美国NovaBios基孔肯雅热诊断试剂盒（美国CDC使用）

广州健仑生物科技有限公司

本公司专业供应各种进口品牌基孔肯雅热检测试剂盒，包括美国的NovaBios、德国NOVA、广州创仑等CDC品牌。主要包括胶体金、酶免、PCR等方法学。欢迎咨询

基孔肯雅热IgM诊断试剂

基孔肯雅热IgG诊断试剂

基孔肯雅热ELISA检测试剂

基孔肯雅热快速检测试剂

基孔肯雅病毒核酸检测试剂盒（荧光探针PCR）

美国CDC的基孔肯雅病毒诊断试剂——美国的NovaBios

德国CDC使用的基孔肯雅病毒诊断试剂——德国NOVA

美国NovaBios基孔肯雅热诊断试剂盒（美国CDC使用）

【预期用途】 
基孔肯雅IgG/IgM抗体ELISA检测试剂盒主要用于定性检测人血清和血浆中抗基孔肯雅病毒的IgG/IgM抗体。 
【实验原理】 
此试剂盒基于ELISA技术。包被板中包被了抗人IgG抗体，如果人血清或血浆中含有IgG时，则会与其特异性结合，洗板将未结合的物质洗去， 然后加入基孔肯雅抗原溶液，洗板洗去未结合的物质，然后加入链霉亲和素和基孔肯雅抗体酶联物。洗板后，加入TMB底物液，颜色变成蓝色，加入终止液终止反应，颜色由蓝色转为黄色，zui后用酶标仪在450nm处读数。 
【试剂组成】 
包被板：12×8可拆卸，包被了抗人IgG抗体，密封在可重封铝箔袋中 
基孔肯雅溶液1：1瓶包含6mL的基孔肯雅抗原溶液，即用，白盖 
基孔肯雅溶液2：1瓶包含6mL的生物素化的基孔肯雅抗体，即用，蓝色，白盖 
基孔肯雅IgM阳性质控：1瓶，1.5mL，黄色，即用，红盖 
基孔肯雅IgM临界质控：1瓶， 2mL，黄色，即用，绿盖 
基孔肯雅IgM阴性质控：1瓶，1.5mL，黄色，即用，蓝盖 
样本稀释液： 1瓶包含100mL的即用缓冲液，用于稀释样本，pH7.2±0.2，黄色，白盖 
洗涤液：1瓶，包含50mL  20倍浓缩的缓冲液，（pH7.2±0.2）用于洗板，白盖 
链霉亲和素结合液：1瓶包含6mL过氧化物酶结合的链霉亲和素，即用，红色，黑盖 
TMB底物液：1瓶包含15mL  TMB，即用，黄盖 
终止液：1瓶包含15mL，即用，内含硫酸，0.2mol/l，红盖 
【需要的设备和材料】              
固定板
封板片 
酶标仪（450/620nm）              
37℃孵箱 
洗瓶或自动洗板机
10~1000μL的移液器
漩涡混匀器 
蒸馏水或去离子水
一次性试管
计时器 
【储存和稳定性】 
试剂在有效期内，储存于2-8℃稳定 
【试剂准备】 
洗涤液的准备 
用双蒸水稀释洗涤液，例子：10ml洗涤液+190ml双蒸水。稀释好的洗涤液在室温下5天内有效。 
【样本的采集和准备】 
这个实验中使用的样本是人血清和血浆，如果实验在样本采集后的5天内进行，则需要储存在2-8℃，否则，必须于-20℃到-70℃深度冻存。如果样本是深度冻存的，在使用前，则需要充分混匀，避免反复冻融。 不推荐使用热灭活的样本 
【样本的稀释】 
将10μL样本跟1ml的样本稀释液混匀，并用漩涡混匀器充分混匀。
【实验步骤】 
在开始试验前，请仔细阅读试验说明。结果的可信度是依赖于严格地按照实验说明来进行的，铺板时zui少留1个孔为空白对照（A1）1个阴性质控孔（B1）2个临界质控孔（C1+D1）1个阳性质控孔（E1）。开始试验前，请将所有试剂都平衡到室温 
1.  吸取50μL的质控品和稀释过的样本到相应的孔中，留A1孔做空白对照孔
2.  封板 
3.  在37±1℃下孵育1小时±5分钟 
4.  当孵育完成时，揭去封板片，弃去反应液，每孔300μL洗涤液，洗板3次，避免溢出。每孔浸泡的时间都必须＞5秒，zui后拍板将残留的液滴都拍去。 
5.  吸取50μL基孔肯雅溶液1到除了空白对照孔的每个孔中，盖板 
6.  在室温孵育30分钟 
7.  重复步骤4 
8.  将基孔肯雅溶液2跟链霉亲和素结合物混匀10分钟 
9.  吸取50μL基孔肯雅溶液2跟链霉亲和素的复合物到除了空白对照孔的每个孔中，盖板。 
10.  室温孵育30分钟
11.  重复步骤4 
12.  吸取100μL的TMB底物液到每个孔中 
13.  避光孵育15分钟（精确） 
14.  加入100μL终止液到每个孔中，与加TMB底物液时的间隔和顺序都必须一样 
15.  用酶标仪在加入终止液后30分钟内与450/620nm处检测 
【检测】 
调整酶标仪，以空白对照孔调零，以450nm处检测所有孔的吸光度值。 
【结果】 
1.  检测生效的条件 
只有以下条件符合，检测的结果才能认为的有效的  
空白对照孔    吸光度值＜0.100  
阴性质控孔    吸光度值＜临界质控  
临界质控孔    吸光度值0.150-1.300  
阳性质控孔    吸光度值＞临界质控 
如果以上条件不符合的，那么试验结果则是无效的，需要重新检测
2.  结果的计算 
临界质控平均吸光度值的计算，例子：吸光度1：0.39；吸光度2：0.37                                   
（0.39+0.37）/2=0.38    
平均吸光度值为0.38 
3.  结果的说明 
样本如果是比临界值高出10%，则认定为阳性， 
样本如果是在临界值上下10%之内，则认定为灰色区（推荐在2-4周之后再次检测新鲜的样本，如果样本仍然是灰色区，可以直接认为是阴性） 
样本如果是比临界值低出10%，则认定为阴性 
4.  结果的单位 
病人样本平均吸光度值×10 = U   
临界值 
例子： 1.216×10 =32U 
0.38 
临界值： 10 U 
灰色区：9-11 U 
阴性： ＜9 U 
阳性： ＞11 U

