起订量:
初级会员第9年
生产厂家 上海懋康生物科技有限公司是一家致力于生命科学和生物技术领域的高科技企业。公司由在国内科研试剂领域有着十几年从业经验的专业技术团队和企业管理团队组建而成,专门从事以抗体、细胞因子、免疫检测试剂盒等免疫学产品为主的生物试剂的研发与销售。公司代理40余家欧美著名生物技术公司的相关产品,能为生命科学多研究领域的广大科研人员提供数万种抗体、数千种蛋白以及相关检测试剂盒等。
上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科学和生物技术领域研究的试剂、仪器和实验室消耗品与实验服务工作,主要从事细胞生物学、植物学、分子生物学、免疫学、生物化学、蛋白组学。生物制药与诊断试剂研发生产等领域。本公司秉承“以人为本,以诚为信、合同守信”的经营理念。坚持"品质保障"的原则为广大客户提供优质产品。
SYBR Green II RNA Gel Stain (10,000× in DMSO)
RNA凝胶染料
产品标签
SYBR Green II;GoldView;Acridine Orange 吖啶橙;GelRed; GelGreen;溴化乙锭(EB);SYBR Green I;
产品信息
产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格(元) |
SYBR Green II RNA Gel Stain (10,000× in DMSO) RNA凝胶染料 | MF0752-100UL | 100µl | 780 |
SYBR Green II RNA Gel Stain (10,000× in DMSO) RNA凝胶染料 | MF0752-500UL | 500µl | 2950 |
产品描述
SYBR Green II是目前已知电泳凝胶中RNA检测较灵敏的染料之一,在琼脂糖或聚丙烯酰胺凝胶中低检到100pg RNA或ssDNA的单一条带(使用254nm紫外反射光源照射,并用宝丽来667黑白胶片和SYBR滤光片拍照)。即使用300nm透射光也能检测到500pg RNA的单一条带。SYBR Green II的灵敏度明显强于溴化乙啶(EB)。标准琼脂糖迷你胶EB低检出1.5ng单链核酸的单一条带(使用300nm透射光照射并用橙-红明胶滤光片拍照)。
SYBR Green II在变性琼脂糖/甲醛凝胶和聚丙烯酰胺/尿素凝胶中的检测灵敏度有点降低,然而仍优于EB。为了获得大的检测灵敏度,琼脂糖/甲醛凝胶必须在EB染色前清洗数小时。相反,不做任何的清洗或脱色步骤,用SYBR Green II染色的琼脂糖/甲醛凝胶或聚丙烯酰胺/尿素凝胶能检测到1ng RNA单一条带(254nm反射照明)和4ng RNA单一条带(300nm透射照明)。SYBR Green II在RNA检测具备这一灵敏度的特性归因于几个因素,包括*的荧光量子产量、结合能力和荧光增强。
本品为溶于DMSO 的10,000×的SYBR Green II RNA核酸染料,可用于:1)Northern Blot、起始位点作图或cDNA制备前对RNA产物的小量分析;2)高分辨率变性梯度凝胶电泳(DGGE)后对5S rRNA迁移方式的观察;3)单链构象多态性(SSCP)中的DNA染色;4)PCR扩增前对DNA染色。
注意事项
必须警告用户注意,目前尚无关于SYBR Green II 对人体的致突变性或毒性的数据。由于该染料与核酸结合,应当被看作潜在诱变剂,使用时要小心谨慎。在处理DMSO储存液时应特别小心,因DMSO能促进有机分子进入组织。强烈建议处理DMO储存液需戴双层手套。和所有的核酸染料一样,含SYBR Green II RNA核酸染料的溶液需先穿过活性炭再丢弃。活性炭之后必须焚烧来破坏染料。
SYBR Green II可通过乙醇沉淀法从核酸中去除。异丙醇沉淀法去除效果稍差些。正丁醇萃取、氯萃防取和酚萃取法无法有效去除该染料。
先用EB染色的凝胶可接下来用SYBR Green II染色,根据电泳后染色(post-staining)的标准步骤操作。与直接用SYBR Green II染色相比较可能灵敏度有些降低。
