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人眼脉络黑色素瘤细胞

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详细信息

人眼脉络黑色素瘤细胞特性:该细胞是Fogh JTrempeG分离和鉴定的众多人类肿瘤细胞系中的一种;

细胞纯度:93

细胞活力:87%(Viability by Trypan Blue Exclusion

细胞检测:细胞不含有HIV-1HBVHCV、支原体、细菌、酵母和真菌

保存及应用

如是新鲜原代细胞,请于收到后放入CO2培养箱内静置2-3h后再进行实验操作;如是冻存细胞,收到后可放入液氮或-80℃冰箱保存也可进行复苏操作。

人眼脉络黑色素瘤细胞操作步骤

1用包被Buffer稀释的重组人TFAR191mg/ml)包被ELISA, 100ml/well, 37°C孵育2h4°C过夜(一般24h以上)。

2洗涤Buffer洗板三次,加入封闭液,200 ml/well 37°C孵育2h4°C过夜。

3洗涤Buffer洗板三次,加入不同稀释度的病人血清(3个重复孔)100ml/well 37°C孵育1h。设包被Buffer、洗涤Buffer 、封闭液为阴性对照。

4洗涤Buffer洗板三次,加入12500稀释的HRP标记的抗人IgG, 100ml/well37°C孵育1h

5洗涤Buffer洗板三次,加入显色液,100 ml/well,避光反应10~15min

6加入H2SO4终止反应,50 ml/well

7ELISA Reader 读取OD490 光密度值,分析和比较病人血清和正常血 清中TFAR19自身抗体的表达水平。

潜伏期特点:

长短与细胞接种密度、种类、使用的培养基性质有关。

(1)细胞贴附后进入潜伏期,细胞无增殖。少见分裂相,细胞有运动活动。

(2)初代培养 细胞潜伏期约为2496小时或更长,

连续细胞系和肿瘤细胞潜伏期约624小时。

(3)细胞接种密度大潜伏期短。

(4)细胞出现分裂相增多时,标志细胞进入指数增生期。

指数增生期(logarithmic growth phase)

特点:细胞增殖zui旺盛阶段,分裂相增多。

细胞分裂指数(mitotie index MI)

表示每1000个细胞中的分裂相数。

条件:分裂相数与细胞种类、培养成分、pH培养箱温度有关。

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