美国NovaBios黄热病（YFV-IgM）抗体检测试剂盒

广州健仑生物科技有限公司

本公司专业供应各种进口品牌黄热病检测试剂盒，包括美国的NovaBios、广州创仑等CDC品牌。主要包括胶体金、酶免、PCR等方法学。欢迎咨询

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美国CDC的黄热病毒诊断试剂——美国的NovaBios

美国NovaBios 黄热病（YFV-IgM）抗体检测试剂盒

【黄热病简介】
黄热病，历*称为黄色杰克，黄色瘟疫或青铜约翰，是一种急性病毒性疾病。在大多数情况下，症状包括发热，寒战，食欲不振，特别是在背部的肌肉痛，和头痛。症状通常在五天内改善。在一些人在一天内改善，发烧回来，腹痛发生，肝损伤开始导致黄色皮肤。如果发生这种情况，出血和肾脏问题的风险也增加。

【检测原理】
96孔板YFV-IgM/IgG特异性抗原。将对照或测试样品加入到合适的孔中并孵育。用洗涤缓冲液洗去游离组分。将HRP缀合的检测试剂加入到孔中。TMB底物用于显现HRP酶反应。TMB由HRP催化以产生在加入酸性停止溶液后变为黄色的蓝色产物。黄色的密度与板中捕获的样品的YFV-IgM/IgG量成比例。外径在微板读数器中在450nm下通过分光亮度计测量吸亮度，然后可以计算YFV-IgM/IgG的浓度。

产品规格：96T/盒
检测范围：定性
灵敏度：定性
储存和使用期：2-8℃ 储存12个月
产品应用：用于定性检测人血清，血浆，细胞培养上清液或任何生物液体中的YFV-IgM。

【套件组件】
1.一个96孔板预涂
2.阳性对照：0.5ml
3.阴性对照：0.5ml
4.洗涤缓冲液（30×）：20 ml。稀释：1:30
5.样品稀释缓冲液：6ml
6.6HRP酶联试剂（RTU）：6ml
7.终止液：6ml
8.TMB底物：6ml
9.TMB底物B：6ml
10.板密封：2
11.密封袋：1

【需要材料但不提供】
1.37℃培养箱
2.酶标仪（波长：450nm）
3.精确的移液器和一次性移液器吸头
4.自动洗板机
5.ELISA振荡器
1.5ml管
7.板盖
8.吸收滤纸
9.100ml和1L体积量筒。

【操作程序】
A.制备样品和试剂
1. 样品
收集并立即分析测试样品（2小时内）后立即分离。或等分并长期储存在-20°C。避免多个冻融循环。
细胞培养上清：以约2000-3000×rpm离心20分钟，以去除沉淀，立即分析或分装，并储存于-20℃。
血清：在室温下凝结血清（约4小时）。以约2000-3000×rpm离心20分钟。立即分析血清或等分，并储存在-20°C。
血浆：用柠檬酸盐或EDTA作为抗凝剂收集血浆。在收集30分钟内以2000-3000×rpm离心20分钟。立即分析或等分，并存储在-20°C冷冻。
尿：在无菌容器中收集，以2000-3000×rpm离心20分钟。立即分析或等分，并存储在-20°C冷冻。
组织：组织匀浆的制备将根据组织类型而变化。收集和冲洗样品在2-4℃下用PBS（Ph 7.4）。称重样品并用PBS（Ph 7.4）匀化，并对细胞悬浮液进行超声处理。以2000-3000×rpm离心20分钟。立即测定或等分并储存在-80℃。
（注意：1.*凝结血液样品，离心，避免溶血和沈淀。   2.NaN3不能用作试验样品防腐剂，因为它抑制HRP。）

