。水土中总磷酸盐试剂盒-微量法