美国NovaBios

临床表现/基孔肯雅热 基孔肯雅热
感染“基孔肯雅”病毒的留尼旺岛居民出现严重蜕皮症状
感染“基孔肯雅”病毒的留尼旺岛居民出现严重蜕皮症状基孔肯雅热
本病的潜伏期为2～12天，通常为3～7天。
急性期
1. 发热： 病人常突然起病，寒战、发热，体温可达39℃，伴有头痛、基孔肯雅热、呕吐、食欲减退，淋巴结肿大。一般发热1～7天即可退热，有的病人约3天后再次出现较轻微发热（双峰热），持续3～5天恢复正常。有些患者可有结膜充血和轻度畏光的结膜炎表现。
2. 皮疹： 80％的患者在发病后2～5天，躯干、四肢的伸展侧、手掌和足底出现皮疹，为斑疹、丘疹或紫癜 ,疹间皮肤多为正常 ,部分患者伴有瘙痒感。数天后消退，可伴有轻微脱屑。
3. 关节疼痛： 发热同时，多个关节和脊椎出现疼痛、关节肿胀，可伴有全身性肌痛。关节痛多为游走性，随运动加剧，晨间较重。病情发展迅速，往往在数分钟或数小时内关节功能丧失，不能活动。主要累及小关节，如手、腕、踝和趾关节等，也可能涉及膝和肩等大关节,腕关节受压引起的剧烈疼痛是本病的特点。关节积液少见。X线检查正常。
4．其他： 极少数患者可出现脑膜脑炎、肝功能损伤、心肌炎及皮肤黏膜出血。
恢复期
急性期后，绝大多数患者的关节疼痛及僵硬状态可*恢复。部分患者持续性关节疼痛和僵硬可达数周至数月，甚至3年以上。
个别患者留有关节功能受损等后遗症。
检查/基孔肯雅热 基孔肯雅热
一般检查
法国科学家正在研究名为“基孔肯雅”的病毒
法国科学家正在研究名为“基孔肯雅”的病毒基孔肯雅热
1. 血常规检查：白细胞计数多为正常，少数患者白细胞总数及淋巴细胞减少、血小板轻度降低。
2. 生化检查：部分患者血清ALT、AST、肌酸激酶（CK）升高。
3. 脑脊液检查：脑膜脑炎患者脑脊液检查符合病毒性损伤的改变。
血清学检查
1. 血清特异性IgM抗体：采用ELISA、免疫层析等方法检测，捕获法检测IgM抗体的结果较为可靠。一般情况下，发病后第1天出现IgM抗体，第5天多数患者呈阳性。
2. 血清特异性IgG抗体：采用ELISA、免疫荧光抗体测定（IFA）、免疫层析等方法检测。一般情况下，发病后第2天出现IgG抗体，第5天多数患者呈阳性。
病原学检查
1. 核酸检测：采用RT-PCR和Real-time PCR等核酸扩增方法检测。一般发病后4天内在多数患者的血清中可检测到病毒核酸。
2. 病毒分离：采集发病2天内患者血清标本，用Vero、C6/36、BHK-21和HeLa等敏感细胞进行病毒分离。
诊断/基孔肯雅热 基孔肯雅热
诊断依据
1. 流行病学资料：生活在基孔肯雅热流行地区或12天内有疫区旅行史，发病前12天内有蚊虫叮咬史。
2. 临床表现：急性起病，以发热为*症状，病程2～5天出现皮疹，多个关节剧烈疼痛。
3. 实验室检查：（1）血清特异性IgM抗体阳性；（2）恢复期血清特异性IgG抗体滴度比急性期有4倍以上增高；（3）从患者标本中检出基孔肯雅病毒RNA；（4）从患者标本中分离到基孔肯雅病毒。
诊断标准

