组织/细胞裂解液重要特点以及选择指南(MKBIO)
上海懋康生物科技有限公司
2018/10/4 23:23:39>> 进入商铺
前言:
在免疫印迹(WB)、免疫沉淀(IP)、免疫共沉淀(Co-IP),以及染色质免疫沉淀(ChIP)等许多研究组织或细胞内蛋白表达,蛋白纯化以及蛋白-蛋白、蛋白-核酸间互作的各种免疫实验内,首先要做的步就是进行组织(细胞)裂解,通过破坏细胞膜或细胞核膜的屏障,将要待研究的对象释放到体外环境中。为此,拥有合适的组织/细胞裂解液是开展实验重要的一环。
针对各种下游实验的特点,懋康生物(MKBio)提供几种常见的组织/细胞裂解液,基本涵盖用户需求。
总表:各种组织/细胞裂解液主要特点和应用差异(MKBIO)
产品 货号 | MP1501 | MP1502 | MP1503 | MP1504 | MP1505 | MP1506 | MP1507 | MP1508 |
产品 名称 | RIPA裂解液(强) | RIPA裂解液(中) | RIPA裂解液(弱) | WB/IP裂解液 | NP-40裂解液 | SDS裂解液 | RIPA裂解液(强,无抑制剂) | WB/IP裂解液(无抑制剂) |
有效裂解成分 | 1% Triton X-100,1%脱氧胆酸钠,0.1% SDS | 1% NP-40,0.5%脱氧胆酸钠,0.1% SDS | 1% NP-40,0.25%脱氧胆酸钠 | 1% Triton X-100 | 1% NP-40 | 1% SDS | 1% Triton X-100,1%脱氧胆酸钠,0.1% SDS | 1% Triton X-100 |
裂解强度 | 强 | 中 | 温和 | 温和 | 温和 | 强 | 强 | 温和 |
对膜蛋白的提取 | 很好 | 较好 | 一般 | 一般 | 一般 | 很好 | 很好 | 一般 |
对胞浆蛋白的提取 | 很好 | 很好 | 很好 | 很好 | 很好 | 很好 | 很好 | 很好 |
对核蛋白的提取 | 很好 | 较好 | 较好 | 较好 | 较好 | 很好 | 很好 | 较好 |
胞浆磷酸化蛋白提取 | 很好 | 很好 | 很好 | 很好 | 很好 | 很好 | 很好 | 很好 |
核转录因子提取 | 很好 | 很好 | 很好 | 很好 | 很好 | 很好 | 很好 | 很好 |
蛋白酶抑制剂 | 含有 | 含有 | 含有 | 含有 | 含有 | 含有 | 不含 | 不含 |
磷酸酶抑制剂 | 含有 | 含有 | 含有 | 含有 | 含有 | 含有 | 不含 | 不含 |
主要用途 | WB,IP | WB,IP | WB,IP,Co-IP | WB,IP,Co-IP | WB,IP,Co-IP | WB,ChIP | WB,IP | WB,IP,Co-IP |
组织/细胞裂解液选择说明:
a) 对于普通的WB,IP,Co-IP,推荐使用WB/IP裂解液(# MP1504-100ML),经此裂解所得的产物没有非常粘滞的透明状DNA团块形成,不必采用超声处理等就可以非常理想地用于后续操作。另外,此裂解液裂解的产物也适合用于磷酸化蛋白的WB检测。
b) 对于某些特殊蛋白的IP,如果WB/IP裂解液(# MP1504-100ML)效果不理想,可尝试用RIPA(强,中,弱)或NP-40裂解液。若发现IP背景很高,说明非特异性蛋白被沉淀下来,则需选用裂解强度较高的裂解液,如RIPA(强或中)。如果发现目的蛋白无法被沉淀下来,说明裂解液的强度过强,可使用较温和的裂解液如RIPA(弱)或NP-40裂解液。
c) 对于某些难溶解蛋白的WB,如果WB/IP裂解液(# MP1504-100ML)效果不理想,可尝试使用裂解强度更高的裂解液如RIPA(强,中)或SDS裂解液。
d) 对于特定用途需要自行添加特定抑制剂或不需添加抑制剂,可考虑选择RIPA裂解液(强,无抑制剂)(# MP1507-100ML)或WB/IP裂解液(无抑制剂)(# MP1508-100ML),后者很多情况下兼容酶活性和生物小分子的检测,具体兼容性如何请自行测试,我司无相应数据提供。
— —Written/Edited by V. Shallan【版权归MKBio懋康所有】
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