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面议公司采用小鼠S100B蛋白(S100B)Elisa Kit的全是进口原材料研,发灵敏性高,高效性,*抗体,吸附均匀、吸附性好,回收利用率高、可靠性强,无效包退包换,公司提供免费代测服务,各种种属ELISA试剂盒产品齐全,质量可靠。
产品名称 | 小鼠S100B蛋白(S100B)Elisa Kit |
英文名称 | Mouse S100B ELISA Kit |
规格 | 48T/96T |
小鼠S100B蛋白(S100B)Elisa KitMouse S100B ELISA Kit
S-100蛋白是一组低分子量的钙结合蛋白,因其在中性饱和硫酸铵中*溶解而得名。目前,共发现约20种结构与功能相似、存在于不同组织、可调节细胞内和细胞外Ca2+的S-100蛋白。其中S-100B蛋白是一种分子量为21 ku的酸性蛋白,其为由2个β亚单位组成的二聚体,经肾脏清除,半衰期约2 h;它在脑组织中含量丰富,远高于其他组织。S-100B具有广泛的生物学活性,在细胞增生、分化、基因表达、细胞凋亡中具有重要作用,但其生理意义尚未*阐明。正常情况下,S-100B蛋白不能通过血-脑屏障进入血液,但在一些病理情况下可检测到血清S-100B升高。目前,关于S-100B蛋白通过血-脑屏障的确切机制仍不清楚。研究表明:S-100B可作为恶性黑色素瘤的辅助诊断和疗效评价指标,以及一些神经系统疾病的检测指标。近年来,S-100B被广泛应用于评价脑外伤、脑出血、缺血性脑血管病、麻醉、休克等引起的脑损伤。所提供的ELISA Kit是典型的夹心法酶联免疫吸附测定试剂盒(ELISA)。预先包被的抗体为多克隆抗体。检测相抗体也为多克隆抗体,经*(biotin)标记。样品和*标记抗体先后加入酶标板孔反应后,PBS或TBS洗涤。随后加入过氧化物酶标记的亲和素反应;经过PBS或TBS的*洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的待测因子呈正相关。
试剂准备:
1. 小鼠S100B蛋白(S100B)Elisa Kit使用前将所有的试剂和标本缓慢均衡至室温(18-25oC),试剂不能直接在37oC溶解。
2. 标准品(冻干品):每瓶标准品加入标准品稀释液1mL,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为2000pg/mL。准备7个稀释标准品的EP管,每个EP管中加入150μL的标准品稀释液,如图所示依次倍比稀释成不同的梯度, 标准品稀释液(0pg/mL)直接作为空白孔。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
3. 浓洗涤液:用580mL蒸馏水或去离子水将20mL浓洗涤液稀释至600mL,进行30倍稀释。
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样本处理及要求:
1. 小鼠S100B蛋白(S100B)Elisa Kit血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.
7. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。