人低侵袭性脉络膜黑色素素瘤细胞特性：该细胞是Fogh J和TrempeG分离和鉴定的众多人类肿瘤细胞系中的一种；

细胞纯度：93％

细胞活力：87％（Viability by Trypan Blue Exclusion）

细胞检测：细胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌

保存及应用

如是新鲜原代细胞，请于收到后放入CO2培养箱内静置2-3h后再进行实验操作；如是冻存细胞，收到后可放入液氮或-80℃冰箱保存也可进行复苏操作。

人低侵袭性脉络膜黑色素素瘤细胞操作步骤

1用包被Buffer稀释的重组人TFAR19（1mg/ml）包被ELISA板, 100ml/well, 37°C孵育2h或4°C过夜（一般24h以上）。

2洗涤Buffer洗板三次，加入封闭液，200 ml/well ， 37°C孵育2h或4°C过夜。

3洗涤Buffer洗板三次，加入不同稀释度的病人血清（3个重复孔）100ml/well ，37°C孵育1h。设包被Buffer、洗涤Buffer 、封闭液为阴性对照。

4洗涤Buffer洗板三次，加入1：2500稀释的HRP标记的抗人IgG, 100ml/well，37°C孵育1h。

5洗涤Buffer洗板三次，加入显色液，100 ml/well，避光反应10~15min。

6加入H2SO4终止反应，50 ml/well。

7ELISA Reader 读取OD490 光密度值，分析和比较病人血清和正常血 清中TFAR19自身抗体的表达水平。

潜伏期特点：

长短与细胞接种密度、种类、使用的培养基性质有关。

(1)细胞贴附后进入潜伏期,细胞无增殖。少见分裂相，细胞有运动活动。

(2)初代培养 细胞潜伏期约为24～96小时或更长，

连续细胞系和肿瘤细胞潜伏期约6～24小时。

(3)细胞接种密度大潜伏期短。

(4)细胞出现分裂相增多时，标志细胞进入指数增生期。

指数增生期(logarithmic growth phase)：

特点：细胞增殖zui旺盛阶段,分裂相增多。

细胞分裂指数(mitotie index MI) ：

表示每1000个细胞中的分裂相数。

条件：分裂相数与细胞种类、培养成分、pH培养箱温度有关。

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