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该选谁呢?比一比单抗和多抗的优缺点

时间:2014-09-01      阅读:1984

    多克隆抗体能识别任一抗原上的多个表位,而单克隆抗体仅检测任一抗原上的一个表位。两者都是各有优势,那么我们该选谁呢?来一起看看单抗和多抗的优缺点:

【单克隆抗体】
优点展示:
 1. 杂交瘤制得后,就成为了恒定的再生源,所有批次都将相同–对确保实验步骤和结果的一致性和标准化非常有帮助。
 2. 单克隆抗体通常在切片和细胞染色造成的背景较低。因为它们以更强特异性检测一个靶表位,所以不太可能与其它蛋白质发生交叉反应。
 3. 由于具有特异性,单克隆抗体非常适于用作分析测定中的一抗,或者用于检测组织中的抗原,并且通常所产生的背景染色显著低于多克隆抗体。
 4. 与多克隆抗体相比,单克隆抗体的同质性非常高。如果实验条件保持不变,单克隆抗体的各实验结果重现性很高。
 5. 单克隆抗体的特异性能使其在混合物中和抗原地结合。
不足之处:
·可产生大量特异性抗体,但是可能特异性过强。
·经过抗原的化学处理后比多克隆抗体更易于丢失表位。这可通过使用同一抗原的两个或多个单克隆抗体进行补偿。

【多克隆抗体】
优点展示:
 1. 克隆抗体可有助于放大低表达水平的靶蛋白信号,因为靶蛋白可在多个表位上结合不止一个抗体分子。但是这会给定量实验造成不利影响,因为结果将变得不准确。
 2. 由于能识别多个表位,多克隆抗体可在IP/ChIP中得到更好的结果。
 3. 比单克隆抗体更能容许抗原中的微小变化。
 4. 它们会识别出与免疫原蛋白质具有高同源性的蛋白质,或者从非免疫原物种的组织样品中筛选靶蛋白,例如当未测试物种中的抗原性质未知时,有时会使用多克隆抗体。这也使得检测免疫原序列以确定是否有任何交叉反应性非常重要。
 5. 多克隆抗体通常是检测变性蛋白质的。
 6. 多表位通常可提供更为有力的检测。
 7. 多克隆抗体不适用于探测抗原的特定结构域,因为抗血清通常可识别多个结构域。
不足之处:
·易于产生批次间差异。
·产生大量非特异性抗体,有时可能在某些应用中产生背景信号。
·多表位使得检测免疫原序列以确定是否有任何交叉反应性非常重要。
 

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