不要在玻璃器皿中稀释SYBR Green II储存液,因其会结合到玻璃上。在聚丙烯器皿中稀释储存液。
SYBR Green II不会干扰酶反应。
当用SYBR Green II染Northern或Southern Blot凝胶,建议在预杂交液和杂交液内加入0.1%-0.3% SDS。
不建议用254nm紫外透射仪对凝胶拍照,因紫外光源的轮廓会出现在照片上。需要使用允许525nm光透过且排斥其他波长光的滤光片。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
光谱特征
SYBR Green II RNA核酸染料可用常见的紫外反射和透射激发光源,以及手持式紫外灯检测。SYBR Green II的大激发波长为497nm,但还有一个二级激发峰集中在254nm附近。与RNA结合的SYBR Green II的荧光发射集中在520nm。这些光谱特性让SYBR Green II适用于多种凝胶检测仪,从紫外反射(上紫外)和透射仪(下紫外)到氩离子激光器和水银灯激发的凝胶扫描仪。
使用方法
一、使用前准备工作
使用前将本品取出并回温至室温,使DMSO*解冻、溶液均一。于离心机上短暂离心确保所有溶液到管底。*次使用时可将本品分装成多个小份后冻存,小份染料能更快溶解。
二、 染色方法
1.电泳后染色(后染,推荐)
2.电泳前染色(预染)
三、 观察和凝胶成像
3.1 使用300nm紫外透射光或254nm紫外反射光(灵敏度更高)照射染色凝胶。
3.2 为了加灵敏度,建议使用黑白胶片,可用的SYBR Green照相滤光片(Thermo fisher, #S7569)拍照。许多其他的黄色或绿色明胶或玻璃纸滤光片也能用来拍照,但绝大多数可能会减低灵敏度。EB染色凝胶拍照用的橙-红滤光片不适合于SYBR Green II染色凝胶。
3.3 用的SYBR Green照相滤光片(Thermo fisher, #S-7569)和Polaroid 667黑白胶片对凝胶进行拍照。染色凝胶基本无背景荧光,当检测少量RNA,允许长期胶片曝光。对于300nm透射,通常F-stop设置4.5时曝光1-2s足够。对于254nm反射(特别是手持灯),大约需要曝光1-1.5min以得到大灵敏度。
相关产品
货号 | 名称 | 规格 |
MF0751-100UL | SYBR Green I Nucleic Acid Gel Stain (10,000× in DMSO) 核酸凝胶染料 | 100µl |
MF0752-100UL | SYBR Green II RNA Gel Stain (10,000× in DMSO) RNA凝胶染料 | 100µl |
MF0753-1ML | GoldView Nucleic Acid Gel Stain (10,000×) 核酸染料(10,000×) | 1ml |
MF0754-500UL | MKRed Nucleic Acid Gel Stain (10,000× in Water) 核酸凝胶染料(效果同GelRed) | 500µl |
MF0755-500UL | MKGreen Nucleic Acid Gel Stain (10,000× in Water) 核酸凝胶染料(效果同GelGreen) | 500µl |
MF0756-1G | Ethidium Bromide (EB) 溴化乙锭(EB,粉末) | 1g |
— —Written/Edited by V. Shallan【版权归MKBio懋康所有】
上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科学和生物技术领域研究的试剂、仪器和实验室消耗品与实验服务工作,主要从事细胞生物学、植物学、分子生物学、免疫学、生物化学、蛋白组学。生物制药与诊断试剂研发生产等领域。 本公司秉承“以人为本,以诚为信、合同守信”的经营理念。坚持"品质保障"的原则为广大客户提供优质产品。
SYBR Green II RNA Gel Stain (10,000× in DMSO) RNA凝胶染料 分子生物学
SYBR Green II RNA Gel Stain (10,000× in DMSO) RNA凝胶染料 分子生物学