2.洗涤缓冲液
用蒸馏水稀释浓缩洗涤缓冲液30倍（1/30）（即将20ml浓缩洗涤缓冲液加入580ml蒸馏水中）。

B.测定程序
在使用前将试剂盒组分和样品平衡至室温。建议绘制每个测试的标准曲线。
1.在预涂板上分别设置阳性/阴性，测试样品和对照（零）孔，并记录它们的位置。
2.将50μl的阴性和阳性对照等分到设定的孔中。
3.向对照（零）孔中加入50μl样品稀释缓冲液。
4.向测试样品孔中加入50μl适当稀释的样品（样品稀释比例：1：5）。在底部加入溶液而不接触侧壁。摇动平板以混合内容物。
5.用盖子密封板，并在37℃孵育30分钟。
6.取下盖子并通过在吸收性滤纸或其他吸收材料上敲击板来丢弃板内容物。
7.弃去溶液，用洗涤缓冲液洗涤板5次。不要让孔在任何时候*干燥。
手动清洗：丢弃溶液，不要接触侧壁。将吸水滤纸或其他吸收材料上拍出液体。将洗涤缓冲液填满每个孔，并在ELISA振荡器上轻轻涡流2 分钟。丢弃内容物，并将吸收性滤纸或其他吸收材料上的板敲打。洗板五次。
自动洗涤：弃去所有孔中的溶液，并用洗涤缓冲液洗涤板5次（用缓冲液过量填满孔）。在zui后的洗涤之后，翻转该板并敲击吸收性滤纸或其它吸收材料。建议将清洗器设置为1分钟的浸泡时间。
8.向每个孔中加入50μlHRP结合物的试剂（对照孔除外）。在每个孔底部加入溶液，不要接触侧壁。
9.用盖子密封板，并在37℃孵育30分钟。
10.取下盖子，用洗涤缓冲液洗板5次。
11.向每个孔中加入50μlTMB底物A和50μlTMB底物B，盖上平板并在37℃下孵育15分钟。避免暴露于光。
12.向每个孔中加入50μl终止液，充分混匀。颜色应立即变为黄色。
13.阅读O.D.在微板读数器中在450nm的吸亮度在加入终止溶液的15分钟内。对于计算，（相对O.D.450）=（每个孔的O.D.450） - （零阱的O.D.450）。标准曲线可以作为每种标准溶液（Y）的相对O.D.450与标准溶液（X）的相应浓度作图。可以从标准曲线插入样品的人类YFV-IgM浓度。
14.注意：如果稀释样品，稀释倍数乘以内插法得到稀释前的浓度。

C.结果确定
1.试验有效性：阳性对照的平均值≥1.00; 阴性对照的平均值≤0.10。
2.临界值（CUT OFF）计算：临界值=负控制的平均值+0.15
3.阴性结果：如果OD值<CUT OFF，样品为人YFV-IgM阴性。
4.阳性结果：如果OD值≥CUTOFF，样品为人类YFV-IgM阳性。

D.注意事项
1.在实验之前，离心每个试剂盒组分数分钟，将所有试剂倒入试管底部。
2.在混合或重新组装部件时避免起泡或气泡。
3.洗涤缓冲液可结晶并分离。如果发生这种情况，请加热管以溶解。
4.建议每个对照和样品一式两份或重复测量三次。
5.不要让板在任何时候*干燥！这可以使板上的生物材料失活。
6.不要重复使用移液器吸头和管，以避免交叉污染。
7.不要使用不同套件中过期的组件或组件。
8.将TMB底物B储存在黑暗中，并且为了避免板温育对于温度差的边缘效应，建议在使用前在室温下使TMB底物平衡30分钟。用灭菌的吸头抽吸所需的剂量，不要将残留溶液倒回到小瓶中。

美国NovaBios

以下页面提供有关黄热病疫苗要求和建议的国家特定信息（见表3-27）和疟疾传播信息和预防建议。疟疾传播领域十四个国家特定地图，描绘黄热病疫苗建议的11个国家特定地图和中国参考地图，以帮助解释信息。信息在出版时是准确的;然而，由于疾病传播的变化，或在黄热病的情况下，这些信息随时可能会随着国家入境条件的变化而改变。更新了反映自出版以来变化的信息，可以在本书的在线版本和CDC旅行者健康（）上找到。在旅行前咨询期间考虑的其他疫苗的一般建议可以在CDC旅行者健康上找到。
黄热病
自2006年版CDC Health Information for International Travel发布以来，已经提供了关于黄热病毒（YFV）传播的地理风险的其他国家数据。根据世卫组织地理黄热病风险测绘科学和技术咨询小组（CDC参与）对这些数据的审查，为卢旺达提供了更新的黄热病疫苗接种建议。
某些国家以前需要按十年的时间间隔对黄热病进行灭活，以遵守卫生条例（IHR）。 2014年，卫生组织世界卫生大会通过了关于修改“卫生条例”的建议，取消了10年加药剂量要求，并规定了这一变化的2年过渡期。因此，截至2016年7月11日，完成的疫苗接种或预防证书（ICVP）在接种者的一生中是有效的。此外，即使zui后一次疫苗接种超过十年，各国也不能要求证明再次接种（加强）抗黄热病作为进入条件。
在美国，免疫规范咨询委员会（ACIP）在2015年发布了一项新建议，一剂黄热病疫苗提供持久的保护，对大多数旅客来说是足够的。该建议还确定了应该接受额外剂量的特定旅客群体，另外还可以考虑其他剂量的旅行者。有关详细信息，请参阅本章前面的“黄热病”部分。有关黄热病疫苗促进剂的信息，请参阅CDC旅行者健康或ACIP上发布的具体出版物。
zui终，临床医生决定是否接种任何旅客必须考虑到旅行者感染YFV的风险，国家入境要求以及黄热病接种后（如年龄和免疫状态）严重不良事件的个别危险因素。有关黄热病和疫苗接种指导的详细讨论，请参阅本章前面的“黄热病”部分。
注意：尽管近期有关黄热病疫苗增强剂的“卫生条例”发生了变化，但是当所有有黄热病疫苗接种入境要求的国家何时以及是否会采用这一改变是不确定的。即使各国修改*政策，将ICVP的有效期从10年延长到黄热病的一生，不能保证所有国家边界官员都会意识到这种政策变化或者能够适当执行。 CDC从世卫组织每年获得关于*国家入境要求的信息。世卫组织可能不会在每年的调查问卷中询问有关黄热病疫苗加药入门要求的国家，因为假定各国遵守经修订的“卫生条例”。这可能在可预见的未来留下准确公布的关于某些国家黄热病疫苗增强剂入门要求的信息。过去的经验表明，领事馆和大黄热病关于疫苗接种要求的资料往往不准确。因此，提供者和旅行者在确定特定目的地目前的黄热病疫苗接种入境要求时，不应仅仅依靠这些信息。根据上述注意事项，读者应参考本书的在线版本

