土壤酸性转化酶试剂盒-分光光度法
免费会员
生产厂家关于莱尔:
合肥莱尔生物科技有限公司办公地址位于安徽省合肥市,国家重要的科研教育基地、现代制造业基地和综合交通枢纽,多年来秉承着“客户至上”的企业精神标准化的质控检验,致力于化学试剂行业内的发展和创新,从而大大提高了产品质量,拥有着优质的产品供应链和专业的销售技术团队,发展迅速,为客户提供优质的产品、良好的技术支持、健全的售后服务。
主营ELISA试剂盒、细胞株、抗体、耗材、培养基、生物试剂、生化试剂盒研发与销售的高科技企业,涵盖技术研发、技术指导、技术转让、实验外包、课题代做等服务。公司拥有着经验丰富的技术人员,多年来通过不断与众多业内人士的交流、论证,致力于拓展生物化学领域,以高水准的产品为准则回馈广大用户,助跑众多新老客户的科研之路。
土壤酸性转化酶试剂盒-分光光度法正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
S-AI 在 pH 为 4.5~5.0(酸性)条件下催化蔗糖不可逆地分解为果糖和葡萄糖,是土壤微生物蔗糖代谢关键酶之一。
测定原理:
S-AI 催化蔗糖降解产生还原糖,进一步与 3,5-二硝基水杨酸反应,生成棕红色氨基化合物,在 510nm 有特征光吸收,在一定范围内 510nm 光吸收增加速率与 AI 活性成正比。
土壤酸性转化酶试剂盒-分光光度法自备用品:
可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、移液器、1mL 玻璃比色皿和蒸馏水。
试剂组成和配制:
试剂一:液体 50mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:粉剂×1 瓶,4℃保存;临用前加入 25mL 试剂一充分溶解备用;用不完的试剂 4℃ 保存;
试剂三:液体 20mL×1 瓶,4℃保存;
样品处理:
新鲜土样自然风干或 37 度烘箱风干,过 30~50 目筛。
土壤酸性转化酶试剂盒-分光光度法测定步骤和加样表:
试剂名称(μL) | 测定管 | 对照管 |
风干土样(g) | 0.1 | 0.1 |
试剂一 | 800 | |
试剂二 | 800 |
混匀, 37℃准确水浴 30min,95℃水浴 10min 左右(盖紧,以防水分散失),流水冷却,充分混匀(以保证浓度不变),10000g 25℃离心 10min,取上清液
上清液 | 700 | 700 |
试剂三 | 350 | 350 |
混匀,95℃水浴 10min(盖紧,以防止水分散失),流水冷却后充分混匀, 510nm 处,蒸馏水调零,记录各管吸光值 A,如果吸光值大于 2,可以用蒸馏水稀释后测定(计算公式中乘以相应稀释倍数),ΔA=A 测定-A 对照。
土壤酸性转化酶试剂盒-分光光度法活性计算:
标准条件下测定的回归方程为 y = 0.0016x -0.001;x 为标准品浓度(μg/mL),y 为吸光值。单位的定义:每天每 g 土样中产生 1mg 还原糖定义为一个 S-AI 活力单位。
S-AI 活力(μg/d /g 土样)=[(ΔA +0.001) ÷0.0016×V 反总÷W÷T ÷1000=240×(ΔA+0.001)
V 反总:反应体系总体积:0.8mL;T:反应时间,1/48d;W:样本质量,0.1g;1000:1mg=1000μg。