美国NovaBios

我司还提供其它进口或国产试剂盒：登革热、疟疾、乙脑、寨卡、黄热病、基孔肯雅热、克锥虫病、违禁品滥用、肺炎球菌、军团菌等试剂盒以及日本生研细菌分型诊断血清、德国SiFin诊断血清、丹麦SSI诊断血清等产品。

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Where Has Chikungunya Virus Been Found?
Prior to 2013, chikungunya virus outbreaks had been identified in countries in Africa, Asia, Europe, and the Indian and Pacific Oceans.
In late 2013, the first local transmission of chikungunya virus in the Americas was identified in Caribbean countries and territories. Local transmission means that mosquitoes in the area have been infected with the virus and are spreading it to people.
Since then, local transmission has been identified in 45 countries or territories throughout the Americas with more than 1.7 million suspected cases reported to the Pan American Health Organization from affected areas (Updated data from PAHO).
For information on current outbreaks, consult CDC’s Traveler’s Health website.
Click here for more information on chikungunya in the United States.
Through mosquito bites
Chikungunya virus is transmitted to people through mosquito bites. Mosquitoes become infected when they feed on a person already infected with the virus. Infected mosquitoes can then spread the virus to other people through bites.
Chikungunya virus is most often spread to people by Aedes aegypti and Aedes albopictus mosquitoes. These are the same mosquitoes that transmit dengue virus. They bite during the day and at night.
Rarely, from mother to child
Chikungunya virus is transmitted rarely from mother to newborn around the time of birth.
To date, no infants have been found to be infected with chikungunya virus through breastfeeding. Because of the benefits of breastfeeding, mothers are encouraged to breastfeed even in areas where chikungunya virus is circulating.
Rarely, through infected blood
In theory, the virus could be spread through a blood transfusion.  To date, there are no known reports of this happening.
Chikungunya Nowcast for the Americas
What are public health models used for?
In recent years, infectious disease modeling has been increasingly used to help public health experts identify and understand factors that influence when and where outbreaks occur and to what extent they may spread. By helping us identify factors that influence introduction of viruses to specific geographic locations we can better design methods to prevent virus transmission.
What does this nowcast model predict?
This monthly nowcast was developed to help CDC scientists estimate:
Where travelers infected with chikungunya virus are likely to arrive;
And, which locations are at risk of having new local transmission of chikungunya virus.
Why doesn’t the nowcast predict spread of the virus into the future?
CDC developed the model to provide information on the continuously moving front of the epidemic rather than to predict spread of the virus into the future. Predictions into the future would require a different type of model.
How should estimates from the chikungunya nowcast be used?
The nowcast model estimates helps to identify when and where chikungunya spread is likely. This information can be used for planning and timing outreach programs to the public, media, and to health care providers. These activities can raise awareness in the public and medical community, which can lead to early recognition of cases or potential outbreaks in the area. Key education and outreach should focus on:
Raising awareness of chikungunya in the community;
Recognizing the signs and symptoms of chikungunya;
Encouraging the public to seek medical care if/when sick;
Educating the public about how to protect themselves from chikungunya;
Planning and implementing disease surveillance activities; and
Planning and implementing mosquito control activities.