美国NovaBios黄热病核酸PCR试剂（YFV-IgM）

广州健仑生物科技有限公司

本公司专业供应各种进口品牌黄热病检测试剂盒，包括美国的NovaBios、广州创仑等CDC品牌。主要包括胶体金、酶免、PCR等方法学。欢迎咨询

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黄热病毒核酸检测试剂盒（荧光探针PCR）

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美国CDC的黄热病毒诊断试剂——美国的NovaBios

美国NovaBios黄热病核酸PCR试剂（YFV-IgM）

【黄热病简介】
黄热病，历*称为黄色杰克，黄色瘟疫或青铜约翰，是一种急性病毒性疾病。在大多数情况下，症状包括发热，寒战，食欲不振，特别是在背部的肌肉痛，和头痛。症状通常在五天内改善。在一些人在一天内改善，发烧回来，腹痛发生，肝损伤开始导致黄色皮肤。如果发生这种情况，出血和肾脏问题的风险也增加。

【检测原理】
96孔板YFV-IgM/IgG特异性抗原。将对照或测试样品加入到合适的孔中并孵育。用洗涤缓冲液洗去游离组分。将HRP缀合的检测试剂加入到孔中。TMB底物用于显现HRP酶反应。TMB由HRP催化以产生在加入酸性停止溶液后变为黄色的蓝色产物。黄色的密度与板中捕获的样品的YFV-IgM/IgG量成比例。外径在微板读数器中在450nm下通过分光亮度计测量吸亮度，然后可以计算YFV-IgM/IgG的浓度。

产品规格：96T/盒
检测范围：定性
灵敏度：定性
储存和使用期：2-8℃ 储存12个月
产品应用：用于定性检测人血清，血浆，细胞培养上清液或任何生物液体中的YFV-IgM。

【套件组件】
1.一个96孔板预涂
2.阳性对照：0.5ml
3.阴性对照：0.5ml
4.洗涤缓冲液（30×）：20 ml。稀释：1:30
5.样品稀释缓冲液：6ml
6.6HRP酶联试剂（RTU）：6ml
7.终止液：6ml
8.TMB底物：6ml
9.TMB底物B：6ml
10.板密封：2
11.密封袋：1

【需要材料但不提供】
1.37℃培养箱
2.酶标仪（波长：450nm）
3.精确的移液器和一次性移液器吸头
4.自动洗板机
5.ELISA振荡器
1.5ml管
7.板盖
8.吸收滤纸
9.100ml和1L体积量筒。

【操作程序】
A.制备样品和试剂
1. 样品
收集并立即分析测试样品（2小时内）后立即分离。或等分并长期储存在-20°C。避免多个冻融循环。
细胞培养上清：以约2000-3000×rpm离心20分钟，以去除沉淀，立即分析或分装，并储存于-20℃。
血清：在室温下凝结血清（约4小时）。以约2000-3000×rpm离心20分钟。立即分析血清或等分，并储存在-20°C。
血浆：用柠檬酸盐或EDTA作为抗凝剂收集血浆。在收集30分钟内以2000-3000×rpm离心20分钟。立即分析或等分，并存储在-20°C冷冻。
尿：在无菌容器中收集，以2000-3000×rpm离心20分钟。立即分析或等分，并存储在-20°C冷冻。
组织：组织匀浆的制备将根据组织类型而变化。收集和冲洗样品在2-4℃下用PBS（Ph 7.4）。称重样品并用PBS（Ph 7.4）匀化，并对细胞悬浮液进行超声处理。以2000-3000×rpm离心20分钟。立即测定或等分并储存在-80℃。
（注意：1.*凝结血液样品，离心，避免溶血和沈淀。   2.NaN3不能用作试验样品防腐剂，因为它抑制HRP。）

