牛小反刍兽疫抗体(PPR Ab)Elisa试剂盒试剂盒组成
1  30 倍浓缩洗涤液  20ml×1 瓶  7  终止液  6ml×1 瓶 
2  酶标试剂  6ml×1 瓶  8  标准品（240pg/ml）  0.5ml×1 瓶 
3  酶标包被板  12 孔×8 条  9  标准品稀释液  1.5ml×1 瓶 
4  样品稀释液  6ml×1 瓶  10  说明书  1 份 
5  显色剂A 液  6ml×1 瓶  11  封板膜  2 张    
6  显色剂 B液  6ml×1/瓶  12  密封袋 1 个 

牛小反刍兽疫抗体(PPR Ab)Elisa试剂盒操作步骤
1.  标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀
释。 
120pg/ml  5 号标准品 150µl的原倍标准品加入 150µl标准品稀释液 
60pg/ml  4 号标准品 150µl的5 号标准品加入 150µl标准品稀释液 
30pg/ml  3 号标准品 150µl的4 号标准品加入 150µl标准品稀释液 
15pg/ml  2 号标准品 150µl的3 号标准品加入 150µl标准品稀释液 
7.5pg/ml  1 号标准品 150µl的2 号标准品加入 150µl标准品稀释液 
2.  加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、
待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50µl，待测样品孔中先加样品稀释液40µl， 
然后再加待测样品 10µl（样品zui终稀释度为 5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽
量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。 
3.  温育：用封板膜封板后置37℃温育 30 分钟。    
4.  配液：将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用 
5.  洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置 30 秒后弃去，如此
重复 5次，拍干。 
6.  加酶：每孔加入酶标试剂50µl，空白孔除外。  
7.  温育：操作同 3。 
8.  洗涤：操作同 5。 
9.  显色：每孔先加入显色剂 A50µl，再加入显色剂 B50µl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色
10 分钟. 
10.  终止：每孔加终止液 50µl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。 
11.  测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD 值）。 测定应在加终止
液后 15 分钟以内进行。

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