大鼠肿瘤坏死因子β(TNF-β)ELISA试剂盒实验原理为酶联免疫法（简称ELISA），ELISA检测敏感性高，特异性强，操作简单等特点得到国内外众多科研工作者的认可和推崇，被广泛应用在免疫学各领域中，酶联免疫法ELISA试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并*洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。

规格：

48T和96T，48T可以测42样本，96T可以测90样本

应用范围：

仅限科研使用，请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。

样本类型：

人动植物组织、细胞、血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液等生物类液体样本均可检测。

样本收集注意事项：

收集标本前必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天进行检测的标本，储存在4 ℃备用，如有特殊原因需要周期收集标本，将标本及时分装后放在-20 ℃或-70 ℃条件下保存。避免反复冻融。标本2 -8 ℃可保存48小时，-20 ℃可保存 1个月。-70 度可保存6个月。部分激素类标本需添加抑肽酶。

规格及配置：

①96孔板试剂盒配置

微孔酶标板12孔×8条，标准品(浓度见说明)0.3mL*6管，样本稀释液6mL，检测抗体-HRP10mL，20×洗涤缓冲液25mL，底物A6mL，底物B6mL，终止液6mL，封板膜2张，说明书1份，自封袋1个

②48孔板试剂盒配置

微孔酶标板12孔×4条，标准品(浓度见说明)0.3mL*6管，样本稀释液3mL，检测抗体-HRP5mL，20×洗涤缓冲液15mL，底物A3mL，底物B3mL，终止液3mL，封板膜2张，说明书1份，自封袋1个

大鼠肿瘤坏死因子β(TNF-β)ELISA试剂盒自备材料

①酶标仪（要求波长450）

②加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。

③37℃恒温箱

操作步骤：

①从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。

②设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；

③样本孔先加待测样本10μL，再加样本稀释液40μL；空白孔不加。

④除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。

⑤弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。

⑥每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

⑦每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。

结果判断：

绘制标准曲线（详情可见合肥莱尔生物科技有限公司，行业新闻文章ELISA试剂盒标准曲线制作）：在Excel工作表中，以标准品浓度作横坐标，对应OD值作纵坐标，绘制出标准品线性回归曲线，按曲线方程计算各样本浓度值。