2.洗涤缓冲液
用蒸馏水稀释浓缩洗涤缓冲液30倍（1/30）（即将20ml浓缩洗涤缓冲液加入580ml蒸馏水中）。

B.测定程序
在使用前将试剂盒组分和样品平衡至室温。建议绘制每个测试的标准曲线。
1.在预涂板上分别设置阳性/阴性，测试样品和对照（零）孔，并记录它们的位置。
2.将50μl的阴性和阳性对照等分到设定的孔中。
3.向对照（零）孔中加入50μl样品稀释缓冲液。
4.向测试样品孔中加入50μl适当稀释的样品（样品稀释比例：1：5）。在底部加入溶液而不接触侧壁。摇动平板以混合内容物。
5.用盖子密封板，并在37℃孵育30分钟。
6.取下盖子并通过在吸收性滤纸或其他吸收材料上敲击板来丢弃板内容物。
7.弃去溶液，用洗涤缓冲液洗涤板5次。不要让孔在任何时候*干燥。
手动清洗：丢弃溶液，不要接触侧壁。将吸水滤纸或其他吸收材料上拍出液体。将洗涤缓冲液填满每个孔，并在ELISA振荡器上轻轻涡流2 分钟。丢弃内容物，并将吸收性滤纸或其他吸收材料上的板敲打。洗板五次。
自动洗涤：弃去所有孔中的溶液，并用洗涤缓冲液洗涤板5次（用缓冲液过量填满孔）。在zui后的洗涤之后，翻转该板并敲击吸收性滤纸或其它吸收材料。建议将清洗器设置为1分钟的浸泡时间。
8.向每个孔中加入50μlHRP结合物的试剂（对照孔除外）。在每个孔底部加入溶液，不要接触侧壁。
9.用盖子密封板，并在37℃孵育30分钟。
10.取下盖子，用洗涤缓冲液洗板5次。
11.向每个孔中加入50μlTMB底物A和50μlTMB底物B，盖上平板并在37℃下孵育15分钟。避免暴露于光。
12.向每个孔中加入50μl终止液，充分混匀。颜色应立即变为黄色。
13.阅读O.D.在微板读数器中在450nm的吸亮度在加入终止溶液的15分钟内。对于计算，（相对O.D.450）=（每个孔的O.D.450） - （零阱的O.D.450）。标准曲线可以作为每种标准溶液（Y）的相对O.D.450与标准溶液（X）的相应浓度作图。可以从标准曲线插入样品的人类YFV-IgM浓度。
14.注意：如果稀释样品，稀释倍数乘以内插法得到稀释前的浓度。

C.结果确定
1.试验有效性：阳性对照的平均值≥1.00; 阴性对照的平均值≤0.10。
2.临界值（CUT OFF）计算：临界值=负控制的平均值+0.15
3.阴性结果：如果OD值<CUT OFF，样品为人YFV-IgM阴性。
4.阳性结果：如果OD值≥CUTOFF，样品为人类YFV-IgM阳性。

D.注意事项
1.在实验之前，离心每个试剂盒组分数分钟，将所有试剂倒入试管底部。
2.在混合或重新组装部件时避免起泡或气泡。
3.洗涤缓冲液可结晶并分离。如果发生这种情况，请加热管以溶解。
4.建议每个对照和样品一式两份或重复测量三次。
5.不要让板在任何时候*干燥！这可以使板上的生物材料失活。
6.不要重复使用移液器吸头和管，以避免交叉污染。
7.不要使用不同套件中过期的组件或组件。
8.将TMB底物B储存在黑暗中，并且为了避免板温育对于温度差的边缘效应，建议在使用前在室温下使TMB底物平衡30分钟。用灭菌的吸头抽吸所需的剂量，不要将残留溶液倒回到小瓶中。

美国NovaBios

FDA于2016年10月接受了Sanofi Pasteur的eIND申请。eIND协议的实施包括一个系统的过程，选择Stamaril将分发的站点;这个过程对于管理参与eIND协议和FDA指导的提供商的外展和培训的物流很重要。赛诺菲巴斯德与CDC协商制定了一项两级方案，用于选择美国诊所，以被邀请参加eIND协议（表）。主要目标是招募具有足够地理范围的大量。*级是那些在2016年订购至少250剂黄热病疫苗的。另外，这个层级还增加了较小规模的，以确保在所有50个州，哥伦比亚特区和美国三个地区进入Stamaril（关岛，波多黎各和美属维尔京群岛）与黄热病疫苗接种中心。还增加了，以确保美国政府雇员需要黄热病疫苗接种*工作旅行的疫苗接种，包括关键的公共卫生反应工作。二级包括多站点临床组织，其中从其附属站点订购的总剂量在2016年达到至少250剂量的阈值。在这些情况下，该组织被邀请选择其中一个诊所作为一个层级2站点实施Stamaril协议。截至二零一七年四月，共有二百五十间诊所被列入目标。这与目前提供YF-VAX的4000个民诊员相比有显着的下降。
eIND协议推出于2017年4月开始。赛诺菲巴斯德和CDC正在合作制定有效的沟通计划。赛诺菲巴斯德正在招聘和选定的地点进行沟通，并将于2017年4月和5月通过网络研讨会对参与场地的人员进行培训。
讨论
CDC和赛诺菲巴斯德一直致力于在2017年中期YF-VAX预计*耗尽之后，确保美国持续的黄热病疫苗供应。随着eIND协议的推出，4月份开始，赛诺菲巴斯德将协调现场招聘和培训，CDC将协助解决任何出现的问题。虽然Stamaril分布的系统选址过程考虑了现场量（优先考虑较大的地点）和适当的地理覆盖面，但一些旅客的可及性难度可能会因为全国诊所提供黄色而减少发烧疫苗从4,000到250. CDC和赛诺菲巴斯德将监测疫苗接种中的关键差距，并协同解决任何问题，包括考虑在必要时招募额外诊所的可能性。
CDC将通知国家和地区卫生部门关于Stamaril协议的免疫程序。有关哪些诊所有资格获得Stamaril的信息将提供给公众和其他利益相关者，并与免疫实践咨询委员会进行讨论。 CDC和赛诺菲巴斯德将继续监测国内黄热病疫苗的供应情况，并将随着新信息的提供向医疗保健提供者和公众提供更新。
有关黄热病疫苗的更新和预期的疫苗*枯竭将在CDC的旅行者健康的提供。疫苗/黄热病疫苗。一旦提供，CDC将提供完整的诊所列表，旅客可以收到Stamaril
黄热病和疟疾信息，按国家
Mark D. Gershman，Emily S. Jentes，Rhett J. Stoney（Yellow Fever）Kathrine R. Tan，Paul M.Arguin，Stefanie F. Steele（Malaria）

