牛α1酸性糖蛋白 牛α1酸性糖蛋白试剂盒 
说明书以人基质金属蛋白酶9试剂盒为例 
    人基质金属蛋白酶9（MMP-9）试剂盒使用说明书 
    本试剂盒仅供研究使用。 
    检测范围： 96T 
    45μg/L -1200μg/L 
    使用目的： 
    本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中基质金属蛋白酶-9（MMP-9）含量。 
    实验原理 
    本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人基质金属蛋白酶-9（MMP-9）水平。用纯化的人基质金属蛋白酶-9（MMP-9）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入基质金属蛋白酶-9（MMP-9），再与HRP标记的基质金属蛋白酶-9（MMP-9）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过*洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的基质金属蛋白酶-9（MMP-9）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人基质金属蛋白酶-9（MMP-9）浓度。 
    试剂盒组成 
    130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶 
    2酶标试剂6ml×1瓶8标准品（2400μg/L）0.5ml×1瓶 
    3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶 
    4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份 
    5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张 
    6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个 
    标本要求 
    1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
    2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。 
    操作步骤 
    1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。 
    1200μg/L5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液 
    600μg/L4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液 
    300μg/L3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液 
    150μg/L2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液 
    75μg/L1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液 
    2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品zui终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。 
    3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。 
    4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用 
    5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。 
    6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。 
    7.温育：操作同3。 
    8.洗涤：操作同5。 
    9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟. 
    10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。 
    11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。 
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