关于莱尔:
合肥莱尔生物科技有限公司办公地址位于安徽省合肥市,国家重要的科研教育基地、现代制造业基地和综合交通枢纽,多年来秉承着“客户至上”的企业精神标准化的质控检验,致力于化学试剂行业内的发展和创新,从而大大提高了产品质量,拥有着优质的产品供应链和专业的销售技术团队,发展迅速,为客户提供优质的产品、良好的技术支持、健全的售后服务。
主营ELISA试剂盒、细胞株、抗体、耗材、培养基、生物试剂、生化试剂盒研发与销售的高科技企业,涵盖技术研发、技术指导、技术转让、实验外包、课题代做等服务。公司拥有着经验丰富的技术人员,多年来通过不断与众多业内人士的交流、论证,致力于拓展生物化学领域,以高水准的产品为准则回馈广大用户,助跑众多新老客户的科研之路。
二胺氧化酶检测试剂盒微量法活性说明书
注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义:
DAO(EC1.4.3.6)广泛存在于动物(肠粘膜、肺、肝脏、肾脏等)、植物和微生物中。催化多胺氧化为醛,其活性与核酸和蛋白合成密切相关,能够反映肠道机械屏障的完整性和受损伤程度。
测定原理:
DAO 催化尸胺产生醛和*,外源添加过量的辣根过氧化物酶,催化*氧化邻联茴香胺生成氧化型邻联茴香胺,在 460nm 处有特征吸收峰,通过测定该波长吸光度增加速率, 计算 DAO 活性。
自备实验用品及仪器:
天平、低温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板、蒸馏水。
二胺氧化酶检测试剂盒试剂组成和配制:
提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存。试剂一:液体 0.25mL×1 支,4℃保存。
试剂二:液体 2mL×1 管,4℃保存。
试剂三:液体 1mL×1 管,4℃保存。
粗酶液提取:
1. 组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL 提取液)进行冰浴匀浆,然后 10000g,4℃离心 20min,取上清,置冰上待测。
2. 细菌、真菌:按照细胞数量(104 个):提取液体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议 500万细胞加入 1mL 提取液),冰浴超声波破碎细胞(功率 300w,超声 3 秒,间隔 7 秒,总时间 3min);然后 10000g,4℃,离心 10min,取上清置于冰上待测。
3. 血清等液体:直接测定。
二胺氧化酶检测试剂盒测定操作表:
1、分光光度计/酶标仪预热 30min,调节波长至 460nm,蒸馏水调零。
2、操作表
| 对照管 | 测定管 |
粗酶液(μ L) | 50 | 50 |
提取液(μ L) | 128 | 108 |
试剂一(μ L) | 2 | 2 |
试剂二(μ L) | 20 | 20 |
试剂三(μ L) |
| 20 |
混匀,37℃水浴 30min,微量石英比色皿/96 孔板,蒸馏水调零,测定 460nm 吸 光值。Δ A=A 测定-A 对照。二胺氧化酶检测试剂盒 | ||