美国NovaBios

我司还提供其它进口或国产试剂盒：登革热、疟疾、乙脑、寨卡、黄热病、基孔肯雅热、克锥虫病、违禁品滥用、肺炎球菌、军团菌等试剂盒以及日本生研细菌分型诊断血清、德国SiFin诊断血清、丹麦SSI诊断血清等产品。

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FDA received an eIND application from Sanofi Pasteur in October 2016. The implementation of the eIND protocol includes a systematic process that selects the site to which Stamaril will distribute; this process is important for managing logistics that participates in eIND protocols and FDA-directed providers' outreach and training. Sanofi Pasteur negotiated with the CDC to develop a two-level program for selecting the US Clinic website to be invited to participate in the eIND Agreement (Table). The main objective is to recruit a large number of sites with sufficient geographical scope. The first level sites are those that ordered at least 250 doses of yellow fever vaccine in 2016. In addition, this level has also added smaller sites to ensure access to Stamaril (Guam, Puerto Rico and US Virgin Islands) and Yellow Fever Vaccine Centers in all 50 states, the District of Columbia and the United States. Also increased the site to ensure that US government employees need yellow fever vaccination for official work travel vaccinations, including key public health response work. Secondary sites include multi-site clinical organizations in which the total dose ordered from their affiliated sites reached a threshold of at least 250 doses in 2016. In these cases, the organization was invited to select one of the clinic sites as a Level 2 site to implement the Stamaril protocol. As at April 2007, a total of 250 clinics were included in the target. This has a significant decline compared to the 4,000 clinics currently offering YF-VAX.
The eIND agreement was launched in April 2017. Sanofi Pasteur and CDC are working together to develop effective communication plans. Sanofi Pasteur is currently recruiting and selecting locations to communicate, and will be trained in April and April through webinars to participate in the venue.
discuss
CDC and Sanofi Pasteur have been committed to ensuring the continued availability of yellow fever in the United States after YIF-VAX is expected to be fully depleted in mid-2017. With the launch of the eIND protocol, starting in April, Sanofi Pasteur will coordinate on-site recruitment and training, and the CDC will help solve any problems that arise. Although the Stamaril distribution system site selection process takes into account the on-site (priority given to larger locations) and appropriate geographical coverage, some international travelers may be more likely to be able to reduce the availability of fever from 4,000 to 250 because the national clinic provides yellow CDC and Sanofi Pasteur will monitor the key gaps in vaccination and work together to address any issues, including the possibility of recruiting additional clinics where necessary.
The CDC will inform the national and regional health authorities about the immunization program for the Stamaril agreement. Information on which clinics are eligible for Stamaril will be made available to the public and other stakeholders and discussed with the Immunization Practice Advisory Committee. CDC and Sanofi Pasteur will continue to monitor the availability of domestic yellow fever vaccines and will provide updates to health care providers and the public as new information is provided.
Updates about the update of the yellow fever vaccine and the expected complete depletion of the vaccine will be provided on CDC's Traveler Health website. Vaccine / yellow fever vaccine. Once provided, CDC will provide a complete list of clinics where visitors can receive Stamaril
Yellow fever and malaria information by country
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