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小鼠神经元细胞提取物价格 | Mouse Brain : Normal Neuron CellsDerivatives | EYX99192 |
小鼠神经元细胞提取物【Mouse Brain : Normal Neuron CellsDerivatives】
小鼠神经元细胞提取物是从小鼠原代神经元细胞提取的,小鼠原代神经元细胞从正常小鼠脑组织制备。所有的产品在发货之前均经过严格的QA/QC流程以确保其质量。这些产品可以直接用于基因克隆,表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。
总RNA制备:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。生物科技提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。
cDNA制备:纯化后的总RNA来合成cDNA第一链,以50ul总反应体系进行逆转录,体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA,1 ul cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析,保证了产品的质量。
蛋白制备:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人关节软骨组织裂解液,离心去除组织碎片,通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度,组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF,-80度保存。
细胞培养方法:
1、细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化;
③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止;
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清;
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中,T25培养瓶加6-8ml培养基;
⑥悬浮细胞直接离心收集,细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏:
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml培养基吹匀,将细胞悬液加入培养瓶中,补加适量培养基。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)
②1-2min后,显微镜下观察细胞,大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化;
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1ml冻存液重悬细胞;
④将冻存管放入程序降温盒,放入-80℃冰箱,4小时后将冻存管转入液氮罐储存。
实验事项:
1. 试剂准备:所有试剂都必须在使用前达到室温,使用后请立即按照说明书要求保存试剂。 实验操作中请使用一次性的吸头,避免交叉污染。
2. 加样:加样或加试剂时,请注意在吸取标本 / 标准品,酶结合物或底物时,前一个孔与后一个孔加样之间的时间间隔如果太大,将会导致不同的“预孵育"时间,从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。一次加样时间(包括标准品及所有样品)好控制在10分钟内,如标本数量多,推荐使用多道移液器加样。
3. 孵育:为防止样品蒸发,试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内,酶标板加上盖或覆膜,以避免液体蒸发;洗板后应尽快进行下步操作,任何时侯都应避免酶标板处于干燥状态;同时应严格遵守给定的孵育时间和温度。
4. 洗涤:洗涤过程中反应孔中残留的洗涤液应在滤纸上充分拍干,勿将滤纸直接放入反应孔中吸水,同时要消除板底残留的液体和手指印,避免影响后的酶标仪读数。
5. 试剂配制:Detection A及Detection B在使用前请手甩几下或少时离心处理,以使管壁或瓶盖的液体沉积到管底。标准品、检测溶液A工作液、检测溶液B工作液请依据所需的量配置使用,并使用相应的稀释液配制,不能混淆。请确配置标准品及工作液,尽量不要微量配置(如吸取检测溶液A时,一次不要小于10μl),以避免由于不准确稀释而造成的浓度误差;请勿重复使用已稀释过的标准品、检测溶液A工作液或检测溶液B工作液。
6. 反应时间的控制:加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化(比如,每隔10分钟),如颜色较深,请提前加入终止液终止反应,避免反应过强从而影响酶标仪光密度读数。
7. 底物:底物请避光保存,在储存和温育时避免强光直接照射。
建议检测样品时均设双孔测定,以保证检测结果的准确性。
如标本中待测物质含量过高,请先稀释后再测定,计算时请后乘以稀释倍数。
金黄色葡萄球菌毒性休克综合征毒素(TSST)/ 杀白细胞素(PVL) 双重荧光PCR检测试剂盒482-Deoxy,2-difluoro-D-erythro-pentafuranous-ulose,5-dibenzoate1221111
金黄色葡萄球菌肠毒素A(SEA)/B(SEB) 双重荧光PCR检测试剂盒48D-Mannitol diacetonide177
沙门菌单重荧光PCR检测试剂盒48Pemetrexed1372813培美曲塞二钠
伤寒沙门菌单重荧光PCR检测试剂盒484-[2-(2-Amino,7-dihydro-oxoH-pymol[2,3-d]pyrimodin-yl)ethyl]benzoic acid methyl ester155
副伤寒沙门杆菌单重荧光PCR检测试剂盒(有甲乙丙三型)48Pemetrexed di35716培美曲塞二钠
