关于莱尔:
合肥莱尔生物科技有限公司办公地址位于安徽省合肥市,国家重要的科研教育基地、现代制造业基地和综合交通枢纽,多年来秉承着“客户至上”的企业精神标准化的质控检验,致力于化学试剂行业内的发展和创新,从而大大提高了产品质量,拥有着优质的产品供应链和专业的销售技术团队,发展迅速,为客户提供优质的产品、良好的技术支持、健全的售后服务。
主营ELISA试剂盒、细胞株、抗体、耗材、培养基、生物试剂、生化试剂盒研发与销售的高科技企业,涵盖技术研发、技术指导、技术转让、实验外包、课题代做等服务。公司拥有着经验丰富的技术人员,多年来通过不断与众多业内人士的交流、论证,致力于拓展生物化学领域,以高水准的产品为准则回馈广大用户,助跑众多新老客户的科研之路。
测定意义:
淀粉酶(EC3.2.1.1)是催化淀粉水解的一类酶的总称。土壤中的淀粉酶主要来自于微生物,是一种重要的酶制剂,广泛应用于粮食加工、食品、酿造、发酵、纺织品工业和医药行业。
测定原理:
淀粉酶水解淀粉产生还原糖,可与 3,5-二硝基水杨酸反应生成红棕色物质,在 508nm 处有特征吸收峰,颜色深浅在一定范围内与还原糖量成正比。
土壤淀粉酶(S-AL)检测试剂盒自备实验用品及仪器:
天平、水浴锅、低温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板、甲苯。
试剂的组成和配制:
试剂一:液体 8mL×1 瓶,4℃保存。试剂二:液体 3mL×1 瓶,4℃保存。试剂三:液体 10mL×1 瓶,4℃保存。
测定操作表:
| 对照管 | 测定管 |
土样(g) | 0.02 | 0.02 |
甲苯(μ L) | 10 | 10 |
25℃静置 15min | ||
试剂一(μ L) | 110 | 50 |
试剂二(μ L) |
| 60 |
充分混匀,37℃震荡 1h,8000rpm,25℃,离心 10min | ||
上清液(μ L) | 100 | 100 |
试剂三(μ L) | 100 | 100 |
充分混匀,90℃水浴 5min,待冷却后,于微量石英比色皿/96 孔板中测定 508nm 吸光值,分别记为 A 对照管和 A 测定管,△A=A 测定管-A 对照管。 | ||
土壤淀粉酶(S-AL)检测试剂盒计算公式:
a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下
标准曲线:y = 0.2525x - 0.034,R² = 0.9917
酶活单位定义:每g 土样每天催化生成 1mg 还原糖为一个酶活力单位。S-AL(mg/d /g 鲜重)=(△A +0.034)÷ 0.2525×V 反总÷W÷T
= 10.464×(△A +0.034)÷W
V 反总:反应体系总体积,0.11mL;T:反应时间,1/24d;W:样本质量,g。b.用 96 孔板测定的计算公式如下
标准曲线:y = 0.1263x - 0.034,R² = 0.9917
酶活单位定义:每g 土样每天催化生成 1mg 还原糖为一个酶活力单位。S-AL(mg/d/g)=(△A +0.034)÷ 0.1263×V 反总÷W÷T
=20.928×(△A +0.034)÷W
土壤淀粉酶(S-AL)检测试剂盒V 反总:反应体系总体积,0.11mL;T:反应时间,1/24d; W:样本质量,g。