关于莱尔:
合肥莱尔生物科技有限公司办公地址位于安徽省合肥市,国家重要的科研教育基地、现代制造业基地和综合交通枢纽,多年来秉承着“客户至上”的企业精神标准化的质控检验,致力于化学试剂行业内的发展和创新,从而大大提高了产品质量,拥有着优质的产品供应链和专业的销售技术团队,发展迅速,为客户提供优质的产品、良好的技术支持、健全的售后服务。
主营ELISA试剂盒、细胞株、抗体、耗材、培养基、生物试剂、生化试剂盒研发与销售的高科技企业,涵盖技术研发、技术指导、技术转让、实验外包、课题代做等服务。公司拥有着经验丰富的技术人员,多年来通过不断与众多业内人士的交流、论证,致力于拓展生物化学领域,以高水准的产品为准则回馈广大用户,助跑众多新老客户的科研之路。
土壤脲酶(UE)试剂盒-微量法注意:正式测定之前选择预期差异大的样本做预测定。
产品内容:
试剂一:甲苯2mL×1 瓶,4℃保存;(自备)
试剂二:粉剂×1 瓶,临用前加入9mL 蒸馏水,充分溶解待用,4℃保存;用不完的试剂4℃保存;
试剂三:液体19mL×1 瓶,4℃保存;
试剂四A 液:液体0.4mL×1 支,4℃保存;
试剂四B 液:液体1.6mL×1 瓶,4℃保存;临用前将A 液倒入B 液中混合,待用;用不完的试剂4℃保存一周;
试剂五:液体 2mL×1 瓶,4℃保存;
标准品:液体 1mL×1 支,1mg/mL 氮标准液。
土壤脲酶(UE)试剂盒-微量法产品说明:
S-UE能够水解尿素,产生氨和碳酸。土壤脲酶活性与土壤的微生物数量、有机物质含量、
全氮和速效氮含量呈正相关。土壤脲酶活性反应了土壤的氮素状况。利用靛酚蓝比色法测定脲酶水解尿素产生的NH3-N。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96 孔板、研钵、冰、甲苯(不允许快递)和蒸馏水。
操作步骤:
土壤脲酶(UE)试剂盒-微量法a.培养
测定管 | 对照管 | |
风干土样(g) | 0.05 | 0.05 |
试剂一(μL) | 20 | 20 |
振荡混匀,使土样全部湿润,室温放置 15min | ||
试剂二(μL) | 90 | |
蒸馏水(μL) | 90 | |
试剂三(μL) | 190 | 190 |
混匀,放入 37℃水浴培养 24h 后,10000g 常温离心 10min,取上清液。 | ||
b.将培养结束的上清液稀释10 倍(取0.1mL 上清液,加入0.9mL 蒸馏水)。若最终计算得到的ΔA仍大于0.5继续稀释。
c.标准品的准备:吸取适量的标准溶液,稀释至10、8、6、4、2、1、0.5、0μg/mL。
d.测氨量(在微量玻璃比色皿或96 孔板中加入下列试剂)
测定管 | 对照管 | 标准管 | |
稀释后的上清液(μL)/标准品 | 80 | 80 | 80 |
试剂四(μL) | 15 | 15 | 15 |
试剂五(μL) | 15 | 15 | 15 |
充分混匀,室温放置 20min | |||
蒸馏水(μL) | 90 | 90 | 90 |
混匀,于 630nm 处,蒸馏水调零,读吸光值 A,计算ΔA=A 测定管-A 对照管。每个测定管设一个对照管。标准曲线的建立:根据标准管的浓度(y)和吸光度(x,减去浓度为 0 的空白管),做标准曲线。
土壤脲酶(UE)试剂盒-微量法脲酶活力计算
根据标准曲线,将ΔA带入公式(x)计算测定中样品的浓度(μg/mL)y值。单位的定义:每天每g土样中产生1μgNH3-N定义为一个酶活力单位。
脲酶活力(U/g 土样)=y×10×V反总÷W÷T=60×y
10:稀释倍数;T:反应时间,1d;V反总:反应体系总体积,0.3mL;W:样本质量,0.05g。