美国NovaBios

我司还提供其它进口或国产试剂盒：登革热、疟疾、乙脑、寨卡、黄热病、基孔肯雅热、克锥虫病、违禁品滥用、肺炎球菌、军团菌等试剂盒以及日本生研细菌分型诊断血清、德国SiFin诊断血清、丹麦SSI诊断血清等产品。

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The following pages provide country specific information on requirements and recommendations for yellow fever vaccine (see Table 3-27) and malaria transmission information and prevention recommendations. Malaria spreads in 14 countries specific maps, depicting yellow fever vaccine recommended 11 country-specific maps and Chinese reference maps to help explain the information. Information is accurate at the time of publication; however, this information may change at any time with changes in national entry due to changes in the transmission of the disease or in the case of yellow fever. Updated information that reflects changes since publication, which can be found on the online version of this book and on the CDC Traveler Health website (). General recommendations for other vaccines considered during pre-trip consultation can be found on the CDC Traveler's Health website.
Yellow fever
Since the release of the 2006 CDC Health Information for International Travel, other national data on the geographical risk of yellow fever (YFV) transmission have been provided. According to the WHO Geographic Yellow Fever Risk Mapping Science and Technology Advisory Group (CDC Participation), the review of these data provided Rwanda with updated recommendations for yellow fever vaccination.
Some countries previously had to inactivate yellow fever at a ten-year interval to comply with the International Health Regulations (IHR). In 2014, the WHO World Health Assembly adopted a proposal to amend the International Health Regulations to abolish the 10-year dose requirement and set a two-year transition period for this change. Thus, as of July 11, 2016, the completion of the International Vaccination or Prevention Certificate (ICVP) was effective in the lifetime of the inoculum. In addition, even if the last vaccination for more than a decade, countries can not claim to re-vaccination (strengthening) anti-yellow fever as access conditions.
In the United States, the Advisory Committee on Immunization (ACIP) issued a new proposal in 2015, a long-term protection of yellow fever vaccine, which is sufficient for most travelers. The proposal also identifies specific passenger groups that should receive additional doses, as well as other doses of travelers. For more information, see the "Yellow Fever" section earlier in this chapter. For the latest information on yellow fever vaccine promoters, please refer to the CDC Traveler Health website or the specific publication published on the ACIP website.
In the end, the clinician decides whether or not to receive any passenger must take into account the risk of travelers' infection with YFV, national entry requirements, and individual risk factors for serious adverse events such as age and immune status after inoculation with yellow fever. For a detailed discussion of yellow fever and vaccination guidelines, see the "Yellow Fever" section earlier in this chapter.
Note: Although the recent changes in the International Health Regulations on fever agents for yellow fever have changed, it is uncertain whether and when all countries with yellow fever vaccination requirements are imported. Even if countries modify their official policies, extending ICVP's ​​validity from 10 years to yellow fever will not guarantee that all state borders officials will be aware of such policy changes or be able to implement them appropriay. The CDC obtains information on official country entry requirements each year from WHO. WHO may not ask in the annual questionnaire about countries that require entry requirements for yellow fever vaccine dosing because it is assumed that States comply with the revised International Health Regulations. This may leave an accurate information on the requirements for entry requirements for some countries with yellow fever vaccine enhancers in the foreseeable future. Past experience has shown that consulates and rhubarb fever are often inaccurate for information on vaccination requirements. Therefore, providers and travelers should not rely solely on this information when determining the current requirement for vaccination of yellow fever in a particular destination. In accordance with the above precautions, the reader should refer to the online version of this book