Humanphospholamban,PLNELISAKit人受0蛋白(PLN)ELISA试剂盒规格:96T/48T 12-Hydroxyjasmonic acid 140631-27-2 中文名:12-羟基酸 分子式:C12H18O4
Humanphosphoinositide-specificphospholipaseC,PIPLCELISAKit人0酯酰肌醇特异性0酯酶C(PIPLC)ELISA试剂盒规格:96T/48T 11β-Hydroxy-2'-methyl-5'βH-pregna-1,4-die7,16-d]oxazole-3,20-dione 中文名: 分子式:C23H29NO4
humanphospho-inhibitorysubunitofNF-κBα,pIKBαELISAKit人0酸化核因子κB抑制蛋白α(pIKBα)ELISA试剂盒规格:96T/48T 11β,17α-Dihydroxy-6α-methylpregna-1,4-diene-3,20-dione 6870-94-6 中文名: 分子式:C22H30O4
Humanphosphoglyceratemase2,PGAM2ELISAKit人0酸甘油酸变位酶2(PGAM2)ELISA试剂盒规格:96T/48T 11α-Hydroxyandrost-4-ene-3,17-dione 中文名:11α-羟基-雄甾-4-烯-3,17-二酮 分子式:C19H26O3
HumanPhosphoglucomase,PGMELISAKit人0酸葡萄糖变位酶(PGM)ELISA试剂盒规格:96T/48T 11-Hydroxyjasmonic acid 140447-14-9 中文名: 分子式:C12H18O4
戊硫醇(标准品) n-Amyl mercaptan 质量规格:Standard for GC, ≥99.5% (GC) 牛β羟(βOHB)ELISA检测试剂盒BovineBeta-HydroxybyricAcid,β-OHBELISAKit 96T/48T
Amberlite IR-120阳离子交换树脂(钠型) AmberliteIR-120 质量规格:钠型 牛白介素2受体(IL-2R)ELISA检测试剂盒BovineIerleukin-2receptor,IL-2RELISAkit 96T/48T
乙酸戊酯(标准品) Amyl acetate 质量规格:for GC,≥99.5%(GC) 牛的牛血清白蛋白残留检测ELISA检测试剂盒Bovinerudimealbovineserumalbumincheck-upELISAKit 96T/48T
苯乙酮(标准品) Acetophenone 质量规格:Standard for GC,≥99.5%(GC) 牛分泌型球蛋白A(sIgA)ELISA检测试剂盒BovinesecretoryimmunoglobulinA,sIgAELISAKit 96T/48T
偶氮苯(标准品) Azobenzene 质量规格:分析标准品 牛固酮(ALD)试剂盒 Bovine aldosterone,ALD ELISA kit
酸洗石棉 Asbestos acid washed 质量规格:AR 牛过氧化物酶体增殖因子活化受体γ(PPARG)试剂盒 Bovine peroxisome proliferator-activated receptor gamma,PPARG ELISA kit
苊(标准品) Acenaphthene 质量规格:分析标准品,≥99.5%(GC) 牛过氧化脂质(LPO)试剂盒 Bovine lipid peroxide,LPO ELISA kit
铝标准溶液(1000μg/ml,介质:1.0 mol/L HNO3) Aluminum solution 质量规格:1000μg/ml,介质:1.0 mol/L HNO3 牛核心蛋白聚糖(DCN)试剂盒 Bovine Decorin,DCN ELISA kit
铝标准溶液(100µg/mL,基体:5%HCl) Aluminum solution 质量规格:100µg/mL,基体:5%HCl 牛坏死因子α(TNF-α)试剂盒 Bovine Tumor necrosis factor α,TNF-α ELISA kit
(+/-)-儿茶精(标准品) (±)-Catechin hydrate 质量规格:分析标准品 牛环0酸鸟苷(cGMP)试剂盒 Bovine cyclic Guanosine monophosphate,cGMP ELISA Kit
小鼠神经元细胞提取物价格羟脯酸(Hyp)测定试剂盒(碱水解法)(测动物血清、组织、尿液) Rhein 478-43-3 中文名:大黄酸 分子式:C15H8O6
强啡肽 英文名称: Human Dynorphin 规格: 48T/96T 英文缩写: DYN 3β-Hydroxyergost-5-en-7-one 中文名: 分子式:C28H46O2
前列腺酸性0酶(PACP)检测 Glamine syhetase (GS) detection Polypodine B 18069-14-2 中文名:水龙骨甾酮B 分子式:C27H44O8
前列腺素 E1(PGE1) 作用: ELISA 规格: 48T/96T 进口分装 Peri acid 82-75-7 中文名:周位酸 分子式:C10H9NO3S
漆酶试剂盒 可见分光光度法 50管/24样 4,9-Dihydroxy-α-lapachone 中文名: 分子式:C15H14O5
注意事项:
1. 接收到,肉眼观察细胞培养基颜色,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张)。
2.用75%的酒精消毒(建议配置75%的酒精的水是灭菌过的)。
3.严格无菌操作,打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管*吸出(严禁直接倾倒),放入另一无菌容器中(建议换新的培养基培养细胞)。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆,轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落,加入终止液终止。
6.1000rpm,5min离心,重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶,37℃,5%CO2培养。