PrimaCell™大鼠膀胱上皮细胞试剂盒

总RNA制备：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。生物科技提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。
cDNA制备：纯化后的总RNA来合成cDNA第一链，以50ul总反应体系进行逆转录，体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA，1 ul cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析，保证了产品的质量。
蛋白制备：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人关节软骨组织裂解液，离心去除组织碎片，通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度，组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF，-80度保存。 

实验要点及说明；

1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

运输和保存；

视天气状况和运输距离远近，公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中，置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输；收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养，如无法立刻进行复苏操作，冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满*培养基后进行常温运输；收到细胞后请镜下观察细胞生长状态，如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作，如悬浮的细胞较多，请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。

操作要点；

1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

小鼠环孢素A(CsA)ELISA检测试剂盒MouseCyclosporineA,CsAELISAKit 96T/48T  139051-27-7知母皂苷B品牌  Anemarsaponin B

人盐抵抗的酸性1酸酶(AP)试剂盒 Human Tarate Resista Acid Phosphatase,AP ELISA Kit  136656-07-0知母皂苷BII规格  Timosaponin B-Ⅱ

Ratamyloidbetapeptide1-42,Aβ1-42ELISAKit大鼠β淀粉样蛋白1-42(Aβ1-42)ELISA试剂盒规格：96T/48T  136565-73-6知母皂苷E  Anemarsaponin E

载玻片细胞细胞有丝分裂荧光显微镜检测试剂盒10/20  24512-63-8栀子苷说明书  Geniposide

MouseActivinA,ACV-AELISA试剂盒小鼠活化素A(ACV-A)ELISA试剂盒规格：96T/48T  83-86-3植酸品牌   Phytic acid
2292-16-2甲基莲心碱说明书  Neferine   英文名称RatPyruvateKinaseM2ELISAKit大鼠同酸激酶M2型同工酶(M2-PK)规格：96T/48T

22910-60-7银杏酸（C15：1）品牌  Ginkgolic Acid (C15:1)  英文名称RatPyriLinksELISAKit大鼠吩(PyriLinks)规格：96T/48T

22888-70-6水飞蓟宾规格  Silymarin  英文名称RatPyriLinksELISAKit大鼠吩(PyriLinks)规格：96T/48T

22681-72-7丹参素说明书  Danshensu   英文名称RatPTHELISAKit大鼠甲状旁腺激素(PTH)ELISAKit规格：96T/48T

225937-10-0(+)儿茶素  (+)-Catechin hydrate   英文名称RatPTHELISAKit大鼠甲状旁腺激素(PTH)ELISAKit规格：96T/48T
小鼠脂联素(human adiponectin)ELISA试剂盒 ，英文名： human adiponectin ELISA Kit  2034-69-7西瑞香素规格  Daphnoretin

牛的牛血清白蛋白残留检测ELISA检测试剂盒Bovinerudimealbovineserumalbumincheck-upELISAKit 96T/48T  177931-17-8三白草酮  Sauchinone

人AP-5复合物β亚基(PP1030)试剂盒 human PP1030 ELISA Kit  71610-00-9三尖杉宁碱说明书  Cephalomannine

英文名称MouseIL-2sRαELISAkit小鼠白介素2可溶性受体α链(CD25)(IL-2sRα)规格：96T/48T  5302-45-4三七素品牌  dencichine

冰冻切片总胆高氯酸萘醌(PAN)染色试剂盒50  三七皂苷Fc规格  Notoginsenoside Fc
PrimaCell™大鼠膀胱上皮细胞试剂盒61825-98-7西贝母碱品牌  Sipeimine  转基因棉花MON531品系试剂盒20

6155-35-7鼠李糖说明书  L-Rhamnose monohydrate  转基因棉花MON15985品系试剂盒20

61371-55-9格列风内酯说明书  Griffonilide   转基因棉花MON1445品系试剂盒20

61303-13-7异类叶升麻苷品牌  Isoacteoside  转基因棉花GK19品系试剂盒20

61301-33-5五味子丙素品牌  schisandrin C  转基因大豆GTS40.3.2品系试剂盒20